高效液相色譜法測定虎杖中白藜蘆醇的含量.doc

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1、反相高效液相色譜法測定虎杖中白藜蘆醇的含量白祖海,文剛,張艷(長沙市疾病預防控制中心,長沙)摘要:采用HPLC法測定虎杖中白藜蘆醇含量。以聚酰胺柱對樣品進行預處理,排除其它成分的干擾,獲得較好分離度和高回收率。選用自填裝ODS-C18色譜柱(200mm×4.6mm,5μm),以乙醇-水(2:3,v/v)作流動相,流速為0.6ml/min,紫外光檢測波長304nm,柱溫為25℃。白藜蘆酵在0.05-0.40μg/mL范圍內具有良好的線性關系。r=0.9996,平均回收率為98.51%(n=5)。結論:該方法簡便、準確可靠,適合于中藥材虎杖中白藜蘆醇含量的測定。關

2、鍵詞:白藜蘆醇;虎杖;反相高效液相色譜法DeterminationofResveratrolinthePolygonumCuspidatumbyReversed-PhaseHPLCBAIZu-hai,WENGang,ZHANGYan(ChangshaMunicipalCenterforPreventionandControlofDiseases,Changsha,China)Abstract:AsimpleandsensitiveReversed-PhaseHPLCmethodforthedeterminationofresveratrolintheroots

3、ofPolygonumcuspidatumwasdescribed,includingthepretreatmentofsamplesbypoamidecolutah.TheseparationwasperformedonanODScolumn(200mm×4.6mm,5μm),withthemobilephaseofCH3CH2OH-H2O(2:3,v/v).Theflowrate0.6ml/minandthedetectionwavelengthwas304nm,thetemperatureofthepillarisindoortemperature.Re

4、sveratrolhavegoodlinearrelationshipintherangeof0.05-0.40μg(r=0.9996).Theaveragerecoveries(n=5)ofresveratrolwere98.51%..Asimple,accurateandsensitivemethodwithgoodreproduciabilitytodetermineresveratrolsimultaneouslyinPolygonumcuspidatumSieb.etZucc.isestablished.Keywords:Resveratrol;Po

5、lygonumcuspidatum;Reversed-PhaseHPLC.虎杖(PolygonumcuspidatumSieb.etZucc)是蓼科蓼屬植物,廣泛分布于華東、中南、遼陜甘川滇等地。虎杖根莖中主要含有蒽醌類和芪類化合物,其中芪類成收稿日期:2011-09-28修訂日期:2012-07-20作者簡介:白祖海(1978—),男,湖南岳陽人,長沙市疾病預防控制中心,主管檢驗師,碩士學位分白藜蘆醇(resveratro1)和白藜蘆醇苷(piceid),具有活血定痛、清熱利濕、止咳化痰作用[1]。白藜蘆醇具有抗氧化、抗癌、抗血小板凝聚、抗菌、調節(jié)脂類代謝、

6、保護心血管系統(tǒng)和神經系統(tǒng)等多種功能[2],被列為抗心血管病、抗癌最有前途的藥物之一?;⒄戎邪邹继J醇含量最高[3]。目前對白藜蘆醇的測定方法不少[4,5],主要有分光光度法[6]、膠束薄層色譜法[7]、電化學發(fā)光法[8]、高速逆流色譜法[8-9]、高效液相色譜法[10-11]等。建立準確可靠和簡便的測定虎杖中白藜蘆醇的含量方法對于虎杖資源的充分開發(fā)利用產生重要的實際意義,為其研究開發(fā)提供科學的依據。本研究對虎杖樣品進行初步處理,以乙醇-水為流動相,建立了測定虎杖中白藜蘆醇的反相高效液相色譜方法,該測定方法操作簡單,測定結果穩(wěn)定可靠。1實驗部分1.1儀器與試劑HL

7、PCPump裝柱機(BT3020,德國);高效液相色譜儀(安捷倫,1200系列,美國),RE-52A旋轉蒸發(fā)儀(上海亞榮生化儀器廠);WF-4000微波系統(tǒng)(上海屹堯分析儀器有限公司);高頻數控超聲波發(fā)生器(KQ-80TDB型,昆山市超聲儀器有限公司),FA2104型電子天平。乙醇(色譜純,湖南師大試劑廠);乙醇(化學純,湖南師大試劑廠);乙酸乙酯(分析純,和氏璧化工);白藜蘆醇對照品(美國Sigma公司,純度99%);虎杖藥材購自湖南九芝堂藥材公司。1.2溶液的制備1.2.1對照品溶液的配制稱取白藜蘆醇2.5mg,置25ml容量瓶中,乙醇溶解,并稀釋至刻度。

8、搖勻,得含白藜蘆醇0.10mg/ml的

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