中藥天年飲對衰老大鼠卵巢端粒酶活性的影響論文

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1、中藥天年飲對衰老大鼠卵巢端粒酶活性的影響論文謝紅林王陪李皓巖薛景鳳【摘要】目的觀察中藥天年飲對衰老大鼠卵巢抗氧化能力和端粒酶活性的作用。方法D-半乳糖連續(xù)腹腔注射建立亞急性衰老的大鼠模型，并給予天年飲灌胃。分別采用黃嘌呤氧化酶法、硫代巴比妥酸法、PCR-ELISA法檢測卵巢組織SOD活性、MDA含量和端粒酶活性。結(jié)果天年飲可明顯提高衰老大鼠卵巢組織SOD和端粒酶活性，降低MDA含量，天年飲用藥組與衰老模型組比較差異顯著（P＜0.01或P＜0.05）。結(jié)論中藥天年飲可提高衰老大鼠卵巢抗氧化能力和端粒酶活性，具有延緩卵巢

2、細(xì)胞衰老的作用?！娟P(guān)鍵詞】天年飲衰老端粒酶抗氧化卵巢1988年Meites［1］提出，在衰老的過程中，神經(jīng)-免疫-內(nèi)分泌網(wǎng)絡(luò)起著重要作用，而下丘腦-垂體-性腺軸（HPG軸）是其重要組成部分.freelg/kg給藥，1次/d，連續(xù)40d）制作亞急性衰老的動物模型。模型組大鼠造模成功后不再做任何處理；用藥組大鼠造模成功后每天用天年飲灌胃，共30d；陰性對照組大鼠在造模成功后每天灌胃生理鹽水，量及灌胃時間同用藥組大鼠。1.2藥品與試劑天年飲由炙何首烏、懷牛膝、肉蓯蓉、淫羊藿、丹參、茯苓等6味中藥組成，熬制后每毫升含生藥1.

3、5g，按16.2g/kg灌胃給藥。D-半乳糖(D-gal)，北京化學(xué)試劑公司(批號020402)；端粒酶活性檢測試劑盒，德國Roche公司；超氧化物歧化酶（SOD）和丙二醛（MDA）檢測試劑盒，南京建成生物工程研究所。1.3端粒酶活性的檢測1.3.1標(biāo)本制備各組分別隨機(jī)選取8只大鼠，斷頭處死，迅速取出雙側(cè)卵巢稱重，生理鹽水漂洗后，4℃，10000r/min離心1min，棄上清液；將沉淀組織液氮冷凍后研磨，加入洗液洗滌，同上條件離心1min；沉淀加入裂解液懸浮，冰浴30min，4℃，13000r/min離心20min，

4、取上清液-70℃冰箱保存。1.3.2檢測端粒酶活性采用德國Roche公司的端粒酶活性檢測試劑盒（TeloTAGGGTelomerasePCRELISAPLUS）,按試劑盒說明進(jìn)行操作，包括端粒擴(kuò)增、雜交及ELISA檢測，分別于檢測波長450nm和參考波長690nm處檢測吸光度，并根據(jù)下面公式計(jì)算結(jié)果：RTA=(AS-ASO)AS,IS(ATS8-ATS8,O)/ATS8,IS×1001.4卵巢組織SOD活性、MDA含量的測定取各組余下的8只大鼠，斷頭處死，迅速取雙側(cè)卵巢，稱重后加入生理鹽水冰浴下勻漿，4℃、10000

5、0r/min離心10min，取上清液-70℃冰箱保存。分別采用黃嘌呤氧化酶法和硫代巴比妥酸法按試劑盒說明進(jìn)行操作，檢測卵巢組織中的SOD活性和MDA含量。1.5統(tǒng)計(jì)處理采用SPSS11.0統(tǒng)計(jì)軟件，以方差分析進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理。2結(jié)果2.1端粒酶活性各組大鼠卵巢端粒酶活性見表1。衰老模型大鼠卵巢端粒酶活性明顯低于正常大鼠（P＜0.01）；天年飲可抑制衰老大鼠卵巢端粒酶活性的降低，天年飲用藥組大鼠端粒酶活性明顯高于衰老模型組大鼠（P＜0.01）。表1各組大鼠卵巢端粒酶活性（略）與模型組比較，*P＜0.01；與天年飲用藥組比較

6、，#P＜0.01；n=82.2SOD活性和MDA含量各組大鼠卵巢組織SOD活性和MDA含量見表2。與正常大鼠比較，衰老模型大鼠卵巢SOD活性明顯降低、MDA含量明顯升高；中藥天年飲可提高衰老大鼠卵巢SOD活性、降低MDA含量。表2各組大鼠卵巢組織SOD活性和MDA含量（略）與正常組比較，*P＜0.01；與衰老模型組比較，#P＜0.01，##P＜0.05；n=83討論絕經(jīng)期婦女產(chǎn)生更年期癥狀的主要原因是卵巢功能減退，失去排卵及分泌雌激素、孕激素的功能。卵巢分泌激素減少，導(dǎo)致圍絕經(jīng)期中老年婦女的內(nèi)分泌、免疫功能、骨代謝、

7、自由基代謝等的顯著改變，出現(xiàn)骨折、感染、癌癥和自身免疫性疾病的幾率增高以及老年癡呆癥發(fā)病率增加（女性發(fā)病率為男性的3～4倍）等臨床特征，對中老年婦女的健康造成了很大影響。機(jī)體在代謝中消耗的氧，2%～5%變成活性氧，如超氧陰離子自由基、羥自由基和過氧化氫等，而線粒體是產(chǎn)生活性氧的主要場所。在正常生理情況下，體內(nèi)存在清除自由基的防御系統(tǒng)，包括SOD、谷胱甘肽過氧化物酶等，還有一些抗氧化物質(zhì)VE，VC等。由于這些酶類及抗氧化物質(zhì)的存在，使體內(nèi)的活性氧處于生成與消除的平衡狀態(tài)，不會對機(jī)體造成損傷。隨著年齡的增長，這些抗氧化防

8、御體系活性降低，清除自由基能力下降，使體內(nèi)活性氧生成過量；過量的活性氧可以攻擊位于線粒體內(nèi)膜上的脂類、蛋白質(zhì)和mtDNA，影響線粒體的功能，導(dǎo)致細(xì)胞受損、衰老和疾病的發(fā)生［6］。端粒（Telomere）是真核細(xì)胞染色體末端一段特殊的DNA-蛋白質(zhì)復(fù)合體，在維護(hù)染色體的完整性，防止染色體自身及染色體之間的融合、DNA降解、染色體缺失及抵御細(xì)胞內(nèi)各