亞低溫對(duì)大鼠急性缺血腦保護(hù)作用的研究

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1、亞低溫對(duì)大鼠急性缺血腦保護(hù)作用的研究【關(guān)鍵詞】亞低溫　　〔關(guān)鍵詞〕亞低溫;缺血性腦血管病;腦保護(hù)　　腦缺血性疾病由于高致死率，高致殘率成為神經(jīng)科醫(yī)生研究的熱點(diǎn)，缺血性腦卒中治療的中心環(huán)節(jié)是如何在實(shí)現(xiàn)腦保護(hù)基礎(chǔ)上恢復(fù)血流，挽救半暗帶。而亞低溫對(duì)腦外傷的腦保護(hù)作用已為臨床所證實(shí)并廣泛應(yīng)用于臨床〔1-3〕，為此，我們采用亞低溫方法通過(guò)改良的不開(kāi)顱栓塞法來(lái)觀測(cè)腦缺血不同時(shí)間段缺血局部興奮氨基酸，腦水腫，梗死體積及其光鏡下形態(tài)的變化。結(jié)果表明亞低溫具有腦保護(hù)作用?，F(xiàn)將研究報(bào)告介紹如下?！　?材料與方法　　1.1動(dòng)物分組　

2、　90只雄性B型氨基酸分析儀上進(jìn)行氨基酸定量分析，分別測(cè)量谷氨酸、甘氨酸和GABA濃度。按Globus等提出的方法計(jì)算“興奮性毒性指數(shù)”:（谷氨酸濃度）×（甘氨酸濃度）/（GA-BA濃度）?！　?.3大鼠腦組織含水量測(cè)定　　各實(shí)驗(yàn)組大鼠到預(yù)定時(shí)間隨機(jī)選取2只大鼠，取右腦，將腦組織在電烤箱（100℃）內(nèi)放置1d，稱(chēng)其干重，并按公式計(jì)算腦組織含水量:腦組織含水量=｛（濕重-干重）/濕重｝×100%?！　?.4光鏡組織學(xué)檢查　　各實(shí)驗(yàn)組大鼠到預(yù)定時(shí)間動(dòng)物處死，取腦，石蠟切片，HE染色，光鏡觀察組織細(xì)胞學(xué)變化，組織損傷

3、程度的定量?！　?.5梗死面積測(cè)定　　于各時(shí)相點(diǎn)在清醒狀態(tài)下將大鼠斷頭處死，將大腦標(biāo)本移置于4%多聚甲醛液中固定。經(jīng)圖像分析系統(tǒng)處理后計(jì)算梗死面積。　　1.6統(tǒng)計(jì)學(xué)處理　　采用SPSS統(tǒng)計(jì)軟件，全部數(shù)據(jù)以均數(shù)ˉx±s標(biāo)準(zhǔn)差表示，采用單因數(shù)方差分析?！　?結(jié)果與討論　　本實(shí)驗(yàn)采用改良Koizumi方法，手術(shù)后大鼠清醒，全部出現(xiàn)不同程度的神經(jīng)功能缺失癥狀且TTC染色可見(jiàn)梗塞灶，表明其成功率達(dá)98%。氨基酸測(cè)定:亞低溫減少興奮性氨基酸釋放在低溫腦保護(hù)作用中起重要作用。本實(shí)驗(yàn)也證明了亞低溫對(duì)腦缺血后興奮氨基酸谷氨酸、甘

4、氨酸的釋放有明顯的抑制作用，對(duì)抑制性氨基酸γ-氨基丁酸（GABA）的釋放有促進(jìn)作用，降低了興奮性氨基酸毒性指數(shù)（EPl），對(duì)腦缺血有抑制性保護(hù)作用。梗塞面積測(cè)定:MCAO成功后TTC染色肉眼可見(jiàn)缺血區(qū)呈白色，腦血流正常處被染成紅色。假手術(shù)組切片呈均一對(duì)稱(chēng)紅色，常溫缺血組:3h組TTC染色呈白色區(qū)域主要位于右側(cè)基底節(jié)區(qū)，6h組TTC染色呈白色區(qū)域主要位于右側(cè)基底節(jié)區(qū)及大腦背外側(cè)面額頂部的皮層區(qū)，24h組TTC染色缺血區(qū)除了上述區(qū)域外還累及了右側(cè)海馬。亞低溫缺血組:3h組肉眼看不見(jiàn)白色缺血區(qū)，6h組可見(jiàn)右側(cè)基底節(jié)區(qū)

5、有小部分白色缺血區(qū)。24h組白色缺血區(qū)主要集中在右側(cè)基底節(jié)區(qū)及小部分大腦背外側(cè)面額頂部的皮層區(qū)。以上結(jié)果說(shuō)明了亞低溫能抑制缺血區(qū)炎癥級(jí)聯(lián)反應(yīng)，促進(jìn)閉塞血管再通，促進(jìn)半暗帶向正常的神經(jīng)組織轉(zhuǎn)化，從而縮小梗塞面積，起到了缺血腦保護(hù)作用。光鏡:本實(shí)驗(yàn)通過(guò)亞低溫同常溫缺血組腦水腫程度、缺血區(qū)壞死神經(jīng)元及光鏡下對(duì)缺血區(qū)神經(jīng)元形態(tài)的對(duì)比也證明亞低溫能保護(hù)血腦屏障和穩(wěn)定血管通透性，降低腦缺血引起的顱內(nèi)壓增高?！　　?/p>