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1、紫外分光光度法測(cè)定虎杖中白藜蘆醇的含量【關(guān)鍵詞】虎杖白藜蘆醇紫外分光光度法 Abstract:ObjectiveToestablishthedeterminationmethodforresveratrolinextractofPolygonumcuspidatum.MethodsUVspectrophotometry.ResultsThereethodissimple，rapid，accurate. Keycuspidatum；Resveratrol；UVspectrophotometry 虎杖PolygonumcuspidatumSied.et
2、Zucc，又名斑根紫金龍、活血龍、陰陽(yáng)蓮［1］，其根莖具有活血定痛、清熱利濕、止咳化痰作用。主要用于關(guān)節(jié)麻痹、濕熱黃疸、經(jīng)閉、咳嗽痰多、水火燙傷、跌打損傷等癥的治療［2］?，F(xiàn)代藥理研究表明其主要有效活性成分白藜蘆醇具有抗癌、抗氧化、抗血小板凝聚、抗菌、調(diào)節(jié)脂類代謝等多種功能。目前定量檢測(cè)白藜蘆醇的方法主要有高效液相色譜法（HPLC）［3］、氣相色譜/質(zhì)譜法(GC/MS)［4］以及氣相色譜法(GC)［5］等。國(guó)內(nèi)還未見(jiàn)有關(guān)用紫外分光光度法測(cè)定虎杖中白藜蘆醇含量的報(bào)道。本實(shí)驗(yàn)應(yīng)用紫外分光光度法測(cè)定了虎杖提取液中白藜蘆醇含量。現(xiàn)報(bào)道如下?！ ?儀器與試藥 1
3、.1儀器 GoldS54紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)（上海棱光技術(shù)有限公司）；AB204-N電子天平(Mettler-Toledo設(shè)備有限公司)；FC-160型錘式粉碎機(jī)（上海中藥機(jī)械廠制造）?！ ?.2試劑 虎杖藥材購(gòu)自江西省藥材公司（產(chǎn)地江西樟樹(shù)），經(jīng)江西醫(yī)學(xué)院馮江教授鑒定為正品虎杖，白藜蘆醇對(duì)照品由中國(guó)藥品生物制品檢驗(yàn)所提供，水為重蒸餾水，其他試劑均為分析純?！ ?方法與結(jié)果 2.1對(duì)照品溶液的制備精密稱取干燥恒重的白藜蘆醇對(duì)照品5.4mg，于50ml棕色容量瓶中,用甲醇溶解并稀釋至刻度,搖勻，即得到0.108mg·ml-1的對(duì)照品溶液?！ ?.2供試
4、品溶液的制備準(zhǔn)確稱量細(xì)塊狀虎杖10.0g，加10倍量的水，在沸騰狀態(tài)下提取180min，提取1次，冷卻后將提取液過(guò)濾，濾液定容至一定體積，即為供試樣品液。精密稱取一定量試液于50ml容量瓶中，用甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液?！ ?.3測(cè)定波長(zhǎng)的選擇將白藜蘆醇對(duì)照品和供試品溶液按實(shí)驗(yàn)方法操作，在200～500nm進(jìn)行波長(zhǎng)掃描。結(jié)果表明，對(duì)照品和供試品溶液均在305nm處有最大吸收，且兩者光譜形狀極為相似，滿足分光光度法測(cè)定的基本要求。因此，選定305nm作為測(cè)定波長(zhǎng)?！ ?.4標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制分別精密吸取“2.1”項(xiàng)下對(duì)照品溶液0，0.3，0.
5、6，0.9，1.2，1.5ml各置于10ml容量瓶中，以甲醇定容至刻度，搖勻，即得濃度分別為0，3.24，6.48，9.72，12.96，16.20μg/ml的對(duì)照品溶液。以甲醇做參比，分別測(cè)定305nm吸光度，以吸光度(A)對(duì)濃度(C)進(jìn)行線性回歸，得回歸方程A=0.13427C+0.04859(r=0.9990)。結(jié)果表明，白藜蘆醇檢測(cè)濃度在3～16μg/ml范圍內(nèi)與吸光度線性關(guān)系良好。見(jiàn)表1及圖1。表1白藜蘆醇標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度與吸光度（略） 2.5重復(fù)性實(shí)驗(yàn)取同一批虎杖樣品，精密稱取4份，按“2.2”項(xiàng)下方法分別制備成4份供試品溶液。在305nm下
6、分別測(cè)定其吸光度并計(jì)算白藜蘆醇的含量。結(jié)果(見(jiàn)表2)表明，4份提取液中白藜蘆醇的平均含量為1.46％，RSD=2.41％（n=4）。表2白藜蘆醇含量測(cè)定結(jié)果（略） 2.6回收率實(shí)驗(yàn)采用加樣回收法，精密吸取已知含量為3.32μg/ml虎杖提取液2ml于25ml容量瓶中，加入3.24μg/ml對(duì)照品溶液2ml，各4份，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，測(cè)定吸光度，計(jì)算回收率。結(jié)果得到平均回收率為98.8％，RSD為1.35％?！ ?小結(jié) 本實(shí)驗(yàn)建立了紫外分光光度法測(cè)定虎杖提取物中白藜蘆醇的方法。實(shí)驗(yàn)表明,本法具有操作簡(jiǎn)單、速度快、準(zhǔn)確度高的優(yōu)點(diǎn)。其加樣回收率和重復(fù)
7、性均較好，可作為一種虎杖提取液中白藜蘆醇含量測(cè)定的方法?！緟⒖嘉墨I(xiàn)】 ?。?］蘇文強(qiáng),楊磊,朱明華,等.中壓柱層析法分離白藜蘆醇的研究［J］.林產(chǎn)化學(xué)與工業(yè),2004,24(1):40. ?。?］江海燕,朱華,黃慧學(xué),等.炮制對(duì)虎杖中白藜蘆醇苷和大黃素的影響［J］.中草藥,2003,34(3):412. ?。?］楊紅美,陳波,曾建國(guó),等.HPLC同時(shí)測(cè)定虎杖及其提取物中4種有效成分的含量［J］.中國(guó)中藥雜志,2006,31(3):202. ?。?］馬亭,李攻科,李曉東,等.葡萄酒中白藜蘆醇的固相萃取GC/MS法測(cè)定及其生理活性的初步研究［J］.高等學(xué)?；?/p>
8、學(xué)學(xué)報(bào),2000,20(7):1023. ?。?］于貞,張影陸,趙光鰲.葡萄酒中
