電針對(duì)大鼠腦缺血再灌注損傷腦組織sod、mda代謝的影響論文

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1、電針對(duì)大鼠腦缺血再灌注損傷腦組織SOD、MDA代謝的影響論文【摘要】目的觀察電針對(duì)大鼠缺血再灌注損傷腦組織超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量的影響。方法54只成年SD雄性大鼠按完全隨機(jī)法分為正常組，假手術(shù)組每組各12只，模型組、電針組每組各15只。采用線栓法復(fù)制局灶性腦缺血大鼠模型,于腦缺血再灌注3h、15h、27h動(dòng)態(tài)觀察各組腦缺血大鼠再灌注損傷腦組織SOD活性和MDA含量。結(jié)果各造模組大鼠血漿SOD活性比正常組均有所降低,模型組與各組比較有顯著性差異(P0.05)；各造模組大鼠血漿MDA的含量比正常

2、組均有所升高,模型組與各組比較有顯著性差異(P0.01)；電針組與正常組比較有顯著性差異(P0.05)。結(jié)論電針在某種程度上能夠抑制自由基的產(chǎn)生及連鎖反應(yīng)的發(fā)生，提高SOD活性，降低MDA的含量，從而起到清除氧自由基、減輕再灌注損傷、保護(hù)腦細(xì)胞的作用?！娟P(guān)鍵詞】電針大鼠缺血再灌注SODMDA在缺血再灌注過(guò)程中，鈣離子超載，氧自由基的大量形成和脂質(zhì)過(guò)氧化的增加是加重腦細(xì)胞損傷的主要病理過(guò)程.freelutase，SOD）是生物體內(nèi)主要的超氧自由基清除劑，丙二醛（malonyl-diadehyde，MDA）是脂質(zhì)過(guò)氧化

3、反應(yīng)的最終產(chǎn)物。腦缺血后脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)活躍，MDA產(chǎn)生增多，SOD則因消耗增多而減少。1文獻(xiàn)曾報(bào)道，電針對(duì)家兔心肌缺血再灌注損傷心功能具有保護(hù)作用，2本實(shí)驗(yàn)通過(guò)觀察電針療法對(duì)大鼠缺血再灌注缺血的側(cè)腦組織中超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)含量的影響，以探討電針對(duì)腦組織缺血再灌注損傷的保護(hù)作用，現(xiàn)將實(shí)驗(yàn)方法及結(jié)果報(bào)道如下。1材料1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：選用成年SD大鼠54只，雄性，體重350±40克。清潔級(jí)，由上海中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。1.2主要實(shí)驗(yàn)儀器及設(shè)備：G-6805-H電針治療儀（上海金山匯豐電子器

4、材廠制造），MDC-500型半導(dǎo)體激光治療儀（上海曼迪森科貿(mào)有限公司），722-光柵分光光度儀（上海精密科學(xué)儀器有限公司），HITAO-HI冷凍離心機(jī)（Hitachikokicoled），F(xiàn)J-200高速分散勻質(zhì)機(jī)（上海標(biāo)本模型機(jī)廠），XDA試劑盒，購(gòu)自南京建成生物工程研究所2方法2.1動(dòng)物分組：動(dòng)物常規(guī)飼養(yǎng)1周后，采用完全隨機(jī)法分為4組，即正常組、假手術(shù)組、模型組、電針組。正常組，假手術(shù)組每組各12只，模型組、電針組每組各15只。2.2模型制備：（1）線栓制備：取進(jìn)口4-0號(hào)單股尼龍線3.0cm,一端加熱使之成為

5、光滑的圓球形，圓球直徑0.244-0.249mm，生理鹽水沖洗，置于1%的肝素鈉溶液，備用。（2）模型制備：參照Z(yǔ)ea-longa的方法制備大鼠大腦中動(dòng)脈缺血/再灌注模型（MCAO），在原方法的基礎(chǔ)上有所改進(jìn)。缺血1.5h后再次麻醉，拔出栓線，使缺血區(qū)血流再灌。(3)步驟：①麻醉：10%的水合氯醛（0.3ml/100g）腹腔注射麻醉。②固定：仰臥手術(shù)臺(tái)，充分暴露大鼠頸部皮膚。③手術(shù)：頸部正中切口，從兩側(cè)頜下腺之間剪開(kāi)淺筋膜，游離甲狀腺右葉，顯露右側(cè)胸鎖乳突肌，鈍性分離胸鎖乳突肌與胸骨舌骨肌間的肌間隙，分離右側(cè)頸總動(dòng)

6、脈（CCA），頸外動(dòng)脈（ECA），頸內(nèi)動(dòng)脈（ICA），用電凝器電凝ECA的分支，游離ECA主干一段，在ECA深面穿二條細(xì)線，近心端打一活結(jié)，并推向ECA根部，遠(yuǎn)心端結(jié)扎ECA，沿ICA向下分離翼額動(dòng)脈（PPA）。用小動(dòng)脈夾夾閉CCA、ICA，在ECA游離主干段兩線結(jié)之間用弧形剪剪斷，滴0.03ml濃度為2.4×106U/L的肝素鈉溶液，然后將制備好的栓線插入ECA，經(jīng)CCA分叉處通過(guò)ICA，入顱腦至大腦前動(dòng)脈（ACA），深度為18.5±0.5mm,再灌注時(shí)再次麻醉，拔出線栓即可。大腦中動(dòng)脈栓塞后1.5h恢復(fù)血供，再

7、灌注3h。2.3處理及治療方法：正常組、假手術(shù)組、模型組同樣抓取，不進(jìn)行治療。電針組：選百會(huì)、內(nèi)關(guān)、環(huán)跳、足三里，G-6805-H電針儀，采用疏密波，頻率為4-20Hz，強(qiáng)度以引起穴位周圍組織輕微顫抖為度，在示波器監(jiān)視控制下的電流強(qiáng)度為3mA，每次治療25分鐘，栓線拔出后再灌注3h，開(kāi)始第一次治療，12h治療1次，共治療3次。2.4取材與樣品基礎(chǔ)處理：治療完成24h后，斷頭取腦，冰浴環(huán)境下將大腦從視交叉后1.5mm處切開(kāi)，取缺血側(cè)前半腦稱重，放入10mm×150mm的玻璃試管中，按重量/體積1：10的比例加入生理鹽

8、水，-20℃保存，標(biāo)測(cè)時(shí)制成10%的腦勻漿。SOD活力、MDA分別采用黃嘌呤氧化酶發(fā)光法、硫代巴比妥酸（TBA）法，采用721可見(jiàn)分光光度計(jì)測(cè)定，用考馬斯亮藍(lán)測(cè)定蛋白含量。2.5統(tǒng)計(jì)學(xué)方法：應(yīng)用SPSS10.0軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析處理,計(jì)量數(shù)據(jù)以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示。各組間差異采用單因素方差分析。3結(jié)果電針對(duì)大鼠缺血的側(cè)腦組織SOD、MDA活性的影響：表1示，各