厄貝沙坦對(duì)糖尿病大鼠腎臟mmp

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1、厄貝沙坦對(duì)糖尿病大鼠腎臟MMP【摘要】目的觀察厄貝沙坦對(duì)糖尿病大鼠腎臟基質(zhì)金屬蛋白酶-2和組織金屬蛋白酶抑制因子-2表達(dá)的影響。方法SPF級(jí)成年雄性SD大鼠隨機(jī)分為正常對(duì)照(N)組(n=8)、糖尿病腎病(DN)組(n=9)和厄貝沙坦(Irb)治療組(DNI)組(n=10)。8周后RT-PCR法觀察其在腎組織的表達(dá)。結(jié)果二者在N組大鼠有微弱表達(dá),DN組的表達(dá)較N組明顯增加,DNI組二者的表達(dá)較DN組減弱。二者的比值在DN組減少,DNI組升高。結(jié)論早期使用Irb能夠調(diào)節(jié)二者平衡,減少細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)聚積,從而發(fā)揮腎臟保護(hù)作用?!娟P(guān)鍵詞】厄貝沙坦基質(zhì)金屬蛋白酶-2組織金屬蛋白酶抑制因子-2糖尿病

2、腎病EffectsofirbesartanonexpressionofmatrixmetalloprotEinase-2/tissue【Abstract】ObjectiveToobservetheeffectsofirbesartanonexpressionofmatrixmetalloprotEInase-2/tissueinhibitorofmetalloproteinase-2instreptozotocininduceddiabeticrats.MethodsMaleSprague-Dalydividedintothreegroups:normalcontrolrats(groupN,

3、n=8),diabeticrats(groupDN,n=9)anddiabeticratstreatedy.RenalexpressionofMMP-2andTIMP-2inedbyRT-PCRi-quantitativeassessmentofRT-PCRshoerularexpressionofMMP-2andTIMP-2ingroupDNuchloightplayapathogeicroleindiabeticnephropathy.Irbexertedrenalprotectiveroletoearlydiabeticnephropathy,possiblythroughcorrect

4、ionthebalanceofMMP-2/TIMP-2ulationofextracelluarmatrix(ECM).【Keyatrixmetalloproteinase-2tissueinhibitorofmetalloproteinase-2diabeticnephropathy糖尿病腎病(diabeticnephropathy,DN)是糖尿病的主要并發(fā)癥和死亡原因之一,為提高糖尿病患者的生活質(zhì)量及生存率,使得早期防治糖尿病腎病尤為重要。本研究用RT-PCR方法了解基質(zhì)金屬蛋白酶-2(Matrixmetalloproteinase-2,MMP-2)和組織金屬蛋白酶抑制因子-2(Tissu

5、einhibitorofmetalloproteinase-2,TIMP-2)在鏈脲佐菌素(STZ)誘導(dǎo)的糖尿病大鼠腎組織中的表達(dá)情況,并探討新一代的血管緊張素Ⅱ受體拮抗劑(angiotensinIIreceptorantagonist,AIIRA)厄貝沙坦(irbesartan,Irb)對(duì)糖尿病大鼠尿白蛋白排泄、早期腎肥大的改變以及腎臟MMP-2和TIMP-2表達(dá)的影響,以闡明其腎保護(hù)作用機(jī)制,為DN的預(yù)防和治療提供實(shí)驗(yàn)理論依據(jù)。1材料與方法1.1糖尿病模型建立和分組選擇SPF級(jí)成年雄性SD大鼠,購(gòu)自中國(guó)科學(xué)院上海實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心[許可證號(hào):SCXK(滬)2002-0010],體重(180±20

6、)g。大鼠右腎切除2周后一次性腹腔注射STZ(Sigma公司,50mg/kg)誘導(dǎo)糖尿病模型。48h后測(cè)血糖,以隨機(jī)血糖>16.7mmol/L且尿糖強(qiáng)陽(yáng)性作為糖尿病動(dòng)物模型建立標(biāo)準(zhǔn),未達(dá)到標(biāo)準(zhǔn)者均淘汰。血糖穩(wěn)定1周后隨機(jī)分為糖尿病腎?。―N)組(n=9)和厄貝沙坦治療組(DNI,Irb50mg/kg灌胃)(n=10)。另設(shè)8只大鼠為正常對(duì)照(N)組(n=8),給予等量枸櫞酸-枸櫞酸鈉緩沖液腹腔注射。N組及DN組僅予等量自來(lái)水灌胃。實(shí)驗(yàn)期間血糖保持在20mmol/L左右。1.2一般觀察指標(biāo)和測(cè)定方法1.2.1生化指標(biāo)外周血血糖用微量血糖儀檢測(cè);血生化指標(biāo)及尿肌酐用自動(dòng)生化分析儀檢測(cè);CCr按公式

7、:尿肌酐濃度(mg/ml)×每分尿量(ml)/血肌酐濃度(mg/ml)計(jì)算,并用體重校正。1.2.2尿白蛋白測(cè)定采用液相免疫沉淀方法。1.3病理組織切片染色采用H.E染色。1.4RT-PCR(1)腎組織總RNA的提??;(2)測(cè)定RNA濃度、純度和完整性;(3)引物:MMP-2:5′GGTTTATTTGGCGGAC3′;5′TCAGCAGCCCAGCCAGTC3′[1]512bp;TIMP-2:5′

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