亞低溫對大鼠急性缺血腦保護(hù)作用的研究論文

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1、亞低溫對大鼠急性缺血腦保護(hù)作用的研究論文.freeli方法制備栓線路，市售單股尼龍線（直徑0.16mm）準(zhǔn)確選取2.5cm頭端涂硅膠，涂膠標(biāo)準(zhǔn):長5mm，直徑0.25～0.30mm。將大鼠以10%水合氯醛3ml（3.6mg/kg體重）腹腔注射麻醉，頸部正中切口，分離頸內(nèi)動脈顱外的唯一分支翼腭動脈，在分叉處結(jié)扎翼腭動脈。電凝頸總動脈及頸外動脈，在頸外動脈殘端插入尼龍絲，直到尼龍絲在動脈內(nèi)頭端距離頸總動脈分叉處長度為17～19mm，將頸外動脈結(jié)扎以固定尼龍絲。阻斷大腦中動脈的血流。假手術(shù)組除不插入尼龍絲外，其他操作與手術(shù)組相同。評分標(biāo)準(zhǔn)參照Lo

2、nga［5］的5分評分法。1.2氨基酸濃度測定各實(shí)驗(yàn)組大鼠到預(yù)定時(shí)間斷頭處死，迅速取缺血側(cè)腦組織100mg，在121MB型氨基酸分析儀上進(jìn)行氨基酸定量分析，分別測量谷氨酸、甘氨酸和GABA濃度。按Globus等提出的方法計(jì)算“興奮性毒性指數(shù)”:（谷氨酸濃度）×（甘氨酸濃度）/（GA-BA濃度）。1.3大鼠腦組織含水量測定各實(shí)驗(yàn)組大鼠到預(yù)定時(shí)間隨機(jī)選取2只大鼠，取右腦，將腦組織在電烤箱（100℃）內(nèi)放置1d，稱其干重，并按公式計(jì)算腦組織含水量:腦組織含水量=｛（濕重-干重）/濕重｝×100%。1.4光鏡組織學(xué)檢查各實(shí)驗(yàn)組大鼠到預(yù)定時(shí)間動物處死

3、，取腦，石蠟切片，HE染色，光鏡觀察組織細(xì)胞學(xué)變化，組織損傷程度的定量。1.5梗死面積測定于各時(shí)相點(diǎn)在清醒狀態(tài)下將大鼠斷頭處死，將大腦標(biāo)本移置于4%多聚甲醛液中固定。經(jīng)圖像分析系統(tǒng)處理后計(jì)算梗死面積。1.6統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用SPSS統(tǒng)計(jì)軟件，全部數(shù)據(jù)以均數(shù)ˉx±s標(biāo)準(zhǔn)差表示，采用單因數(shù)方差分析。2結(jié)果與討論本實(shí)驗(yàn)采用改良Koizumi方法，手術(shù)后大鼠清醒，全部出現(xiàn)不同程度的神經(jīng)功能缺失癥狀且TTC染色可見梗塞灶，表明其成功率達(dá)98%。氨基酸測定:亞低溫減少興奮性氨基酸釋放在低溫腦保護(hù)作用中起重要作用。本實(shí)驗(yàn)也證明了亞低溫對腦缺血后興奮氨基酸谷氨

4、酸、甘氨酸的釋放有明顯的抑制作用，對抑制性氨基酸γ-氨基丁酸（GABA）的釋放有促進(jìn)作用，降低了興奮性氨基酸毒性指數(shù)（EPl），對腦缺血有抑制性保護(hù)作用。梗塞面積測定:MCAO成功后TTC染色肉眼可見缺血區(qū)呈白色，腦血流正常處被染成紅色。假手術(shù)組切片呈均一對稱紅色，常溫缺血組:3h組TTC染色呈白色區(qū)域主要位于右側(cè)基底節(jié)區(qū)，6h組TTC染色呈白色區(qū)域主要位于右側(cè)基底節(jié)區(qū)及大腦背外側(cè)面額頂部的皮層區(qū)，24h組TTC染色缺血區(qū)除了上述區(qū)域外還累及了右側(cè)海馬。亞低溫缺血組:3h組肉眼看不見白色缺血區(qū)，6h組可見右側(cè)基底節(jié)區(qū)有小部分白色缺血區(qū)。24

5、h組白色缺血區(qū)主要集中在右側(cè)基底節(jié)區(qū)及小部分大腦背外側(cè)面額頂部的皮層區(qū)。以上結(jié)果說明了亞低溫能抑制缺血區(qū)炎癥級聯(lián)反應(yīng)，促進(jìn)閉塞血管再通，促進(jìn)半暗帶向正常的神經(jīng)組織轉(zhuǎn)化，從而縮小梗塞面積，起到了缺血腦保護(hù)作用。光鏡:本實(shí)驗(yàn)通過亞低溫同常溫缺血組腦水腫程度、缺血區(qū)壞死神經(jīng)元及光鏡下對缺血區(qū)神經(jīng)元形態(tài)的對比也證明亞低溫能保護(hù)血腦屏障和穩(wěn)定血管通透性，降低腦缺血引起的顱內(nèi)壓增高。［