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1、Survivin在膽管癌組織中的表達(dá)及其與VEG【摘要】目的：探討凋亡抑制蛋白Survivin在膽管癌組織中的表達(dá)及其與血管內(nèi)皮生長因子(vascularendothelialgroaandexploreitsrelationmunohistochemicaltechiqueaandnormalbileducttissues.51samplesofcholangiocarcinomaJanuary2003toDecember2005,andservedasthetestgroup,and10samplesofnormalbileducttissuesascontrolgroup.Result
2、s:1)Theexpressionrateofsurvivinincholangiocarcinomaalbileducttissuearkablelysignificant(P<0.01).TheexpressionofSurvivinincholangiocarcinomaordifferentiation,tumorlocationandlymphnodemetastasis(P>0.05).2)TheexpressionrateofVEGFincholangiocarcinomaalbileducttissueaphnodemetastasis(P<0.05),bu
3、tnotordifferentiation,tumorlocation(P>0.05).VEGFexpressionofthepatientsphnodemetastasisphnodemetastasis.3)TheexpressionofbothsurvivinandVEGF,andesample.Conclusion:SurvivinandVEGFmayplayanimportantroleintumorgenesis,tumorprogression,infiltrationandmetastasisofcholangiocarcinoma,andaterelationinan
4、giogenesis. 【KEYa·Survivin·Vascularendothelialgromunohistochemistry 膽管癌是一種嚴(yán)重威脅人類健康的惡性腫瘤，發(fā)病率有逐漸增加的趨勢[1]。隨著分子生物學(xué)的發(fā)展，人們已能在基因水平上了解癌基因及相關(guān)因子的表達(dá)與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展的關(guān)系。Survivin是新近發(fā)現(xiàn)的一種凋亡抑制基因，屬于凋亡抑制蛋白(inhibitorofapoptosisprotein,IAP)家族的新成員，在腫瘤形成過程中與細(xì)胞凋亡的抑制、細(xì)胞增生及血管生成密切相關(guān)，是腫瘤預(yù)后不良的標(biāo)志。血管內(nèi)皮生長因子(vascularendothelialgrowth
5、factor，VEGF)是一種公認(rèn)的最重要和最強(qiáng)的促血管生成因子，其在多種腫瘤中高表達(dá)，并與腫瘤的浸潤、轉(zhuǎn)移和預(yù)后不良密切相關(guān)。本研究應(yīng)用SP免疫組織化學(xué)方法檢測膽管癌組織中Survivin和VEGF的表達(dá)，并探討二者在膽管癌發(fā)生、發(fā)展和轉(zhuǎn)移過程中的作用。 1 資料與方法 1.1 一般資料 選取山東大學(xué)齊魯醫(yī)院普外科2003年1月—2005年12月臨床資料完整的51例膽管癌根治切除術(shù)后存檔蠟塊為實(shí)驗(yàn)組，所有組織均經(jīng)病理組織學(xué)診斷為膽管癌，其中男37例，女14例;年齡35～74歲，平均年齡56.1歲;高分化10例，中分化25例，低分化16例;膽管腺癌48例，黏液腺癌1例，黏液細(xì)胞癌1例，鱗
6、癌1例;有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移21例，無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移30例。另取同期10例膽管結(jié)石手術(shù)患者的經(jīng)病理組織學(xué)檢查證實(shí)為無癌變的正常膽管組織作對照組?！ ?.2 主要試劑 兔抗人Survivin多克隆抗體、兔抗人VEGF多克隆抗體和即用型免疫組織化學(xué)超敏VltrasensitiveTMSP試劑盒均購自福建邁新生物技術(shù)開發(fā)有限公司?！ ?.3 實(shí)驗(yàn)方法 采用VltrasensitiveTMSP免疫組織化學(xué)染色法，所有標(biāo)本均用10%甲醛固定，石蠟包埋，連續(xù)切片3張，厚度為4μm。常規(guī)脫蠟、水化，抗原修復(fù)，內(nèi)源性過氧化物酶阻斷10min，非免疫性山羊血清室溫下孵育10min。一抗室溫下孵育60min，二抗室溫下孵育
7、10min，鏈霉素抗生素物素-過氧化物酶溶液室溫下孵育10min。DAB溶液顯色5min，蘇木精復(fù)染，梯度乙醇脫水，二甲苯透明，中性樹膠封片?！ ?.4 結(jié)果判斷 Survivin表達(dá)以細(xì)胞質(zhì)中出現(xiàn)棕黃色顆粒為陽性細(xì)胞;在400倍光學(xué)顯微鏡下至少觀察5個視野，陽性細(xì)胞數(shù)>5%定為陽性表達(dá)，≤5%為陰性表達(dá)。VEGF表達(dá)以細(xì)胞質(zhì)中出現(xiàn)棕黃色顆粒為陽性細(xì)胞;陽性細(xì)胞數(shù)>10%定為陽性表達(dá)，≤10%為陰
