不同提取方法對(duì)測(cè)定蜂膠產(chǎn)品總黃酮含量的影響論文

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1、不同提取方法對(duì)測(cè)定蜂膠產(chǎn)品總黃酮含量的影響論文.freelg／g，兩者無(wú)顯著性差異?！窘Y(jié)論】與藥典法比較，甲醇索氏提取法簡(jiǎn)便、省時(shí)、經(jīng)濟(jì)，在測(cè)定總黃酮的含量時(shí)可以考慮用甲醇索氏提取法來(lái)代替藥典法?！娟P(guān)鍵詞】蜂膠/化學(xué)；總黃酮/分析；分光光度法，紫外線【Objective】Toexploretheeffectofdifferentextractionmethodsonthecontentoftotalflavonesfrompropolis.【Methods】ETRY，ULTRAVIOLET蜂膠（propolis）是蜜蜂從植物芽苞和

2、樹(shù)干處采集樹(shù)膠，混入蜜蜂上顎腺分泌物和蜂蠟等而形成的一種具有芳香味的膠狀固形物，其主要化學(xué)成分為黃酮類(lèi)、萜烯類(lèi)、酚酸類(lèi)化合物等多種生物活性物質(zhì)［1］?！吨腥A人民共和國(guó)藥典》2005版一部收載了該藥材，作為抗菌消炎、調(diào)節(jié)免疫中藥應(yīng)用［2］?，F(xiàn)代藥理研究表明，蜂膠總黃酮具有抗病毒、抗菌消炎、抗腫瘤、抗氧化、降血脂、調(diào)節(jié)機(jī)體免疫功能等多種生物活性作用［3］。蜂膠總黃酮的含量已成為判定蜂膠產(chǎn)品質(zhì)量的標(biāo)志性物質(zhì)之一，而提取方法是影響蜂膠總黃酮含量測(cè)定準(zhǔn)確性的重要因素之一，為此，筆者進(jìn)行了本項(xiàng)研究。１儀器及試藥11儀器UV2100紫外—可

3、見(jiàn)分光光度計(jì)（成都科析電子商務(wù)有限公司）；8953Dietikon型電子分析天平（瑞士，精度01?mg）；AS2060B型超聲儀（天津奧特賽恩斯儀器有限公司）等。12試劑與藥品流動(dòng)相所用甲醇為色譜醇，其他試劑甲醇、磷酸等均為分析純；蜂膠（毛膠，由廣州市寶生園有限公司提供）；蘆丁對(duì)照品（批號(hào)為0809705）由中國(guó)藥品生物制品檢定所提供。2方法與結(jié)果21蘆丁對(duì)照品標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備［2］精密稱(chēng)取無(wú)水蘆丁對(duì)照品適量，加甲醇制成0268?mg／mL的溶液；吸取該溶液0、1、2、3、4、5?mL，分別置25?mL容量瓶中，加水至6?

4、mL，加50?g/L亞硝酸鈉溶液l?mL，搖勻，靜置6?min；加100?g/L硝酸鋁溶液l?mL，搖勻，放置6?min；加43?g/L氫氧化鈉溶液10?mL，加水稀釋至刻度，搖勻，放置15?min，以相應(yīng)試劑為空白，按紫外—可見(jiàn)分光光度法（2005版藥典附錄VA），在波長(zhǎng)500?nm處測(cè)定吸光度（Ｄ）。以濃度為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，結(jié)果見(jiàn)圖1。22供試品總黃酮含量測(cè)定精確移取各樣品溶液1?mL，置25?mL容量瓶中，加水至6?mL，加50?g/L?亞硝酸鈉溶液l?mL，搖勻，靜置6?min；加圖1蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線略

5、23提取方法的比較研究231藥典法將蜂膠在-10℃冷凍數(shù)天后用粉碎機(jī)粉碎，分別精密稱(chēng)取10066?g、10090?g、09990?g蜂膠，分別置于索氏提取器中，加100?mL丙酮，加熱回流至提取液無(wú)色，提取液回收溶劑至干，殘?jiān)眉状既芙獠⑥D(zhuǎn)移至100?mL量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，精密吸取4?mL置10?mL量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，即得。232乙醇回流法取同一批蜂膠，分別精密稱(chēng)取10028?g、10018?g、10074?g，以體積分?jǐn)?shù)95%的乙醇回流2次，每次加乙醇50?mL，第1次回流15?ｈ，第

6、2次回流1?ｈ，回收溶劑至干，殘?jiān)眉状既芙獠⑥D(zhuǎn)移至100?mL量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，精密吸取4?mL置10?mL量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，即得。233甲醇索氏提取法取同一批蜂膠，分別精密稱(chēng)取10008?g、10016?g、10024?g，分別置于索氏提取器中，加100?mL甲醇，加熱回流至提取液無(wú)色，提取液轉(zhuǎn)移至100?mL量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，精密吸取4?mL置10?mL量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，即得。24方法學(xué)考察241穩(wěn)定性試驗(yàn)取甲醇索氏提取法所得的供試品溶液，按22項(xiàng)下所述方法，分別在0

7、、1、2、3、5?h不同時(shí)間點(diǎn)進(jìn)行檢測(cè)，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)差(sＲ)為08%，表明供試品溶液在5?h內(nèi)是穩(wěn)定的。242重復(fù)性試驗(yàn)用甲醇索氏提取法平行制備6份供試品溶液，按22項(xiàng)下所述方法，分別測(cè)定其吸光度，sＲ為05%，結(jié)果表明重復(fù)性好。243精密度試驗(yàn)取甲醇索氏提取法所得的供試品溶液，按22項(xiàng)下所述方法，測(cè)定其吸光度，連續(xù)測(cè)定5次，其sＲ為03%。244回收率試驗(yàn)精確移取05?mL樣品溶液5份，置25?mL容量瓶中，分別準(zhǔn)確加入蘆丁對(duì)照品甲醇液05?mL（0268?mg/mL），按22項(xiàng)下所述方法，分別測(cè)定其

8、吸光度，并計(jì)算回收率，其回收率為10008%（Ｎ=5），sＲ為095%。25不同提取方法所得樣品總黃酮含量測(cè)定結(jié)果表1結(jié)果說(shuō)明藥典法和甲醇索氏提取法所得的總黃酮的含量較高，但兩者無(wú)顯著性差異。表1不同提取方法所得樣品測(cè)定結(jié)果比較（略）3討論本