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《j亞群禽白血病病毒感染對肉雞生長和免疫功能的影響及其env基因的》由會員上傳分享,免費在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、J亞群禽白血病病毒感染對肉雞生長和免疫功能的影響及其env基因的【中文】J亞群禽白血病病毒(SubgroupJofAvianleukosisvirus,ALV-J)是90年代初由英國鑒定出來的禽白血病病毒(ALV)新的亞群,主要引起肉雞的骨髓瘤白血病。近年來該病毒在世界范圍內(nèi)迅速傳播。我國于1999年首先在肉用型雞群中分離鑒定出了ALV-J的中國株(杜巖,崔治中等,1999),并通過接種1日齡雛雞發(fā)現(xiàn)了一株急性轉(zhuǎn)化型毒株。此后,又在中國分離出了更多的毒株(張志,崔治中等,2002)。2002年,我們從山東省某肉種
2、雞場疑似ALV-J的28周齡和38周齡的兩個雞群中分別分離出了另外2株ALV-J,分別命名為YT0201,YT0202。對病雞剖檢可見肝臟過度增大,表面有結(jié)節(jié)狀白色小的腫瘤,分布取其肝臟和脾臟混和后研磨、得到兩份病料樣品,離心后上清液無菌過濾后接種已長成單層的雞胚成纖維細(xì)胞(CEF),并維持7~10天后,以對ALV-J的特異性單抗JE9進(jìn)行間接免疫熒光反應(yīng)(IFA),結(jié)果發(fā)現(xiàn),兩份樣品在熒光顯微鏡均可觀察到細(xì)胞被染成漿亮綠色,而細(xì)胞核沒有被染色,呈現(xiàn)明顯的陽性反應(yīng),與陽性對照ALV-JSD9902株反應(yīng)一致,而陰
3、性對照則無此現(xiàn)象。同時,以相當(dāng)于ALV-J原型株HPRS-103基因組堿基#5394-5416和#7811-7794的一對引物,對2株病毒感染的CEF基因組DNA的PCR檢測中,均擴增出了2.2Kb左右特異的清晰條帶,與預(yù)期大小相符。這些表明該雞群的確存在ALV-J的感染。X狀內(nèi)皮組織增殖病(reticuloendotheliosis,RE)是指由X狀內(nèi)皮組織增殖病病毒(ReticuloEndotheliosisvirus,REV)引起的一群病理綜合征。根據(jù)病原分離和血清學(xué)的結(jié)果,表明REV是呈世界性分布的。RE
4、V不僅能引起感染禽只生長遲緩、廢棄淘汰率升高和死亡,還能引起感染雞的免疫抑制。我們將分離自寧夏一具有典型ALV-J癥狀雞群的NX0101毒株,接種1日齡商品代肉仔雞,通過動態(tài)觀測雛雞常規(guī)免疫后血清中新城疫抗體和傳染性法氏囊抗體的變化以及免疫器官指數(shù)來反應(yīng)肉雞的體液免疫功能的變化;并通過臨床觀察和定期稱重來探討ALV-J感染對肉雞的生長性能的影響。此外還通過剖檢和免疫器官的病理組織學(xué)變化進(jìn)一步驗證ALV-J對肉雞的致病性。本研究共進(jìn)行了三個動物試驗,試驗1,將ALV-JNX0101株(張志等,2001)分別以頸部皮
5、下和尿囊腔接種2組商品代肉雛雞,最后一組肉雞接種相應(yīng)量的滅菌生理鹽水作為對照。試驗期為90天。試驗2,將2組1日齡商品代AA肉雞,分別經(jīng)頸部皮注射接種ALV-J的NX0101株以及共感染ALV-J的NX0101和REV的SD9901株。以未感染的肉雞作為陰性對照;試驗3,采用275只1日齡健康商品代AA肉雞,隨機分為5組,分別為ALV-J感染組、ALV-J與REVSD9901株共感染組、REVSD9901株感染組和REVHA株感染組、最后一組為未感染的對照組。按照常規(guī)方法免疫新城疫病毒疫苗和傳染性法氏囊炎病毒疫苗
6、。試驗1研究結(jié)果表明,①1日齡肉雞感染ALV-J后,表現(xiàn)出明顯的生長抑制;50日齡,ALV-J感染組體重分別相當(dāng)于對照組的50.7%和57.4%;90日齡感染組體重分別相當(dāng)于對照組的74.0%和76.4%②剖檢可見法氏囊和胸腺明顯萎縮,法氏囊指數(shù)和胸腺指數(shù)明顯下降(P對新城疫病毒(NDV)疫苗抗體反應(yīng)的抑制比單獨感染ALV-J的雞表現(xiàn)的更為嚴(yán)重;對傳染性法氏囊免疫的免疫應(yīng)答則表現(xiàn)出了應(yīng)答遲緩。這些表明ALV-J和REV的共同感染往往可以引起更為嚴(yán)重的生長抑制和免疫抑制作用。這也是我們在世界上首次通過人工接種動物試
7、驗來探討兩種病毒的在雞引起的免疫抑制的協(xié)同作用。試驗3,試驗雞群飼養(yǎng)至12日齡時,在REVHA9901感染組的雞群開始出現(xiàn)呼吸道癥狀,并發(fā)現(xiàn)部分雞排白色糞便,此后,除了對照以外的各組雞群均開始出現(xiàn)類似癥狀,14日齡時,REVHA9901感染組試驗雞群突然出現(xiàn)大批死亡(9只),死亡率為18%(9/50),在隨后的6天內(nèi)(至21日齡)感染組試驗雞群,幾乎全軍覆沒,各組死亡率統(tǒng)計結(jié)果如下:REVHA9901感染組死亡率為87.8%(43/49);REVSD9901感染組死亡率78.9%(41/52);ALV-J感染組死
8、亡率74%(37/50);REVSD9901和ALV-J混和感染組雞群死亡率則達(dá)到了93.6%(44/47)。然而,接種生