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1、超聲波提取小葉榕總黃酮及鑒別【摘要】 目的為充分利用小葉榕植物資源,避免資源的浪費(fèi),探討小葉榕總黃酮的提取及鑒別方法。方法采用超聲波乙醇浸提法從小葉榕中提取總黃酮類物質(zhì),對所提取的黃酮類物質(zhì)進(jìn)行驗(yàn)證,并用分光光度法測定含量。結(jié)果測得供試品溶液中總黃酮的含量C=0.3916mg/ml,回收率為100.16%,其純度和產(chǎn)率均較高。結(jié)論該方法采用全物理過程,無任何污染,是一條提取小葉榕總黃酮類物質(zhì)的有效途徑。【關(guān)鍵詞】超聲波提??;小葉榕;總黃酮;鑒別 Abstract:ObjectiveTodevelopamethodforthe
2、extractionandidentificationoftotalflavanoneofXiaoyerong.MethodsTheflavonoidsXiaoyerongetryinetheflavanoneofXiaoyerong.ResultsThecontentofthetotalflavanoneofXiaoyerongg/mlandtherateofrecoveryethodisapurelyphysicalprocessandhasnotanypollution.Itisanidealent;Xiaoyerong;
3、Totalflavanone;Identification小葉榕為桑科植物榕樹FicusmicrocarpaL.f.的干燥葉,又名細(xì)葉椿、細(xì)葉榕、垂葉榕,屬??拼粚俪>G大喬木,高20~25m,生氣根[1~2]。全年可采收,斬取葉和幼枝,除去樹枝,取凈葉片,曬干。小葉榕多生長于村邊或山林中,分布于廣西、廣東、福建、臺(tái)灣、浙江南部、云南、貴州。印度、緬甸、馬來西亞也有?! ⌒∪~榕既可作風(fēng)景樹、行道樹,樹皮纖維可制魚網(wǎng)和人造棉,又具有藥用價(jià)值。小葉榕的莖、皮、果、葉、膠汁等均可入藥,具有祛風(fēng)清熱、活血解毒、散淤理濕等功效。民間多用于治
4、療關(guān)節(jié)風(fēng)濕痛、跌打損傷、小便不通、風(fēng)火牙痛、急性痢疾及腸炎、疥癬、痔瘡等病癥。其葉、皮、果等提取的浸膏是治療咳嗽、感冒類中成藥的主要原料。近年來,超聲技術(shù)應(yīng)用于提取植物中的生物堿、苷類、生物活性物質(zhì)、動(dòng)物組織漿的毒質(zhì)等研究已有報(bào)道[3~4],表明其具有能耗低、效率高、不破壞有效成分的特點(diǎn)。很多研究表明,利用超聲波產(chǎn)生的強(qiáng)烈振動(dòng)、高的加速度、強(qiáng)烈的空化效應(yīng)、攪拌作用等,可加速植物材料中的有效成分進(jìn)入溶劑,從而增加有效成分的提取率,縮短提取時(shí)間,并且還可避免高溫對提取成分的影響[4],但超聲技術(shù)應(yīng)用于提取小葉榕中黃酮類物質(zhì)的研究尚未
5、見報(bào)道。本文報(bào)道用超聲波提取小葉榕總黃酮及鑒別?! ?儀器與試劑 1.1儀器 HS10260D型超聲波清洗器(超聲工作頻率40kHz,天津市恒奧科技發(fā)展有限公司);UV-2450型紫外-可見分光光度計(jì)(日本島津);ZF7C型三用紫外分析儀(上??等A生化儀器制造有限公司);2×Z-1旋片式真空泵(浙江黃巖求精真空泵廠);AUY220型電子天平(日本島津)?! ?.2試劑 甲醇AR;乙醇AR;鎂粉AR;鹽酸AR;蘆丁(Rutin)對照品(中國藥品生物制品檢定所);新鮮小葉榕采自貴州省興義市滄江鄉(xiāng)?! ?方法與結(jié)果 2.1總黃
6、酮成分提取 取新鮮小葉榕,烘干(55℃),粉碎(過三號篩)。取55℃干燥至恒重的小葉榕粉末(過三號篩)約0.2g,精密稱定,置100ml量瓶中,加70%乙醇90ml,,超聲處理(功率250in,放冷,用70%乙醇稀釋至刻度,搖勻,濾過,得供試品溶液。 2.2測定方法依據(jù) 以蘆丁為對照品測定小葉榕中總黃酮的含量,用鹽酸-鎂粉顯色法,在可見光區(qū)能獲得穩(wěn)定的特征吸收峰?! ?.3定量實(shí)驗(yàn)-總黃酮的含量測定 2.3.1對照品溶液的制備 精密稱取蘆丁對照品適量,加甲醇制成每毫升中含蘆丁0.2308mg的溶液,即得?! ?.3.2
7、波長的選擇精密量取蘆丁對照品溶液(0.2308mg/ml)和供試品溶液各1.0ml,分別置加有鎂粉100mg的具塞刻度試管中,將試管置冷水?。?5℃左右)中緩緩滴加濃鹽酸3.0ml,搖勻,加70%乙醇至6ml,搖勻,置沸水浴中保溫35min,取出,迅速冷卻至室溫,用70%乙醇補(bǔ)充至原體積,以相應(yīng)試劑為空白,在400~700nm波長范圍內(nèi)掃描測定吸收光譜。 采用鹽酸-鎂粉顯色法對總黃酮進(jìn)行顯色并進(jìn)行全波長掃描。結(jié)果發(fā)觀,用鹽酸-鎂粉顯色后,蘆丁對照品、供試品的最大吸收波長基本一致,均為(510±5)nm,重復(fù)性好,同時(shí)空白溶液顯
8、色前后及蘆丁對照品、樣品顯色前在該波長處均無明顯吸收,故選擇鹽酸-鎂粉顯色法,在510nm波長處測定小葉榕總黃酮含量?! ?.3.3標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備 精密量取對照品溶液1.0,1.5,2.0,2.5,3.0ml,分別置加有鎂粉100mg的具塞刻度試管中,將試管置