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《cq11逆轉(zhuǎn)多藥耐藥人胃癌細胞株對多柔比星的耐藥論文》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關內(nèi)容在工程資料-天天文庫。
1、CQ11逆轉(zhuǎn)多藥耐藥人胃癌細胞株對多柔比星的耐藥論文吳達龍睢鳳英張成文呂煥章【摘要】目的:探討氯喹衍生物CQ11對耐長春新堿(vincristine,VCR)人胃癌多藥耐藥(multidrugresistance,MDR)細胞株SGC7901/VCR的耐藥逆轉(zhuǎn)作用。方法：將SGC7901和SGC7901/VCR細胞分別與各種濃度的多柔比星(doxorubicin,DOX)和/或CQ11在體外共同培養(yǎng)，采用MTT法檢測其細胞毒作用；采用熒光分光光度計測定細胞內(nèi)DOX蓄積量。結果：SGC7901/VCR細
2、胞對DOX的耐藥程度是SGC7901細胞的37.5倍。1.0、2.5和5.0mol/L的CQ11分別使DOX對SGC7901/VCR細胞的敏感性分別增加到2.2倍(P0.01)、5.5倍(P0.01)和14倍(P0.01)。DOX蓄積實驗表明，CQ11能顯著增加SGC7901/VCR細胞內(nèi)DOX蓄積，而對SGC7901細胞內(nèi)DOX蓄積無明顯影響。結論：通過增加細胞內(nèi)DOX蓄積量，CQ11在體外能有效逆轉(zhuǎn)SGC7901/VCR細胞對DOX的耐藥性【關鍵詞】多藥耐藥;氯喹;胃癌;逆轉(zhuǎn)劑腫瘤多藥耐藥(mul
3、tidrugresistance,MDR)指腫瘤細胞一旦對某種化療藥物產(chǎn)生耐藥性，同時對其它結構上無關、作用機理各異的抗腫瘤藥物也產(chǎn)生交叉耐藥性［1］。MDR是一種獨特的廣譜耐藥現(xiàn)象，是導致化療失敗的重要原因，許多天然來源的抗腫瘤藥物如長春新堿(vincristine,VCR)、紫杉醇等及蒽環(huán)類抗癌抗生素如多柔比星(doxorubicin,DOX)、柔紅霉素都極易發(fā)生MDR［1~3］。MDR主要的耐藥機理為多藥耐藥基因mdr1擴增及其蛋白產(chǎn)物P-糖蛋白(permeabilityglycoprotein
4、,Pgp)過表達。作為一個ATP依賴性的藥物轉(zhuǎn)運泵.freelethylsulfoxide,DMSO)溶解。MTT和DOX購自Sigma公司。1.2細胞培養(yǎng)SGC7901細胞和SGC7901/VCR細胞（將SGC7901細胞在含濃度不斷遞增的VCR的培養(yǎng)基中連續(xù)培養(yǎng)所獲得的耐藥細胞株）均由本室保存［4］，細胞均用含10%胎牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基，在37℃、5%CO2孵箱中培養(yǎng)。SGC7901/VCR在含0.80mol/LVCR培養(yǎng)液中穩(wěn)定生長,.freelin,成色產(chǎn)物溶解后用酶標儀測570n
5、m處吸光度值。以不加藥的瘤細胞組為對照，求給藥組IC50，并計算耐藥逆轉(zhuǎn)倍數(shù)(reversalfold,RF)。1.4細胞內(nèi)DOX蓄積實驗DOX蓄積實驗參照我們以往的報道進行［2］。簡述如下：取生長旺盛的SGC7901或SGC7901/VCR細胞,調(diào)節(jié)其濃度至1.0×106/mL,加入DOX4.0μmol/L和不同濃度的CQ11(分別為0.00,0.25,0.50,1.0,2.5,5.0和10μmol/L),在37℃、5%CO2孵箱中培養(yǎng)60min,取上述溶液1.0mL,100×g離心5min,冷PB
6、S洗2次,加入6.0mL50%乙醇-0.3mol/L鹽酸溶液,抽提2h,100×g離心10min,收集上清,在熒光分光光度計上測DOX的熒光強度(激發(fā)波長和發(fā)射波長分別為488nm和590nm)。在鹽酸-乙醇溶液中加入一系列已知濃度的DOX作為標準溶液,分別測定其熒光強度,建立DOX濃度-熒光強度標準曲線。1.5統(tǒng)計學處理實驗數(shù)據(jù)以均數(shù)±標準差表示，顯著性檢驗采用Student'st檢驗，P0.05被認為差異有統(tǒng)計學意義。2結果2.1CQ11的細胞毒作用CQ11對SGC7901和SGC7901/VCR
7、細胞的IC50分別是32±3.3μmol/L和34±4.3μmol/L,10μmol/LCQ11對SGC7901和SGC7901/VCR細胞無細胞毒作用。2.2CQ11對SGC7901/VCR細胞的耐藥逆轉(zhuǎn)效應如表1所示，SGC7901/VCR細胞對DOX的耐藥程度是SGC7901細胞的37.5倍。對SGC7901/VCR細胞,CQ11具有顯著的耐藥逆轉(zhuǎn)作用;1.0μmol/LCQ11即具有明顯的耐藥逆轉(zhuǎn)效應,5.0μmol/LCQ11使DOX對SGC7901/VCR細胞IC50從2.1±0.17μm
8、ol/L降低到0.15±0.012mol/L(耐藥逆轉(zhuǎn)倍數(shù)為14倍)，顯示CQ11對SGC7901/VCR細胞的MDR具有顯著的逆轉(zhuǎn)作用;5.0μmol/LCQ11使DOX對SGC7901細胞IC50從0.056±0.0047μmol/L降低到0.016±0.0024mol/L(增敏倍數(shù)為3.5倍),表明在SGC7901細胞CQ11有輕度的DOX增敏作用。表1CQ11增強DOX對SGC7901/VCR和SGC7901注：與未加CQ11的SGC7901細胞
