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1、奧沙利鉑對胃癌OCUM作者：王力利趙群李勇陳少軒楊進(jìn)強(qiáng)單保恩焦志凱【關(guān)鍵詞】抗腫瘤【摘要】目的觀察奧沙利鉑對胃癌OCUM-2MD3細(xì)胞體外的細(xì)胞毒活性，以及對胃癌腹膜移植模型的體內(nèi)抗腫瘤作用。方法與順鉑（CDDP）比較，用MTT法和藥效學(xué)體內(nèi)實(shí)驗(yàn)法分別觀察奧沙利鉑對胃癌OCUM-2MD3細(xì)胞的體外細(xì)胞毒活性及對胃癌腹膜移植裸鼠的體內(nèi)抗腫瘤作用。結(jié)果體外實(shí)驗(yàn)證明，與CDDP相比，奧沙利鉑對人對胃癌OCUM-2MD3細(xì)胞的體外細(xì)胞毒活性均明顯增加（P<0.01），其兩者IC50值相比較，L-OHPIC50關(guān)鍵詞胃癌奧沙利鉑OCUM-2MD3
2、細(xì)胞腹水抗腫瘤.【Abstract】ObjectiveToinvestigatethecytotoxicityofL-OHPinvitro，anditsanti-tumoreffectonOCUM-2MD3bearingnudemiceinvivo.MethodsThecytotoxicityinvitrobyMTTassaysandtheanti-tumorefˉfectonOCUM-2MD3bearingnakedmiceinvivobypharmacodynamicmethodsofL-OHPorcytotoxicactivityonO
3、CUM-2MD3cellsinvitrothancisplatin（CDDP）;Threegroupsofnakedmicetreatedg/kg～2.25mg/kg，ip×3）.ConclusionL-OHPhadgreatercytotoxicityinvitro，hadalsosignificantlyanti-tumoreffectsinnudemice.KeyaofstomachL-OHPOCUM-2MD3cellsascitesanti-tumor胃癌是我國常見的惡性腫瘤之一，其發(fā)病率居各種腫瘤之首。晚期胃癌預(yù)后差，復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移后化療
4、效果不理想。多年來，5-FU一直是治療胃癌的首選藥，但治療胃癌的近期有效率不高，順鉑（CDDP）嚴(yán)重的腎毒性也限制了其臨床應(yīng)用，卡鉑（CBP）的療效并不優(yōu)于CDDP。奧沙利鉑（oxalatoplatinumtrans-1-1，2-dia-moinocyclohexane，L-OHP）是一個(gè)第三代的新型鉑類化合物，以其高效、低毒的特性脫穎而出，使胃癌化療的有效率進(jìn)一步提高。國內(nèi)外研究顯示奧沙利鉑對大腸癌、卵巢癌、肺癌、乳腺癌等均有效，而其治療胃癌的研究正逐漸成為熱點(diǎn)［1］。我們通過觀察奧沙利鉑對胃癌腹膜移植瘤細(xì)胞株OCUM-2MD3體外的細(xì)胞毒
5、活性，以及對胃癌腹膜移植模型的體內(nèi)抗腫瘤作用，并與第一代的細(xì)胞毒廣譜抗癌藥CDDP比較，探討其對晚期胃癌的化療效果?，F(xiàn)報(bào)告如下。1材料與方法1.1藥物（1）L-OHP（批號，02042812）為類白色粉末，江蘇連云港制藥提供，用前以無菌生理鹽水配置。（2）CDDP（批號，020307）為白色粉末，山東德州制藥廠生產(chǎn)，用前加無菌生理鹽水后在50℃水浴溫?zé)嶂?，配成所需濃度?.2靶細(xì)胞及動(dòng)物人胃癌OCUM-2MD3腹膜移植瘤細(xì)胞株，由日本大分醫(yī)科大學(xué)外一科八代正和教授惠贈(zèng)，裸鼠皮下移植率100%，傳代穩(wěn)定。BALB/c-nu/nu裸鼠，雌性，鼠
6、齡4周，體重18～20g，SPF環(huán)境飼養(yǎng)，購于北京中國醫(yī)科院腫瘤研究所動(dòng)物中心，動(dòng)物合格證:SCXK11-00-0005。1.3體外細(xì)胞毒活性測定采用噻唑藍(lán)還原法（MTT法）。取在DMEM，10%胎牛血清培養(yǎng)液中處于對數(shù)生長期的人胃癌OCUM-2MD3細(xì)胞，經(jīng)0.25%胰蛋白酶消化后，用D-Hanks配成3×106/ml癌細(xì)胞懸液，接種于96孔培養(yǎng)板中，180μl/孔。加入L-OHP或CDDP液（濃度分別為100、25、6.25、1.56、0.39μg/ml），20μl/孔。對照組加等體積生理鹽水，空白對照組只加培養(yǎng)液而不加化療藥。每組設(shè)3復(fù)
7、孔，置37℃、5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h后，加入MTT液10μl（美國Sigma產(chǎn)品，用PBS液配成5mg/ml），繼續(xù)培養(yǎng)4h后吸棄上清，加入二甲基亞砜（DMSO）100μl。將培養(yǎng)板置酶聯(lián)免疫檢測儀（BICELL2010全自動(dòng)酶標(biāo)儀）在630nm波長處測光密度值（OD值），按以下公式計(jì)算抑制率并求出IC50值。抑制率（%）=（對照組平均OD值-實(shí)驗(yàn)組平均OD值對照組平均OD值-空白對照組平均OD值）×100%1.4L-OHP對胃癌腹膜移植模型裸鼠的抑瘤實(shí)驗(yàn)本文在預(yù)實(shí)驗(yàn)中證實(shí)，當(dāng)每只裸鼠接種OCUM-2MD3細(xì)胞數(shù)為5×106時(shí)，腫瘤發(fā)生
8、率為100%。48只裸鼠，腹腔注射生長良好的胃癌OCUM-2MD3細(xì)胞株（5×106/0.2ml），建立腹膜種植模型。隨機(jī)分6組，即正常對照組（不接種瘤細(xì)胞）4.5
