維甲酸對甲狀腺鱗癌細(xì)胞株sw579細(xì)胞增殖的影響

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1、維甲酸對甲狀腺鱗癌細(xì)胞株SW579細(xì)胞增殖的影響【關(guān)鍵詞】全反式維甲酸甲狀腺鱗癌細(xì)胞增殖細(xì)胞分化Abstract:ObjectiveToobservetheinfluencesofall-trans-retinoicacid(ATRA)onproliferationofofthyroidsquamouscellcarcinomacellline(SethodsTreatedol/L),thecellsicroscopeaconvertmicroscopeinshape;Thetheproliferationofthecellseasuredbyfloetry.Resu

2、ltsAftercellsalignantphenotypesofcellsgraduallychangedtothematurecells.Theproliferationindexdecreasedmarkedly.Thecellcycleanner,andmaybethethyroidcancercellsol/L,5×10-7mol/L,10-6mol/L).Keyouscellcarcinoma;proliferation;differentiation誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞分化成為正?;蚪咏5募?xì)胞是治療腫瘤的一種新途徑。ATRA是維生素A的衍生物,是一種公認(rèn)的腫

3、瘤細(xì)胞分化誘導(dǎo)劑,能明顯抑制某些腫瘤細(xì)胞的惡性增殖,對腫瘤細(xì)胞具有誘導(dǎo)分化作用,臨床上已用于治療早幼粒細(xì)胞白血病,并取得較好療效。近幾年發(fā)現(xiàn)[1,2],全反式維甲酸能夠誘導(dǎo)高分化型甲狀腺癌細(xì)胞分化,其作用機(jī)制可能是通過RARβ受體來調(diào)節(jié)的,但對甲狀腺鱗癌的研究還未見報道。本研究初步探討全反式維甲酸對體外培養(yǎng)的甲狀腺鱗癌細(xì)胞株SA公司);L15培養(yǎng)液(SIGMA公司);四甲基氮唑蘭(SIGMA公司);倒置顯微鏡(JAPANOLYMPUSTOKYO);流式細(xì)胞儀(美國貝克曼庫爾特有限公司);MultiskanAscent自動酶標(biāo)檢測儀。1.2細(xì)胞培養(yǎng)及實(shí)驗(yàn)分組甲狀腺鱗癌細(xì)

4、胞株STT法檢測細(xì)胞存活率李男,等:維甲酸對甲狀腺鱗癌細(xì)胞株STT(5mg/mL)孵育4h。棄去培養(yǎng)液,加入150μL二甲基亞砜,室溫30min后用酶標(biāo)儀570nm測吸光度值(A值),測定細(xì)胞存活率。細(xì)胞存活率=(實(shí)驗(yàn)組A值/對照組A值)×100%。1.5流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞周期ATRA作用48h后,以胰酶-EDTA消化,用4℃預(yù)冷的PBS吹打成單細(xì)胞懸液,離心棄上清。用PBS再洗1次,調(diào)細(xì)胞密度為106/mL以上,調(diào)整至終體積為100μL,加入DNAStain染色液(RNase終濃度50mg/L,碘化丙啶終濃度100mg/L,Triton-X100終濃度1mg/L)1

5、000μL,室溫避光15min,上機(jī)測試。1.6統(tǒng)計學(xué)處理實(shí)驗(yàn)所得數(shù)據(jù)以x±s表示,應(yīng)用SPSS統(tǒng)計軟件13.0進(jìn)行單因素方差分析及q檢驗(yàn)。2結(jié)果2.1ATRA對細(xì)胞形態(tài)特征的影響與對照組相比,ATRA低濃度組(10-7、5×10-7、10-6mol/L)細(xì)胞胞體變小且較規(guī)則,核濃縮,胞質(zhì)增多,腫瘤細(xì)胞有向正常形態(tài)轉(zhuǎn)化的趨勢,見圖1(B、C);ATRA高濃度組(5×10-6、10-5mol/L)細(xì)胞生長速度變慢,大部分細(xì)胞由多角形及長梭形回縮成球形,沒有向成熟分化的趨勢,見圖1(D)。A對照組細(xì)胞BATRA濃度為10-7mol/LCATRA濃度為10-6mol/LDA

6、TRA濃度為10-5mol/L圖1ATRA處理前后的S期細(xì)胞在細(xì)胞周期中所占比例減少,S期則有所增加(P<0.01),見表2。表2ATRA對S期細(xì)胞在細(xì)胞周期中所占比例減少,S期細(xì)胞數(shù)目增加,ATRA使細(xì)胞阻滯于S期,誘導(dǎo)細(xì)胞分化的發(fā)生。上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明ATRA對Setab,2005,90(4):2403-2411.[2]JunichiKurebayashi,Katsuhiro,etal.All-Trans-RetinoicAcidModulatesExpressionLevelsofThyroglobulinandCytokinesinaNeanPoorlyDiff

7、erentiatedPapillaryThyroidCarcinomaCellLine,KTC-11[J].ClinEndocrinolMetab,2000,85(8):2889-2896.[3]SchmutzlerC,Hoang-VuC,RugerB,etal.HumanthyroidcarcinomacelllinesshoihikoFuruya,HirokiShimura.HistoneDeacetylaseInhibitorsRestoreRadioiodideUptakeandRetentioninPoorlyDifferentiateda

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