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《中藥天年飲對衰老大鼠卵巢端粒酶活性的影響 》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關內(nèi)容在工程資料-天天文庫。
1、中藥天年飲對衰老大鼠卵巢端粒酶活性的影響謝紅林王陪李皓巖薛景鳳【摘要】目的觀察中藥天年飲對衰老大鼠卵巢抗氧化能力和端粒酶活性的作用。方法D-半乳糖連續(xù)腹腔注射建立亞急性衰老的大鼠模型，并給予天年飲灌胃。分別采用黃嘌呤氧化酶法、硫代巴比妥酸法、PCR-ELISA法檢測卵巢組織SOD活性、MDA含量和端粒酶活性。結(jié)果天年飲可明顯提高衰老大鼠卵巢組織SOD和端粒酶活性，降低MDA含量，天年飲用藥組與衰老模型組比較差異顯著（P＜0.01或P＜0.05）。結(jié)論中藥天年飲可提高衰老大鼠卵巢抗氧化能力和端粒酶活性，具有延緩卵巢細胞衰老的作用?！娟P鍵詞】天年飲衰老端粒酶抗氧化卵巢1988年Meit
2、es〔1〕提出，在衰老的過程中，神經(jīng)-免疫-內(nèi)分泌網(wǎng)絡起著重要作用，而下丘腦-垂體-性腺軸（HPG軸）是其重要組成部分，研究HPG軸的衰老機制以及藥物對其調(diào)節(jié)作用已成為目前抗衰老研究的熱點。女性產(chǎn)生更年期癥狀的主要原因是卵巢功能減退，伴隨生殖腺衰老所發(fā)生的性激素分泌及調(diào)節(jié)機制的改變不僅導致生殖功能的減退，同時也與衰老的各種表現(xiàn)有關〔2〕。端粒酶是腫瘤研究領域的熱點，近年的研究表明，幾乎所有的人腫瘤細胞中可檢測到端粒酶活性，端粒酶的活性與癌的發(fā)生發(fā)展密切相關〔3〕。目前，在衰老及延緩衰老的研究中，端粒及端粒酶也逐漸受到重視。天年飲由劉河間《宣明論方》何首烏丸加味而成，能填精補髓、烏發(fā)
3、延年。本課題組的研究已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，中藥天年飲可提高衰老大鼠的免疫功能、延緩雄性大鼠性腺衰老〔4，5〕，本文觀察了天年飲對衰老雌性大鼠卵巢SOD活性、端粒酶活性及MDA含量的影響，以期為進一步研究中藥延緩卵巢功能衰退開辟另一途徑。 1材料與方法 1.1實驗動物及分組雌性SD大鼠，體重180～250g。將大鼠隨機分為4組，正常組、衰老模型組、天年飲用藥組和陰性對照組，每組16只。其中模型組、用藥組、陰性對照組大鼠均采用D-半乳糖連續(xù)腹腔注射（按200mg/kg給藥，1次/d，連續(xù)40d）制作亞急性衰老的動物模型。模型組大鼠造模成功后不再做任何處理；用藥組大鼠造模成功后每天用天年飲灌胃，
4、共30d；陰性對照組大鼠在造模成功后每天灌胃生理鹽水，量及灌胃時間同用藥組大鼠?！ ?.2藥品與試劑天年飲由炙何首烏、懷牛膝、肉蓯蓉、淫羊藿、丹參、茯苓等6味中藥組成，熬制后每毫升含生藥1.5g，按16.2g/kg灌胃給藥。D-半乳糖(D-gal)，北京化學試劑公司(批號020402)；端粒酶活性檢測試劑盒，德國Roche公司；超氧化物歧化酶（SOD）和丙二醛（MDA）檢測試劑盒，南京建成生物工程研究所?！ ?.3端粒酶活性的檢測 1.3.1標本制備各組分別隨機選取8只大鼠，斷頭處死，迅速取出雙側(cè)卵巢稱重，生理鹽水漂洗后，4℃，10000r/min離心1min，棄上清液；將沉淀組
5、織液氮冷凍后研磨，加入洗液洗滌，同上條件離心1min；沉淀加入裂解液懸浮，冰浴30min，4℃，13000r/min離心20min，取上清液-70℃冰箱保存。 1.3.2檢測端粒酶活性采用德國Roche公司的端粒酶活性檢測試劑盒（TeloTAGGGTelomerasePCRELISAPLUS）,按試劑盒說明進行操作，包括端粒擴增、雜交及ELISA檢測，分別于檢測波長450nm和參考波長690nm處檢測吸光度，并根據(jù)下面公式計算結(jié)果： RTA=(AS-ASO)AS,IS(ATS8-ATS8,O)/ATS8,IS×100 1.4卵巢組織SOD活性、MDA含量的測定取各組余下的
6、8只大鼠，斷頭處死，迅速取雙側(cè)卵巢，稱重后加入生理鹽水冰浴下勻漿，4℃、100000r/min離心10min，取上清液-70℃冰箱保存。分別采用黃嘌呤氧化酶法和硫代巴比妥酸法按試劑盒說明進行操作，檢測卵巢組織中的SOD活性和MDA含量?！ ?.5統(tǒng)計處理采用SPSS11.0統(tǒng)計軟件，以方差分析進行統(tǒng)計處理?！ ?結(jié)果 2.1端粒酶活性各組大鼠卵巢端粒酶活性見表1。衰老模型大鼠卵巢端粒酶活性明顯低于正常大鼠（P＜0.01）；天年飲可抑制衰老大鼠卵巢端粒酶活性的降低，天年飲用藥組大鼠端粒酶活性明顯高于衰老模型組大鼠（P＜0.01）?！ ”?各組大鼠卵巢端粒酶活性（略） 與模型組比較
7、，*P＜0.01；與天年飲用藥組比較，#P＜0.01；n=8 2.2SOD活性和MDA含量各組大鼠卵巢組織SOD活性和MDA含量見表2?！ ∨c正常大鼠比較，衰老模型大鼠卵巢SOD活性明顯降低、MDA含量明顯升高；中藥天年飲可提高衰老大鼠卵巢SOD活性、降低MDA含量?！ ”?各組大鼠卵巢組織SOD活性和MDA含量（略） 與正常組比較，*P＜0.01；與衰老模型組比較，#P＜0.01，##P＜0.05；n=8 3討論 絕經(jīng)期婦女產(chǎn)生更年期癥狀的主要原因是卵巢功能
