私立幼兒園一起宋內(nèi)氏志賀氏菌引起食物中毒實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)

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1、私立幼兒園一起宋內(nèi)氏志賀氏菌引起食物中毒實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)【摘要】目的了解一起食物中毒細(xì)菌污染情況并進(jìn)行分析，為衛(wèi)生監(jiān)督監(jiān)測(cè)提供依據(jù)。方法對(duì)中毒事件中的各個(gè)環(huán)節(jié)進(jìn)行采樣，進(jìn)行細(xì)菌總數(shù)、大腸菌群數(shù)及潛在病原菌的測(cè)定。結(jié)果餅干、玩具、砧板及餐飲具表面菌落總數(shù)超標(biāo)；淺井水大腸菌群超標(biāo)；物表及剩余食物均未分離出致病菌；107名發(fā)病幼兒園兒童，其中60例病兒及老師腹瀉物、肛拭子標(biāo)本進(jìn)行細(xì)菌學(xué)檢查，分離出6例均為宋內(nèi)氏志賀氏菌，所有樣品均未檢出沙門(mén)菌、志賀菌和金黃色葡萄球菌。結(jié)論這起食物中毒，由宋內(nèi)氏志賀氏菌污染食品而引起。食物中毒

2、事件頻發(fā)并非偶然，應(yīng)加強(qiáng)衛(wèi)生監(jiān)督和相應(yīng)技術(shù)指導(dǎo)，杜絕此類食物中毒事件的發(fā)生?！娟P(guān)鍵詞】宋內(nèi)氏志賀氏菌；食物中毒；檢測(cè)文章編號(hào)：1004-7484(2013)-12-7054-012012年9月16日，在建湖縣某鎮(zhèn)私立幼兒園，發(fā)生一起107名兒童食物中毒事件。中毒經(jīng)過(guò)：9月14日中餐紅燒雞腿和瓜湯，9月15日中餐是燉蛋和瓜湯，9月16日是肉皮燒蛋糕和瓜湯。三天的腰餐都是餅干和白開(kāi)水。全園276名兒童均在園內(nèi)吃腰餐，107名患兒有47名在園內(nèi)吃中餐，占43.93%，12名在園內(nèi)訂奶，占11.21%。9月15日晚9點(diǎn)3

3、0分，首發(fā)病例以突然發(fā)燒39°C以上，伴嘔吐、腹瀉就醫(yī)，膿血便，鏡檢：膿細(xì)胞＞15、吞噬細(xì)胞十，建湖縣人民醫(yī)院診斷為菌痢。以后同樣發(fā)病患兒相繼就醫(yī)，于16日迗高峰，經(jīng)統(tǒng)計(jì)共發(fā)病107例(男59例，女48例)，中毒率為38.8%,經(jīng)補(bǔ)充電解質(zhì)及抗生素治療，病程4、7天全部治愈。9月160,60名病兒及老師及食堂工人肛拭子進(jìn)行細(xì)菌學(xué)檢查，分離出6例均為宋內(nèi)氏志賀氏菌?；純耗挲g3-7歲。主要癥狀為腹瀉、腹痛、發(fā)熱、排稀水樣便或粘液樣便癥狀，嘔吐次，少數(shù)頭暈，外周血中白細(xì)胞總數(shù)明顯增高，在(10.5-25.0)X109/

4、L之間，中性粒細(xì)胞74-86%,其他分類無(wú)特殊改變。經(jīng)流行病學(xué)調(diào)查、現(xiàn)場(chǎng)衛(wèi)生學(xué)調(diào)查及實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)，證實(shí)這起食物中毒事件由宋內(nèi)氏志賀氏菌引起。檢查結(jié)果如下。1材料與方法1.1樣品來(lái)源食堂的刀面、砧板、餐、飲具、玩具表面采樣10份，均保存于營(yíng)養(yǎng)肉湯中送檢；園內(nèi)自來(lái)水、淺井水樣、食用油、腰餐餅干、剩余食物共7份；病人肛拭子60份樣品。1.2試劑SC增菌液、GN增菌液、堿性蛋白胨水培養(yǎng)基、SS、WS、4號(hào)瓊脂、TCBS、EMB、營(yíng)養(yǎng)瓊脂、血平板、高鹽三糖鐵及腸道桿菌生化管由杭州天和微生物有限公司提供，API20E生化板條為

5、法國(guó)梅里埃公司生產(chǎn)，宋內(nèi)氏志賀氏菌診斷血清購(gòu)自蘭州生物所，以上均在有效期內(nèi)使用。1.3分離方法1份糞便標(biāo)本，59份肛拭子標(biāo)本。將10份標(biāo)本（每份標(biāo)本兩根棉簽）其中一根直接劃線接種SS平皿為A1組，再將另一根分別接種SC及GN增菌液中培養(yǎng)為A2組。另一組50份肛拭標(biāo)本直接接種SC、GN增菌液中增菌為B組。將17份物表及可疑食物標(biāo)本接種SC、GN增菌液中培養(yǎng)為C組。以上各標(biāo)本培養(yǎng)物均按腸道致病菌檢驗(yàn)步驟進(jìn)行分離鑒定［1］。2結(jié)果2.1檢驗(yàn)結(jié)果餅干、1份玩具、砧板及小碗、湯匙、小茶杯表面菌落總數(shù)超標(biāo)，淺井水大腸菌群超標(biāo)

6、，物表及剩余食物均未分離出致病菌。60例病兒及老師腹瀉物、肛拭子標(biāo)本細(xì)菌學(xué)檢查，分離出6例均為宋內(nèi)氏志賀氏菌（5例幼兒和一名老師），所有樣品均未檢出沙門(mén)菌、副溶血性弧菌和金黃色葡萄球菌。2.2細(xì)菌鑒定2.2.1培養(yǎng)特點(diǎn)在液體培養(yǎng)基中，呈均勻渾濁生長(zhǎng)，沒(méi)有菌膜，無(wú)沉淀。在SS平板上可見(jiàn)較大、扁平、較不透明菌落。挑取可疑菌落接種于3%氯化鈉三糖鐵斜面，結(jié)果為：斜面不變，鹿層變黃不產(chǎn)氣，不產(chǎn)硫化氫。2.2.2革蘭染色鏡檢為革蘭陰性無(wú)芽胞小桿菌。2.2.3噬菌體試驗(yàn)噬菌體裂解模式：Sh裂解、E裂解。2.2.4生化鑒定生化

7、反應(yīng)結(jié)果：動(dòng)力、硫化氫、產(chǎn)氣、枸櫞酸、尿素、苯丙、靛基質(zhì)、賴氨酸、VP、乳糖、木糖均陰性，鳥(niǎo)氨酸、甘露醇、棉子糖、MR、ONPG陽(yáng)性。2API20E生化板條鑒定結(jié)果：6份肛拭子標(biāo)本檢出的細(xì)菌其生化譜完全一致，均為0104102(id=99.9%,T=0.86)。2.2.5血清分型按衛(wèi)生防疫細(xì)菌檢驗(yàn)［2］，將上述分離菌株接種于3%氯化鈉營(yíng)養(yǎng)瓊脂斜面培養(yǎng)24h，用志賀氏菌4種多價(jià)血清做玻片凝集試驗(yàn)，凝集良好++++，再用單價(jià)血清做玻片凝集，宋內(nèi)氏血清凝集良好。3討論由于本起食物中毒患者年齡小，易感性強(qiáng)，發(fā)病急聚，許多

8、患兒采樣前已用藥，6例陽(yáng)性病例均為用藥前標(biāo)本，用藥前標(biāo)本檢出率高，宋內(nèi)氏志賀氏菌直接劃皿檢出率高于增菌檢出率。這可能在患者急性期的腸道內(nèi)病原菌大量繁殖而正常菌群受到影響，直接劃皿病原菌呈優(yōu)勢(shì)生長(zhǎng)，挑選病原菌菌落并不難。試驗(yàn)證明GN增菌液對(duì)腸道內(nèi)多數(shù)桿菌無(wú)明顯抑制作用，通過(guò)GN增菌腸道內(nèi)的非致病菌大量繁殖，這些非病原菌運(yùn)動(dòng)活潑，爭(zhēng)氧性強(qiáng)，而宋內(nèi)氏菌無(wú)動(dòng)力，所以在增菌液的表面