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《奧曲肽對人卵巢癌細胞增殖影響的實驗研究》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫。
1、奧曲肽對人卵巢癌細胞增殖影響的實驗研究【摘要】目的探討生長抑素類似物奧曲肽（OCT）在體內(nèi)對人卵巢癌細胞株SKOV3生長的影響。方法建立人卵巢癌細胞株SKOV3裸鼠移植瘤模型，隨機分成4組：對照組、奧曲肽組、順鉑組及奧曲肽順鉑聯(lián)用組，分別予生理鹽水、奧曲肽、順鉑及兩藥聯(lián)用處理，處死裸鼠后腫瘤標(biāo)本采用流式細胞儀檢測細胞周期，免疫組織化學(xué)法檢測血管內(nèi)皮生長因子（VEGF）的表達。結(jié)果各用藥組瘤重、瘤體積、VEGF的表達均低于生理鹽水組（P<0.05）,但用藥組兩兩間比較差異無顯著性。結(jié)論奧曲肽能抑制體內(nèi)人卵
2、巢癌細胞株SKOV3生長，對腫瘤VEGF表達的抑制可能為其抑瘤機制之一?！娟P(guān)鍵詞】奧曲肽；卵巢癌；細胞周期；血管內(nèi)皮生長因子Effectofoctreotideonthegroanovariancancercelllineinexperimentalstudy【Abstract】ObjectiveToapproachtheeffectofoctreotideonthegroanovariancancercelllineSKOV3invivo.MethodsMetastaticmodelsimulatinghu
3、manovariancancerplantationoftheovariancancercelllineSKOV3intonudemice.Animalslydividedandsubmittedtodifferenttreatmentgroups:controlgrouptreatedalsaline，octreotidegroupiceorsamplesinedbyfloetry，VEGFexpressioninedbyimmunohistochemistryoreandtheexpressionofVE
4、GFicethaninthecontrolmice(P<0.05)，butthereanovariancancercelllineSKOV3invivo，themechanismmaybedoatostatin,SST)是一種環(huán)狀多肽類激素,由Brazeau等［1］于1973年從羊下丘腦中分離提取。現(xiàn)在認為SST對許多疾病如腫瘤、炎癥、糖尿病、癲癇、早老性癡呆、帕金森病、亨廷頓舞蹈病以及艾滋病的發(fā)生、發(fā)展以及防治具有重要的意義［2］。奧曲肽(SMS-201995,OCT)為生長抑素8肽類似物,是第一個用
5、于臨床的生長抑素類似物，目前其主要用于肝癌、胃癌、胰腺癌的輔助治療。目前國內(nèi)外關(guān)于奧曲肽對卵巢癌作用的研究報道較少。本實驗通過裸鼠移植瘤模型觀察奧曲肽對卵巢癌細胞株SKOV3增殖的影響,并初探其作用機制。1材料與方法1.1材料(1)基礎(chǔ)培養(yǎng)液：RPMI1640，加入10%小牛血清(杭州四季青生物公司)。(2)胰蛋白酶(上海華美公司)：溶于D-Hanks液中配制成0.25%濃度。(3)生長抑素類似物奧曲肽：由上海子能制藥有限公司合成。(4)順鉑(Cisplatin):山東齊魯制藥廠產(chǎn)品，4℃保存。(5)人卵巢癌
6、細胞株SKOV3：購自第四軍醫(yī)大學(xué)西京醫(yī)院婦產(chǎn)科實驗室。細胞置于37℃,5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，0.25%胰蛋白酶消化細胞成單細胞懸液。(6)雌性BALB/c-nu/nu裸小鼠：購自中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院實驗動物研究所，體重18～22g，SPF環(huán)境下飼養(yǎng)。(7)兔抗人血管內(nèi)皮生長因子（VEGF）單克隆抗體：購自北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司。1.2方法1.2.1卵巢癌裸鼠移植瘤模型的建立將SKOV3細胞制成單細胞懸液,以5×106個細胞/只，接種于裸鼠右側(cè)腋窩靠近背部皮下，共接種20只。1.2.2藥物干預(yù)移植瘤建模2周
7、后將20只裸鼠隨機分成4組,每組5只，4組分別為空白對照組、奧曲肽組、順鉑組、奧曲肽與順鉑聯(lián)用組?？瞻讓φ战M皮下注射生理鹽水100μg/（kg·d），1次/d；奧曲肽組皮下注射奧曲肽100μg/（kg·d）,1次/d；順鉑組分別于成瘤后第1、8、15、22日腹腔注射順鉑4mg/kg；奧曲肽與順鉑聯(lián)用組皮下注射奧曲肽100μg/（kg·d）,1次/d,并于成瘤后第1、8、15、22日腹腔注射順鉑4mg/kg。用藥4周后頸椎脫位法處死裸鼠，皮下剝離瘤體，稱取腫瘤重量，游標(biāo)卡尺測量腫瘤長徑（a）和短徑（b），按公式
8、V=ab2/2計算腫瘤體積。抑瘤率=(對照組瘤體積-實驗組瘤體積)/對照組瘤體積×100%。腫瘤標(biāo)本分為兩份，一份置于10％中性緩沖福爾馬林液中固定，常規(guī)脫水，透明，浸蠟，包埋，5μm連續(xù)切片。另一份立即制成單細胞懸液行流式細胞分析。1.2.3流式細胞儀分析細胞周期腫瘤組織采用機械法分離，制備成濃度為1×106/ml的單細胞懸液，70％乙醇固定，4℃保存，染色前用PBS洗去固定液，加200μlRNa
