亞低溫聯(lián)合epo對(duì)tbi大鼠腦保護(hù)作用的研究

亞低溫聯(lián)合epo對(duì)tbi大鼠腦保護(hù)作用的研究

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1、學(xué)位論文原創(chuàng)性聲明I㈣哪m吣舢m咖眥帥Y2397101本人鄭重聲明:所呈交的論文是我個(gè)人在導(dǎo)師指導(dǎo)下獨(dú)立進(jìn)行研究工作取得的研究成果。除了文中特別加以標(biāo)注引用的內(nèi)容和致謝的地方外,論文中不包含任何其他個(gè)人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果,與我一同工作的同志對(duì)本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說明并表示了謝意。學(xué)位論文作者簽名:日期:2013年5月1日學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本學(xué)位論文作者完全了解天津醫(yī)科大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定,即:學(xué)校有權(quán)將學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進(jìn)行檢索,并采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編以供查閱和借閱。同意學(xué)校向國家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送

2、交論文,并編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫。本論文屬于保密廠],在年解密后適用本授權(quán)書。II...........................——/不保密囪。(請(qǐng)?jiān)谙鄬?duì)應(yīng)的方框內(nèi)打“√"學(xué)位論文作者簽名:日期:2013年05月01日導(dǎo)師簽名:終日期:2。13年。5月。1日天津醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文中文摘要研究目的:本實(shí)驗(yàn)利用液壓打擊裝置成功建立大鼠顱腦創(chuàng)傷模型,并運(yùn)用此模型進(jìn)行:(1)、給與亞低溫(mildhypothermia,MHT)、促紅細(xì)胞生成素(erythropoietin,EPO)治療后,觀察亞低溫(MHT)、促紅細(xì)胞生成素(EP0)單獨(dú)及兩者聯(lián)合治療對(duì)顱腦創(chuàng)傷大鼠神經(jīng)功能缺陷評(píng)分、腦組織含

3、水量、血腦屏障通透性的影響,探索亞低溫(MHT)聯(lián)合促紅細(xì)胞生成素(EP0)應(yīng)用的腦保護(hù)作用;(2)、給與亞低溫(MHT)、促紅細(xì)胞生成素(EP0)單獨(dú)及兩者聯(lián)合治療后,測(cè)定損傷灶周圍腦組織AKT、pAKT、GSK313、pGSK3f)、Claudin一5及Caspase-3的含量變化,從而探索其與腦保護(hù)作用之間的關(guān)系及聯(lián)合應(yīng)用亞低溫(MHT)、促紅細(xì)胞生成素(EPO)腦保護(hù)作用的可能機(jī)制,為臨床應(yīng)用提供可靠的理論依據(jù)。研究內(nèi)容與方法:本實(shí)驗(yàn)分為兩個(gè)部分:試驗(yàn)一,MHT聯(lián)合EPO治療的腦保護(hù)作用的研究。實(shí)驗(yàn)二,MHT聯(lián)合EPO治療對(duì)顱腦創(chuàng)傷大鼠腦組織中AKT、pAKT、GSK3f)、pG

4、SK3f)、Claudin.5及Caspase.3表達(dá)的影響。試驗(yàn)一:采用健康成年雄性Wistar大鼠40只,隨機(jī)分成5組:假手術(shù)組(Sham組)僅做傷前準(zhǔn)備而不予液壓打擊、常溫治療組(NT組)只致傷不降溫、亞低溫治療組(MHT組)給予亞低溫治療、促紅細(xì)胞生成素治療組(EPO組)與規(guī)定時(shí)間給與EPO腹腔注射治療、亞低溫聯(lián)合促紅細(xì)胞生成素治療組(MHT+EPO組)給與亞低溫治療,并在規(guī)定時(shí)間給與EPO腹腔注射治療。術(shù)后48h所有大鼠進(jìn)行神經(jīng)功能評(píng)分(n:8),完畢后所有大鼠斷頭處死,干/濕比重法測(cè)定腦組織含水量(n=4);EvanS藍(lán)測(cè)定法測(cè)定血腦屏障通透性改變(n=4)。實(shí)驗(yàn)二:采用健康

5、成年雄性Wistar大鼠50只,隨機(jī)分成5組:假手術(shù)組(Sham組)僅做傷前準(zhǔn)備而不予液壓打擊、常溫治療組(NT組)只致傷不降溫、亞低溫治療組(MHT組)給予亞低溫治療、促紅細(xì)胞生成素治療組(EPO組)與規(guī)定時(shí)間給與EPO腹腔注射治療、亞低溫聯(lián)合促紅細(xì)胞生成素治療組(MHT+EPO組)給與亞低溫治療,并在規(guī)定時(shí)間給與EPO腹腔注射治療。術(shù)后48h所有大鼠斷頭處死,采用HE染色法觀察損傷病灶大小(n-3),采用蛋白印跡法(WesternBlotting法)(n-3)和實(shí)時(shí)定量逆轉(zhuǎn)錄多聚酶鏈反應(yīng)法(Real.timeqPCR法)(n=4)分別測(cè)定腦組織AKT、pAKT、GSK3[}、pGSK

6、3IB、Claudin.5及Caspase一3的表天津醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文達(dá)情況,采用免疫組織化學(xué)方法測(cè)定腦組織中pAKT、pGSK31B表達(dá)情況。結(jié)果:1.神經(jīng)功能缺陷評(píng)分結(jié)果:依據(jù)改良神經(jīng)功能損傷程度評(píng)分(mNSS)測(cè)定各組大鼠神經(jīng)功能改變,與Sham組相比,其余四組神經(jīng)功能缺陷評(píng)分明顯增加,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P<0.05),與NT組相比MHT組、EPO組及MHT+EPO組神經(jīng)功能缺損評(píng)分均有明顯減低(+P<0.05,一P<0.01);與MHT組、EPO組相比MHT+EPO組神經(jīng)功能缺陷評(píng)分明顯降低,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(8P<0.05)。2.腦組織含水量測(cè)定結(jié)果:利用干/濕重法檢

7、測(cè)腦組織含水量,Sham組腦組織含水量為77.164-2.11%,NT組為83.234-1.99%;與NT組相比,MHT組、EPO組、MHT+EPO組腦組織含水量降低并具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(NTVS.EPO,83.23:k1.99%VS.80.434-2.38%;NTVS.MHT,83.23+1.99%VS.79.85+1.78%;NTVS.MHT+EPO.83.234-1.99%VS.78.124-1.34%)(‘P<0.05,一P<0

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