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《γ-分泌酶抑制劑dapt對食管鱗癌細胞株增殖與凋亡影響的實驗研究》由會員上傳分享,免費在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、分類號雖量2至:!壟UDC查!至密級公五編號!鰉窆窆曼!Q!壘Q12@江蒜大擎碩士學(xué)位論文MASTER’SDISSERTATIoN論文題目Y:盆鯊酶地劍劑墜△£!盟盒笪鱗疸細胞掛擅殖量凋圭髭喧趁塞驗巫究指導(dǎo)教師筮壺堊副熬援答辯日期2Q曼圣生魚旦墨目分類號墼窆2:12UDC受12碩士學(xué)位論文密級公玨編號!Q2窆全SlQl壘Q!窆Y一分泌酶抑制劑DAPT對食管鱗癌細胞株增殖與凋亡影響的實驗研究麟Theeffectoft--secretaseinhibitorDAPTontheproliferationandapoptosisofesophag
2、ealsquamouscarcinomacelllines作者姓名:王旭輝指導(dǎo)教師:焦志軍副教授小組成員:王文紅副教授汪毅副主任技師申請學(xué)位:碩士學(xué)科專業(yè):臨床檢驗診斷學(xué)論文提交日期:2013年4月28日論文答辯日期:2013年6月08日學(xué)位授予單位:江蘇大學(xué)學(xué)位授予日期:2013年6月17日答辯委員會主席:呂力為教授評閱人:獨創(chuàng)性l聲明本人鄭重聲明:所呈交的學(xué)位論文,是本人在導(dǎo)師的指導(dǎo)下,獨立進行研究工作所取得的成果。除文中已注明引用的內(nèi)容以外,本論文不包含任何其他個人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的作品成果。對本文的研究做出重要貢獻的個人和集
3、體,均已在文中以明確方式標(biāo)明。本人完全意識到本聲明的法律結(jié)果由本人承擔(dān)。學(xué)位論文作者簽名:圳日期:M,年()月c丫日學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書fIYrlll12frr12If9ll4lilt3I1Irl19Flljl江蘇大學(xué)、中國科學(xué)技術(shù)信息研究所、國家圖書館、中國學(xué)術(shù)期刊(光盤版)電子雜志社有權(quán)保留本人所送交學(xué)位論文的復(fù)印件和電子文檔,可以采用影印、縮印或其他復(fù)制手段保存論文。本人電子文檔的內(nèi)容和紙質(zhì)論文的內(nèi)容相一致,允許論文被查閱和借閱,同時授權(quán)中國科學(xué)技術(shù)信息研究所將本論文編入《中國學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫》并向社會提供查詢,授權(quán)中國學(xué)術(shù)期刊
4、(光盤版)電子雜志社將本論文編入《中國優(yōu)秀博碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫》并向社會提供查詢。論文的公布(包括刊登)授權(quán)江蘇大學(xué)研究生處辦理。本學(xué)位論文屬于不保密口學(xué)位論文作者簽名:皂名√劉孓力t>年b月嬸指導(dǎo)教師簽名鄉(xiāng)島喜}鄉(xiāng)3I’年毛月I戶日江蘇大學(xué)碩士學(xué)位論文研究目的:摘要檢測食管鱗狀細胞癌細胞株Ecal09和TE一1中Notch受體表達,觀察Y一分泌酶抑制劑DAPT阻斷Notch信號通路對體外培養(yǎng)的Ecal09和TE.1細胞增殖和凋亡的影響,進一步探討其作用機制,為靶向Notch通路治療食管鱗狀細胞癌提供理論依據(jù)。研究方法:(1)采用qR
5、T-PCR檢測體外培養(yǎng)的食管鱗狀細胞癌細胞株Ecal09和TE.1中Notch受體及下游靶基因Hes.1在DAPT處理前、后的表達情況。(2)應(yīng)用CCK8法檢測DAPT阻斷Notch信號對食管鱗狀細胞癌Ecal09和TE.1細胞增殖的影響。(3)通過流式細胞分析技術(shù)檢測DAPT阻斷食管鱗狀細胞癌Ecal09和TE—l細胞株Notch受體后的細胞凋亡和周期情況,評價阻斷Notch信號對細胞凋亡和周期的影響。(4)Westernblotting檢測DAPT阻斷食管鱗狀細胞癌Ecal09和TE—l細胞株Notch受體后,與細胞增殖、凋亡有關(guān)蛋白
6、CyclinDl和Bcl.2的變化,初步探討DAPT對食管鱗狀細胞癌細胞株Ecal09和TE.1增殖和凋亡影響的作用機制。研究結(jié)果:(1)體外培養(yǎng)的食管鱗狀細胞癌Ecal09和TE.1細胞株,除Notch-4幾乎不表達外,Notch.1、Notch.2和Notch.3均有一定量的表達,其中Notch.2相對于Notch.1和Notch.3有更高的表達。Notch下游靶基因之一的Hes.1也有一定量表達。(2)在DAPT處理后,Ecal09和TE.1細胞Notch.1、Notch.3和Notch.4的表達水平變化不明顯,但Notch.2表達
7、水平在DAPT作用6h后即明顯降低,下游靶基因Hes.1表達水平也顯著降低。(3)DAPT明顯抑制食管鱗狀細胞癌細胞株Etal09和TE.1細胞的體外增殖,并呈時間、劑量依賴關(guān)系。Y-分泌酶抑制劑DAPT對食管鱗癌細胞株增殖與凋亡影響的實驗研究(4)DAPT阻斷Ecal09和TE.1細胞株中Notch信號通路后,兩株細胞凋亡率明顯增加。(5)DAPT處理后的兩株細胞G0/G1期所占百分比增多,細胞周期素蛋白CyclinD1水平均降低,但Bcl.2蛋白表達水平呈現(xiàn)相反的變化,在TE.1細胞中表達降低,而在Ecal09細胞中表達增高。研究結(jié)論
8、:食管鱗狀細胞癌細胞株Ecal09和TE.1中存在Notch受體表達,Notch信號通路活化。Y.分泌酶抑制劑DAPT處理使Ecal09和TE.1細胞增殖能力降低,同時誘導(dǎo)了細胞的凋亡。其機制