益腎通絡解毒湯對糖尿病腎病大鼠腎臟功能的影響

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1、益腎通絡解毒湯對糖尿病腎病大鼠腎臟功能的影響【關鍵詞】益腎通絡解毒湯血糖血脂腎功能尿微量白蛋白與尿蛋白含量實驗研究　糖尿病腎病(DN)是糖尿病的常見嚴重微血管并發(fā)癥之一，已成為終末期腎功能衰竭(ESRF)的主要原因，故對DN的早期防治顯得尤為重要。實驗作為本課題機理研究的基礎，觀察益腎通絡解毒湯對糖尿病腎病大鼠腎臟損害的保護作用。1材料與方法1.1藥品與試劑鏈脲佐菌素(STZ)由Sigma公司生產；益腎通絡解毒湯為長春中醫(yī)藥大學第一附屬醫(yī)院制劑室自制，由生地、人參、枸杞子、黃芪、土茯苓等8味藥組成；尿微量白蛋白酶免疫試劑盒購自上海德波生物技術有限公司。

2、1.2動物MAC12γ放射免疫測定儀(天津DPC公司制造)，DG3022A酶聯免疫檢測儀(國營華東電子管廠制造)。1.4動物模型及分組大鼠60只在適應性喂養(yǎng)7d后，禁食但不禁水12h，按體重隨機分為2組，即正常對照組10只(A組)，DN模型制作組50只。模型制作組單次腹腔注射STZ52mg/kg(臨用前用0.1mol/L枸櫞酸緩沖液溶解，pH4.2)，正常對照組僅腹腔注射等體積上述緩沖液。注射STZ72h后，尾靜脈采血測空腹血糖并同時測尿糖，血糖≥16.7mmol/L，尿糖以上者列入DN觀察對象?！　⒃炷３晒Φ?5只雄性大鼠，按體重、空腹血糖隨

3、機分為空白對照組(B組)；益腎通絡解毒湯處理的中藥實驗組(C組)；苯那普利處理的陽性對照組(D組)，每組15只?！　〗o藥途徑為分別將臨用前配成的混懸液灌胃，中藥實驗組按5g/kg體重給益腎通絡解毒湯濃縮液，陽性對照組按15mg/kg體重給苯那普利混懸液，正常對照組和DN模型組則灌服等體積飲用水，連續(xù)給藥12周，每日上午1次。動物單籠飼養(yǎng)，自由進食飲水。1.5標本收集實驗過程中及12周末，按實驗要求在不同時期將大鼠置入代謝籠內，準確收集每只大鼠24h尿液，記錄尿量后，按待測指標要求進行樣品預處理，留樣本于-20℃待測尿蛋白等。收集尿液期間動物禁食，自由飲

4、水，盡量減少聲、光等對動物的刺激。12周末處死前稱重，將大鼠乙醚麻醉下眶后靜脈采血，肝素抗凝，2000r/min離心10min后，分離血清，－74℃冰箱里凍存，備測血肌酐及其他生化指標。打開腹腔，快速切除腎臟，在腹主動脈插管后予4℃預冷的生理鹽水反復灌洗后，濾紙吸干，去掉包膜，即刻稱重。1.6血、尿生化指標血糖、血脂、血清肌酐、尿素氮，均采用日立7150型全自動生化分析儀測定。尿微量白蛋白與尿蛋白含量分別采用ELISA法(放射免疫法)及考馬斯亮藍法測定。并計算12周末尿白蛋白排泄率(UAER)。1.7統(tǒng)計學處理所有數據用均數±標準差(±s)表示，采用S

5、PSS11.5軟件進行OneWayANOVA分析檢驗。以P＜0.05為有顯著性統(tǒng)計學意義。2.324h尿微量白蛋白動態(tài)變化比較(見表3)。造模后4、6、8、12周各組DN大鼠24h尿微量白蛋白較A組顯著增加(P＜0.01)，并隨病程延長呈緩慢上升趨勢。C組、D組明顯低于B組(P＜0.05)，C組和D組之間比較，24h尿微量白蛋白在8周、12周末C組優(yōu)于D組，有顯著性統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。表明益腎通絡解毒湯和苯那普利均有降低尿微量白蛋白的作用，但C組較D組效果更佳。表1各組實驗大鼠12周末GLU、BUN、CRE、Ccr結果比較表2各組實驗大鼠12

6、周末血脂比較　　3討論3.1改善糖代謝雖然部分DM患者良好的血糖控制同樣會導致DN的發(fā)生，但不可否認的是高血糖造成的損害。研究表明，糖代謝紊亂是DM慢性并發(fā)癥包括DN的啟動因素，也是DN發(fā)生和發(fā)展的基本因素，過多的葡萄糖集中在腎組織是導致DN的根本原因［1］。3.2調節(jié)脂代謝盡管嚴格控制血糖可以減少DN的發(fā)生［2］，但在血糖控制良好的患者中，仍有26％最終發(fā)展為DN。目前認為脂代謝紊亂是DN一種獨立的損傷因素［3］，血脂異常在DN的早期常已存在，血脂異常與DN程度密切相關［4］。3.3減少蛋白尿蛋白尿的出現是DN發(fā)展的必然結果，靈敏地反映腎臟損害的程度

7、，微量白蛋白尿在DN早期診斷中具有重要意義［5］。3.4抑制腎肥大、保護腎功能腎臟肥大和高濾過是DN早期的病理生理特征，且伴有腎小球濾過率(GFR)增高，GFR增高與腎小球直徑呈正相關，這種早期的腎體積增大和GFR增高具有可逆性。通常早期以Ccr反映GFR的變化意義，腎重/體重比值表示腎臟肥大情況，這樣可排除個別體重較大的動物具有較大腎臟的個體差異，以及每個動物本身的腎臟隨周齡增加而增長的因素，使表示腎重增長的參數比較客觀?！　”狙芯拷Y果表明，益腎通絡解毒湯逐漸降低了DN大鼠的血糖水平，可減輕各種因素對腎臟的損害，在緩解多飲、多食、多尿、體重下降等癥狀

8、的同時，對DN大鼠的闌尾、肢體感染、白內障等合并癥亦具有一定的防治作用。具有一定的調節(jié)脂代謝作