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《不同溶劑對(duì)蜂膠黃酮提取率影響的研究論文》由會(huì)員上傳分享,免費(fèi)在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫(kù)。
1、不同溶劑對(duì)蜂膠黃酮提取率影響的研究論文張?jiān)葡?,楊志孝,安蔚,王家富【關(guān)鍵詞】溶劑摘要:目的檢測(cè)泰山蜂膠提取液中總黃酮含量。方法用不同濃度乙醇做溶劑,采用超聲波法提取泰山蜂膠,利用紫外分光光度法對(duì)泰山蜂膠提取液中總黃酮含量進(jìn)行定量分析同時(shí)用原子吸收-分光光度法檢測(cè)了提取液中鉛含量。結(jié)果不同濃度乙醇的蜂膠提取率和黃酮含量不同,且鉛含量均小于1μgg-1。結(jié)論泰山蜂膠的黃酮含量較高,具有較高的藥用價(jià)值。關(guān)鍵詞:泰山蜂膠;提取液;總黃酮;定量分析蜂膠是蜜蜂采集松樹(shù)、楊樹(shù)等植物的芽苞分泌物、樹(shù)脂等.freelethanol)為分析純;高氯酸
2、(HCLO4)為優(yōu)級(jí)純;乙醇(alcohol)濃度95%;水為三蒸水。1.2方法1.2.1蜂膠提取方法采集的新鮮粗蜂膠置-20℃過(guò)夜后粉碎,分別用三蒸水、濃度為24%,30%,70%的乙醇與蜂膠按固液比1∶4的比例浸泡1h,于超聲波清洗器中超聲20min,靜置2h,再超聲20min,靜置2h后,過(guò)濾至上清液澄清,倒入棕色瓶中低溫保存?zhèn)溆谩K姆N濃度乙醇提取液以下依次簡(jiǎn)稱為l,分別加入四個(gè)已經(jīng)準(zhǔn)確稱重的干燥空燒杯中,在恒溫電熱套中加熱,待干燥后稱重,減去空燒杯的重量,即為提取液中蜂膠得率。見(jiàn)表1。表1四種不同濃度乙醇蜂膠提取率(略)1
3、.2.3四種蜂膠提取液中總黃酮含量測(cè)定按蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品法[3]。儀器使用S-54紫外分光光度計(jì)。測(cè)定波長(zhǎng)420nm。標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制:精確稱取蘆丁50mg加15ml甲醇溶解,轉(zhuǎn)移至50ml的容量瓶中定容,該標(biāo)準(zhǔn)貯備液濃度為1mg/m1AlCl3顯色分別配制濃度為0.0,10.0,20.0,30.0,40.0,50.0μg/ml系列溶液,從圖1可看出在蘆丁的最大吸收波長(zhǎng)420nm處測(cè)定吸光度最穩(wěn)定。以濃度為橫坐標(biāo),吸光度為縱坐標(biāo),計(jì)算機(jī)自動(dòng)繪制工作曲線見(jiàn)圖2,并確定濃度方程為:C=38.739A+0.329,相關(guān)系數(shù)r=0.9967。樣品
4、測(cè)定:分別移取蜂膠提取液各200μl,70%乙醇提取液取10μl,各加0.5ml2.5%的AlCl3和0.8ml1%KCl,用乙醇定容至5.00ml,搖勻后靜止30min后進(jìn)行測(cè)定,直接讀取濃度并根據(jù)下列公式求算出原液的含量。見(jiàn)表2。表2四種不同濃度乙醇蜂膠提取液中總黃酮含量(略)1.2.4蜂膠提取液中重金屬鉛含量測(cè)定將四種提取液分別在恒溫電熱套中加熱,待干燥后稱取200mg加入混合酸10ml(HNO3與HClO43∶1混和),低溫消化至澄清無(wú)色液體,水浴加熱驅(qū)酸,近干,加少量亞沸純蒸水定容上機(jī)檢測(cè)。結(jié)果見(jiàn)表3。表3四種不同濃度乙
5、醇蜂膠提取液中鉛含量(略)2結(jié)果表1結(jié)果顯示,70%乙醇提取蜂膠得率最高,且有隨乙醇濃度降低提取率減少的趨勢(shì)。從表2可見(jiàn),70%乙醇蜂膠提取液中黃酮含量明顯高于其他組,且四組提取液中黃酮含量與蜂膠得率成正比。從表3可看出,四組提取液中鉛含量均小于1μgg-1。3討論蜂膠具有多種生物學(xué)效應(yīng)和藥理作用,是一種具有廣泛開(kāi)發(fā)前景的藥物。對(duì)腫瘤的預(yù)防和治療作用已得到肯定[4]。對(duì)支氣管哮喘、咽喉炎有預(yù)防治療作用對(duì)幽門(mén)螺旋桿菌的抑制作用也得到證實(shí)[5,6]。蜂膠的化學(xué)成分非常復(fù)雜,由于受生態(tài)環(huán)境和氣候條件的影響,植物滲出物和分泌物的不同造成不
6、同地區(qū)采集的蜂膠化學(xué)成分又相差很大,生物學(xué)活性也因此有所變化,因此應(yīng)盡可能多的提取出有效成分,而剔除其雜質(zhì),方便更好地利用。蜂膠可以有效地溶于有機(jī)溶劑,如:甲醇、乙醚、乙醇、丙酮、醋酸乙酯等。但乙醚毒性大易揮發(fā),丙酮易揮發(fā)刺激性大價(jià)格較貴,而正丁醇則價(jià)格較貴且難以從提取物中去除,醋酸乙酯具有刺激性氣味,這些都使得它們不適宜用作提取蜂膠的提取溶劑,而乙醇作為一種溶劑具有無(wú)毒性、無(wú)不良?xì)馕?、價(jià)格便宜、來(lái)源廣和提取完成后可以從提取物中除凈及乙醇回收率高等優(yōu)點(diǎn),因而本實(shí)驗(yàn)選取乙醇作為提取溶劑。其它如國(guó)內(nèi)外用于藥品和食品的蜂膠,大部分采用乙
7、醇作提取溶劑。當(dāng)然在最近研究出的用超臨界CO2流體萃取蜂膠的方法有許多優(yōu)越性,但在實(shí)際工作中由于它的工藝較復(fù)雜,成本太高,還不適于生產(chǎn)應(yīng)用。因此,用乙醇提取在目前仍是一種方便安全且經(jīng)濟(jì)有效的方法。本實(shí)驗(yàn)室采用超聲波法配合提取蜂膠,兩次超聲20min后70%的乙醇對(duì)泰山蜂膠提取率和提取液中黃酮含量(分別為40.73%和28.62%),優(yōu)于一次超聲20min所得貴州蜂膠與黃酮含量(分別為20.69%和16.54%)[7]。曾有報(bào)道[8],水在4℃浸泡北京產(chǎn)蜂膠5d所得黃酮量為0.41%;用蒸餾水浸提杭州產(chǎn)蜂膠9d所得黃酮含量為0.80
8、%[9]。而本實(shí)驗(yàn)室利用超聲波提取泰山蜂膠,水提取液中黃酮含量為3.35%,明顯高于浸泡法。杭州蜂膠25%的乙醇浸泡5d黃酮提取率為1.11%,泰山蜂膠24%的乙醇超聲波提取黃酮得率為7.28%。不同產(chǎn)地的蜂膠由于地理環(huán)境和氣候及采集的季節(jié)不同,其