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1、超聲波提取腎蕨總黃酮及鑒別黃鎖義，羅建華，蒙春越，李容【關(guān)鍵詞】超聲波提??；,,腎蕨；,,總黃酮；,,鑒別 摘要：目的為充分利用腎蕨植物資源，避免資源的浪費(fèi)，探討腎蕨植物總黃酮的提取及鑒別方法。方法采用超聲波乙醇浸提法從腎蕨植物中提取黃酮類物質(zhì)，對(duì)所提取的黃酮類物質(zhì)進(jìn)行驗(yàn)證，并用紫外分光光度法測(cè)定含量。結(jié)果測(cè)得樣品中總黃酮的含量為0.4039mg/ml，回收率為102.6%，其純度和產(chǎn)率均較高。結(jié)論該方法采用全物理過程，無(wú)任何污染，是提取腎蕨植物黃酮類物質(zhì)的有效途徑?！ ￡P(guān)鍵詞：超聲波提?。荒I蕨；總黃酮；鑒別 TheTotalFlavanoneofNephrole
2、piscordifolia（L.）PreslExtractionandtheIdentificationbyUltrasonicethodsTheflavonoidsNephrolepiscordifolia（L.）preslinedbyspectrophotometry.ResultsThecontentofthetotalflavanoneofnephrolepiscordifolia（L.）Preslobtainedbythismethodg/mlandtherateofrecoveryethodstogettheouteandthepurityofthefla
3、vanone.Thismethodisapurelyphysicalprocessandhasnopollution.Itisanideal。地生或附生于溪邊下、石縫中或樹干上。主產(chǎn)于我國(guó)西南及福建、臺(tái)灣、廣東、廣西、浙江、湖南。其藥用部位為骨碎補(bǔ)科植物腎蕨(Nephrolepiscordifolia(L.)Presl.)的塊莖或全草。性味功效為：甘、澀、涼。清肺止咳，止血，清熱利濕。用全草煎服可治濕熱黃疸；地莖加糖濃煎沖酒服，可治療疝氣；配杉樹尖、夏枯草、野蘿卜菜煎服，可治淋濁、小便點(diǎn)滴、疼痛難忍〔2〕。還具有很好的抗菌、抗微生物、抗腫瘤等作用〔3〕。近年來(lái)，超聲技
4、術(shù)應(yīng)用于提取植物中的生物堿、苷類、生物活性物質(zhì)、動(dòng)物組織漿的毒質(zhì)等研究已有報(bào)道〔4，5〕，表明其具有能耗低、效率高、不破壞有效成分的特點(diǎn)。很多研究表明，利用超聲波產(chǎn)生的強(qiáng)烈振動(dòng)、高的加速度、強(qiáng)烈的空化效應(yīng)、攪拌作用等，可加速植物材料中的有效成分進(jìn)入溶劑，從而增加有效成分的提取率，縮短提取時(shí)間，并且還可避免高溫對(duì)提取成分的影響〔5〕。但超聲技術(shù)應(yīng)用于提取蕨類植物中黃酮類物質(zhì)的研究尚未見報(bào)道，本文報(bào)道用超聲波提取腎蕨植物總黃酮及鑒別?！ ?儀器與試劑 1.1儀器KQ5200DB型數(shù)控超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司）；UV755B紫外可見分光光度計(jì)（上海分析儀器總廠
5、）；ZFI型三用紫外分析儀(上海顧村光電儀器廠)；SHBIII循環(huán)水式多用真空泵（鄭州長(zhǎng)城科工貿(mào)有限公司）?！ ?.2試劑95%乙醇AR；亞硝酸鈉AR；硝酸鋁AR；正丁醇AR;氫氧化鈉AR；三氯化鋁AR；鹽酸AR；氨水AR；鎂粉AR;乙酸鎂AR;冰醋酸AR；乙酸乙酯AR；蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品（中國(guó)藥品生物制品檢定所）；新鮮腎蕨植物采自廣西金秀縣?！ ?方法與結(jié)果 2.1總黃酮成分提取取新鮮腎蕨植物，烘干，粉碎。稱取腎蕨植物粉末約6g，加80ml95%乙醇，超聲波提取2.5h，抽濾。濾渣再加80ml95%乙醇，超聲波提取2.5h，抽濾，合并兩次濾液，減壓回收乙醇至濾液僅剩25m
6、l為止，放置250ml容量瓶中，用60%乙醇稀釋至刻度，得樣品液?！ ?.2測(cè)定方法依據(jù)以蘆丁為對(duì)照品測(cè)定腎蕨植物中總黃酮的含量，加入鋁離子試劑，同時(shí)控制適宜pH值，使黃酮化合物與鋁鹽形成絡(luò)合物，在可見光區(qū)能獲得穩(wěn)定的特征吸收峰?！ ?.3定量實(shí)驗(yàn)總黃酮的含量測(cè)定 2.3.1波長(zhǎng)的選擇取樣品液適量，在0.30ml5%亞硝酸鈉溶液存在的堿性條件下，經(jīng)硝酸鋁顯色后，以試劑為空白參比液在420~700nm波長(zhǎng)范圍測(cè)定絡(luò)合物的吸光度，絡(luò)合物于510nm波長(zhǎng)處有最大吸收，故測(cè)定時(shí)選用此波長(zhǎng)?！ ?.3.2標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制分別精密吸取蘆丁對(duì)照液（0.10mg/ml）0.00，0.
7、50，1.00，2.00，3.00，4.00，5.00ml于10.00ml容量瓶中，分別加入5%亞硝酸鈉溶液0.30ml，搖勻，靜置6min；再加10%硝酸鋁溶液0.30ml，搖勻，靜置6min；再加4%氫氧化鈉溶液4.00ml，用60%乙醇稀釋至刻度，搖勻，靜置12min，以試劑作空白，于510nm處測(cè)吸光度。吸光度測(cè)定結(jié)果見表1。根據(jù)表1得回歸方程：A=-0.0311+13.5184C，r=0.9999?！ ?.3.3提取物含量的測(cè)定精密吸取樣品液0.5ml，置10.00ml容量瓶，按標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備方法測(cè)定吸光度A=2.699，根據(jù)回歸方程：A=
