頂空氣相色譜法測定血液中乙醇含量的探索論文

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1、頂空氣相色譜法測定血液中乙醇含量的探索論文李周儒于常州蔡紅星【摘要】目的建立檢測血液中乙醇含量簡便、準(zhǔn)確的方法。方法以叔丁醇作為內(nèi)標(biāo)，用頂空氣相色譜火焰離子化檢測器對樣品進行檢測，與平行操作的乙醇標(biāo)準(zhǔn)品比較，用內(nèi)標(biāo)法以乙醇對內(nèi)標(biāo)物的峰面積比進行定量。結(jié)果色譜圖上目標(biāo)峰與內(nèi)標(biāo)峰分離完全，在0.01～10.0g/L范圍內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)工作曲線線性關(guān)系良好。結(jié)論頂空氣相色譜法測定血液中乙醇含量快速靈敏，能準(zhǔn)確定量。該方法可用于實際檢測分析?！娟P(guān)鍵詞】氣相色譜頂空法血液乙醇含量測定血液中乙醇濃度的高低,是判定一個人清醒程度的重要指標(biāo)。目前國內(nèi)大多采用國標(biāo)法測定,即重鉻酸鉀氧化硫酸亞鐵銨滴定法。

2、該法花費時間長,條件不易控制。由于血液中含有各種蛋白質(zhì)和膠狀物質(zhì)，比較黏稠,因此不能采用直接氣相色譜法測定。本實驗采用頂空氣相色譜法，通過對待檢血樣進行適當(dāng)處理和色譜條件的摸索.freell（相對密度0.7893）、叔丁醇1.24ml（相對密度0.8037）于100ml容量瓶中,用重蒸水稀釋至刻度,混勻，分別得濃度為10g/L的乙醇標(biāo)準(zhǔn)儲備液、叔丁醇標(biāo)準(zhǔn)儲備液。置4℃冰箱保存（可保存1年）。1.3.2乙醇標(biāo)準(zhǔn)工作液、叔丁醇標(biāo)準(zhǔn)工作液分別吸取一定量的乙醇標(biāo)準(zhǔn)儲備液和叔丁醇標(biāo)準(zhǔn)儲備液，用重蒸水稀釋10倍，分別得濃度為1g/L的乙醇標(biāo)準(zhǔn)工作液和叔丁醇標(biāo)準(zhǔn)工作液。1.4色譜條件色譜柱

3、HayesEPQ2M×2mm，柱溫120℃，檢測室溫度250℃，氣化室溫度250℃，載氣（N2）流速0.020～0.035L/min，燃?xì)夂涂諝饬魉俑鶕?jù)儀器條件選定。1.5樣品制備精確吸取2份待測全血0.5ml，分別加入樣品瓶中,加100μl(1g/L)叔丁醇標(biāo)準(zhǔn)工作液作為內(nèi)標(biāo)，用密封鉗加封鋁帽，密封好瓶塞,混勻，置60℃恒溫水浴箱內(nèi)，水浴15min。另取空白全血2份，根據(jù)待測血液中乙醇含量的多少（目測乙醇峰面積的大?。?，添加相應(yīng)的乙醇標(biāo)準(zhǔn)工作液（20μg～2mg），內(nèi)標(biāo)液按上述方法平行操作，作為已知對照。1.6樣品檢測用2ml注射器分別吸取檢材、已知對照瓶內(nèi)液面上的氣體約1

4、.5ml，注入氣相色譜儀中，每個試樣進樣2次；并注入乙醇標(biāo)準(zhǔn)工作液。1.7標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作將10g/L的乙醇標(biāo)準(zhǔn)儲備液用重蒸水分別稀釋10、100、1000倍，得濃度分別為1、0.1、0.01g/L的乙醇標(biāo)準(zhǔn)液，然后分別取0.05、0.1、0.2、0.4ml的1g/L乙醇標(biāo)準(zhǔn)液，0.1、0.2ml的0.1g/L乙醇標(biāo)準(zhǔn)液，0.1、0.2ml的0.01g/L乙醇標(biāo)準(zhǔn)液，同時加入0.2ml的1g/L叔丁醇標(biāo)準(zhǔn)工作液做內(nèi)標(biāo)，檢測后制作標(biāo)準(zhǔn)工作曲線。見表1。1.8記錄與計算記錄檢材及已知對照中乙醇及內(nèi)標(biāo)峰面積值，填入GC定量分析記錄表中，并計算出各檢材中乙醇及內(nèi)標(biāo)的平均峰面積。表1標(biāo)準(zhǔn)

5、工作曲線相關(guān)數(shù)據(jù)乙醇添加量理論計算的乙醇濃度根據(jù)表1的數(shù)據(jù)，計算標(biāo)準(zhǔn)曲線的回歸方程及相關(guān)系數(shù)：y=1.4062x+0.0268，r＝0.993計算檢材中醇含量l)in處為乙醇目標(biāo)峰，（10.0±0.5）min處為內(nèi)標(biāo)峰。2.2線性關(guān)系在確定的最佳試驗條件下,對不同濃度的乙醇標(biāo)準(zhǔn)工作液進行測定,其回歸方程為y=1.4062x＋0.0268,r=0.993。在乙醇濃度為0.01～10.0g/L范圍內(nèi)，血液中乙醇含量與相應(yīng)的峰面積值呈良好的線性關(guān)系，測定限為0.01g/L。圖1已知對照色譜圖圖2待測樣品色譜圖3討論應(yīng)用頂空氣相色譜法測定血液中乙醇濃度不失為一種快速有效的方法，但也受

6、到一些條件限制。①恒溫水浴箱的溫度對檢測結(jié)果的影響：在不同的溫度下測定樣品的峰面積,其峰面積隨著溫度的升高而增高,.freelin。通過對溫度、時間等條件進行控制，在限定溫度條件下,高沸點的組分不進柱,對色譜柱的污染少,從而延長色譜柱的使用壽命［2］。利用本法可以進行自動分析,從而節(jié)省分析時間,故適用于成批量樣品的測定。本法操作簡單,條件易于掌握,線性范圍寬,準(zhǔn)確度和精密度高?！?/p>