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《復(fù)合bfgf緩釋微球的制備與性能測(cè)定》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫。
1、復(fù)合bFGF緩釋微球的制備與性能測(cè)定作者：劉銳，黃沙，金巖，吳紅，姜玲，劉濤 【關(guān)鍵詞】,堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子PreparationandcharacteristictestofbFGFimpregnatedmicrosphere 【Abstract】AIM:Topreparethebasicfibroblastgropregnatedmicrosphereandtostudyitscharacteristics.METHODS:ThebFGFimpregnatedmicrosphereprovedemulsifiedcoldcon
2、densationmethod.Thephysicalproperties,drugcontentandencapsulationeasuredbyELISA.RESULTS:Theaveragediameterofmicrosphere,theaveragedrugcontentthesecondtothefifthdayand93.94%bytheseventhday.CONCLUSION:Thepreparationmethodissimple,rapidandaccurateandthereleaseofbFGFfromthem
3、icrospherescanbesustainedforalongertime. 【Keyicrosphere;sustainedrelease;encapsulation 【摘要】目的：制備復(fù)合堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子（bFGF）的可降解緩釋微球，考察其各項(xiàng)性能，為進(jìn)一步應(yīng)用于組織工程奠定基礎(chǔ).方法：采用改良的乳化冷凝法交聯(lián)制備復(fù)合bFGF的緩釋微球，測(cè)定微球形態(tài)、粒徑、載藥率和包裹率等，并采用ELISA法考察其體外bFGF的緩釋效能.結(jié)果：緩釋微球平均粒徑(12.4±3.6)μm；平均載藥率為0.24%，平均包裹率為96.82%.
4、d1體外釋放28.23%，2~5d時(shí)累積釋放率達(dá)到57.19%,d7時(shí)釋放減慢且累計(jì)濃度為93.94%.結(jié)論：復(fù)合bFGF的緩釋微球制備工藝簡(jiǎn)便，性能優(yōu)良；可在較長(zhǎng)時(shí)間內(nèi)持續(xù)釋放活性bFGF，與組織工程支架的結(jié)合應(yīng)用具有可行性. 【關(guān)鍵詞】堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子；微球；緩釋；包裹率 0引言 生長(zhǎng)因子的應(yīng)用一直是組織工程領(lǐng)域的重要課題之一.它具有多種生物學(xué)活性，可提供有利于細(xì)胞生長(zhǎng)的微環(huán)境，促進(jìn)新生組織血管生成等［1］.但由于生長(zhǎng)因子半衰期短，溶液進(jìn)入體內(nèi)后迅速擴(kuò)散、變性或酶解，難以保持其生物活性［2］.我們制備復(fù)合堿性成纖維細(xì)胞生
5、長(zhǎng)因子(basicfibroblastgrog/L，等電點(diǎn)9.6，Sigma公司)，人bFGF定量EiA試劑盒（QuantiKineR,RDsystems），250g/L戊二醛，丙酮，異丙醇，無水乙醚，液體石蠟，氨基乙酸為國(guó)產(chǎn)分析純，Span80(Sigma公司)為進(jìn)E1分析純，水為雙蒸水，JJ1型精確電子攪拌器儀，TGL16G高速離心機(jī)，GENESIS凍干機(jī)(Virtis公司)，BX41數(shù)碼顯微鏡（Olympus). 1.2方法 1.2.1復(fù)合生長(zhǎng)因子微球的制備將含有10g/LSpan80的液體石蠟30mL置于三口瓶中預(yù)熱至55℃
6、，快速攪拌下滴加入同樣溫度的明膠水溶液4mL，并調(diào)節(jié)攪拌速度至450r/min，繼續(xù)攪拌10min；形成油包水乳劑后迅速改冰浴，繼續(xù)攪拌10min，使其完成固化；加入250g/L戊二醛0.1mL，攪拌下預(yù)固化2h，4℃固化24h，用適量丙酮、異丙醇、乙醚洗滌，揮去乙醚，真空干燥，得淡黃色粉末狀微球，將200μL的bFGF溶液滴加在20mg的凍干明膠微球上，在室溫下保持30min以使bFGF完全融入微球.鈷60照射滅菌封存.以丙酮為分散劑將空白微球樣本及含有bFGF的微球樣本置于光鏡下，觀察其外形及分散度.同時(shí)測(cè)量500個(gè)微球的直徑計(jì)算其
7、平均粒徑.以算術(shù)平均徑為微球的平均粒徑，計(jì)算公式為：平均粒徑=n1d1+n2d2+…+nndn/n1+n2+n3+…+nn式中n1,n2…nn為粒子數(shù)，d1,d2…dn為粒徑. 1.2.2微球含量及緩釋性能測(cè)定根據(jù)人bFGF定量EIA試劑盒說明書配置標(biāo)準(zhǔn)液，在492nm處測(cè)各孔A值.以標(biāo)準(zhǔn)品0，8，16，31，62，125，250和500ng/L之A值作出標(biāo)準(zhǔn)曲線并擬合線形回歸方程.取微球樣品20mg,放入PBS緩沖液中，加熱至完全溶解，冷卻后再用緩沖液稀釋定容.測(cè)出A492nm值，然后在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查處相應(yīng)bFGF含量，并由此計(jì)算出微
8、球的載藥率以及標(biāo)準(zhǔn)率.載藥率=（bFGF質(zhì)量/緩釋微球質(zhì)量）×100%.包裹率=（bFGF質(zhì)量/緩釋微球中bFGF理論質(zhì)量）×100%.取緩釋微球(2mg)，用PBS緩沖液100mL作為溶出介質(zhì).藥物體外溶
