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1、促紅細(xì)胞生成素對(duì)缺氧缺血新生大鼠腦論文.freelin分別腹腔內(nèi)注射生理鹽水、rhEPO及硫酸鎂。4組動(dòng)物48h后處死，隨即取鼠分別給予4種處理：（1）取腦組織常規(guī)固定、切片、行H-E染色，觀察腦組織的病理改變；（2）一組取腦組織精確稱重后，置于恒溫烤箱內(nèi)48h后稱干重求出腦的含水量；（3）取腦制成組織勻漿，測(cè)NO含量；（4）取腦制成組織勻漿，測(cè)MDA含量。結(jié)果假手術(shù)組腦的含水量及NO和MDA含量均明顯低于HIBD組.freelanerythropoietin(rhEPO)onthecerebraledemaandtheconte
2、ntsofNO，MDAofthehypoxic-ischemicratbrain.Methods80infantgSO4treatedgroup.Eachratinthelast3grouplytakenoutfromeachgrouptoobservethepathologicsection，andtomeasurethecontentsof-operatedcontrolgroupa，andinhibittheproductionfreeradical.【Keyicbraindamage；erythropoietin；cere
3、braledema；NO；MDA圍生期窒息所致的缺氧缺血性腦損傷(HIBD)是引起新生兒死亡或其神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育障礙的主要原因。因此，積極探索安全、合理、有效的治療方案是當(dāng)今研究的熱點(diǎn)。筆者應(yīng)用促紅細(xì)胞生成素治療HIBD動(dòng)物模型，觀察大鼠腦組織中一氧化氮（NO）和丙二醛(MDA)水平及其對(duì)腦水腫的影響，旨在對(duì)促紅細(xì)胞生成素的作用機(jī)制作進(jìn)一步探討，并為臨床治療HIBD提供理論依據(jù)。1材料與方法1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及分組選用健康7日齡DA檢測(cè)試劑盒均由南京建成生物工程研究所提供。1.3方法1.3.1模型制備乙醚麻醉后取頸正中切口，分離并用絲線結(jié)
4、扎右側(cè)頸總動(dòng)脈后縫合皮膚，術(shù)后恢復(fù)2h，然后置于37℃水浴且通入8％氧氣和92％氮?dú)獾幕旌蠚怏w的密閉缺氧箱中缺氧2h，即制成缺氧缺血性腦病模型［1］。其模型檢驗(yàn)依據(jù)腦組織的病理改變。1.3.2各組處理方法假手術(shù)組只分離右側(cè)頸總動(dòng)脈，不結(jié)扎、不缺氧，亦不給予藥物干預(yù)；生理鹽水對(duì)照組制成模型前30min腹腔注射生理鹽水0.5ml/10g；rhEPO治療組在制成模型前30min腹腔注射rhEPO3000u/kg；硫酸鎂治療組則給予硫酸鎂100mg/kg腹腔注射。上述動(dòng)物均回籠飼養(yǎng)，48h后斷頭處死，取右側(cè)大腦半球。1.3.3標(biāo)本的獲取和
5、結(jié)果的檢測(cè)（1）電子天平精確稱量右側(cè)大腦半球重量（濕重），將腦置于180℃恒溫烤箱中烘干48h至恒重稱重（干重），計(jì)算腦的含水量％＝（濕重－干重）／濕重×100％；（2）取右側(cè)大腦半球皮質(zhì)100mg，按1g∶10ml加入冰鹽水作為勻漿介質(zhì)，用研缽在冰水浴中研磨10min，以3000r/min的速度離心15min，取上清液，即制成10％腦組織勻漿。NO含量用硝酸還原酶法測(cè)定，MDA含量用改良的硫代巴比妥酸法測(cè)定。勻漿蛋白含量用雙縮脲法測(cè)定。嚴(yán)格按照使用說(shuō)明操作；（3）取右側(cè)大腦半球，10％多聚甲醛固定，常規(guī)石蠟包埋，切取中級(jí)至視交叉
6、處組織腦組織切片(6μm)，H-E染色，觀察病理學(xué)改變。1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)分析采用方差分析，所得數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，以P＜0.05為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。2結(jié)果2.1病理改變(1)假手術(shù)組：外觀顯示大鼠腦膜血管無(wú)擴(kuò)張，腦組織無(wú)水腫。光鏡下顯示腦各部位結(jié)構(gòu)及層次清楚，細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)清晰完整。(2)生理鹽水對(duì)照組：肉眼見(jiàn)大鼠腦膜血管中度擴(kuò)張，組織極度水腫。鏡下顯示腦各部位結(jié)構(gòu)及層次紊亂，細(xì)胞水腫明顯，毛細(xì)血管周圍間隙增寬，神經(jīng)纖維疏松。部分神經(jīng)細(xì)胞固縮、細(xì)胞質(zhì)深染，提示神經(jīng)元變性；部分細(xì)胞嗜酸變性提示細(xì)胞壞死。（3）兩干預(yù)組：外觀顯示大
7、鼠腦膜血管輕度擴(kuò)張，腦組織輕度水腫。光鏡下顯示腦各部位結(jié)構(gòu)及層次較生理鹽水對(duì)照組清楚，細(xì)胞輕度水腫。神經(jīng)元變性及脫失較生理鹽水對(duì)照組減輕。2.2各組腦組織含水量與假手術(shù)組比較，生理鹽水對(duì)照組腦含水量明顯增加（P0.05），EPO治療組與生理鹽水對(duì)照組比較，腦含水量明顯減少（P0.05），EPO治療組和硫酸鎂治療組二者差異無(wú)顯著性（P＞0.05）。表1各組腦組織的含水量（x±s）2.3各組腦組織的MDA和NO含量與假手術(shù)組比較，生理鹽水對(duì)照組腦皮質(zhì)MDA、NO含量明顯增加（P0.05），EPO治療組與生理鹽水對(duì)照組比較，前者含量則明
8、顯減少（P0.05），EPO治療組和硫酸鎂治療組二者差異無(wú)顯著性（P＞0.05）。表2各組腦組織的MDA和NO含量（x±s）3討論促紅細(xì)胞生成素（EPO）一直被認(rèn)為是由腎臟分泌的用于調(diào)節(jié)紅細(xì)胞生成的蛋白質(zhì)，是治療腎性貧血的常規(guī)藥物。近年的研究發(fā)現(xiàn)促
