響應(yīng)面法優(yōu)化蛹蟲(chóng)草菌絲體多糖超聲波提取工藝的研究論文

響應(yīng)面法優(yōu)化蛹蟲(chóng)草菌絲體多糖超聲波提取工藝的研究論文

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1、響應(yīng)面法優(yōu)化蛹蟲(chóng)草菌絲體多糖超聲波提取工藝的研究論文董媛朱靖宇王虎義左陶馬東宵滕利榮【摘要】目的利用單因素及響應(yīng)面分析法優(yōu)化蛹蟲(chóng)草菌絲體多糖超聲提取工藝。方法通過(guò)單因素實(shí)驗(yàn)選取實(shí)驗(yàn)因素與水平,在單因素實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上,以液料比、超聲功率、提取時(shí)間為響應(yīng)因子,進(jìn)行3因素3水平的響應(yīng)面實(shí)驗(yàn),并與傳統(tǒng)水提法進(jìn)行比較分析。結(jié)果超聲提取蛹蟲(chóng)草菌絲體中多糖的最佳工藝條件為:提取時(shí)間504s,提取功率466)優(yōu)化多糖提取工藝的研究報(bào)道較少[5]。響應(yīng)面分析法(ResponseSurfaceMethodology,RSM),將數(shù)學(xué)與統(tǒng)計(jì)

2、學(xué)相結(jié)合,采用多元二次回歸方法作為函數(shù)估計(jì)的工具來(lái)擬合因素與響應(yīng)值之間的函數(shù)關(guān)系[6],依此可對(duì)函數(shù)的響應(yīng)面和等高線進(jìn)行分析來(lái)尋求最佳工藝參數(shù)。本工藝在蛹蟲(chóng)草菌絲體多糖的提取過(guò)程中,以液體深層發(fā)酵獲得蛹蟲(chóng)草菌絲體為原料,將單因素和響應(yīng)面分析法應(yīng)用于超聲波提取蛹蟲(chóng)草菌絲體多糖,研究了超聲提取的條件及其對(duì)提取結(jié)果的影響,并與傳統(tǒng)水浸提法進(jìn)行了比較,為其工藝路線的改造,降低生產(chǎn)成本以及工業(yè)化生產(chǎn)提供一定的理論參考。1材料與儀器蛹蟲(chóng)草菌種(CGMCC5.0699),購(gòu)于中國(guó)科學(xué)院微生物研究所;蒽酮,濃硫酸,3,5-二硝基水楊

3、酸,葡萄糖,所有試劑均為分析純;HZQ-F160型全溫振蕩培養(yǎng)箱(哈爾濱市東聯(lián)電子技術(shù)開(kāi)發(fā)有限公司),MLS-3750型高壓自動(dòng)滅菌鍋(日本SANYO),超凈工作臺(tái)(蘇凈集團(tuán)安泰公司),5810R型高速冷凍離心機(jī)(德國(guó)Eppendorf),JY92-Ⅱ超聲波細(xì)胞粉碎儀(廈門精密儀器有限公司),UV-3150紫外分光光度計(jì)(日本島津),BP221S電子天平(德國(guó)賽多利斯)。2方法2.1多糖的測(cè)定2.1.1總糖的測(cè)定蒽酮-硫酸法[7]。2.1.2還原糖的測(cè)定DNS法[8]。2.1.3菌絲體多糖提取率的計(jì)算多糖含量=總糖含

4、量-還原糖含量多糖提取率(%)=[多糖含量(g)/菌絲體質(zhì)量(g)]×l00%2.2菌絲體多糖的超聲提取方法液體深層發(fā)酵獲得蛹蟲(chóng)草菌絲體,冷凍干燥至恒重,粉碎,過(guò)60目篩。分別稱取0.1g菌絲體干粉,按一定液料比加入一定量去離子水,水浴中超聲波提取一定時(shí)間。提取液經(jīng)12000r/min,4℃,離心10min,上清測(cè)定總糖和還原糖的含量。2.3菌絲體多糖提取單因子實(shí)驗(yàn)在提取過(guò)程中,利用單因子實(shí)驗(yàn)對(duì)影響多糖提取率的液料比、超聲功率、提取時(shí)間3個(gè)主要因素進(jìn)行考察。2.4菌絲體多糖提取中心組合實(shí)驗(yàn)在單因子實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上根據(jù)Bo

5、x-Benhnken的中心組合實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)原理,采用響應(yīng)面法在3因素3水平上對(duì)菌絲體多糖的提取條件進(jìn)行優(yōu)化。按最佳提取條件進(jìn)行驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)并考察提取次數(shù)對(duì)提取率的影響。3結(jié)果3.1超聲波提過(guò)程中的單因素影響3.1.1提取時(shí)間對(duì)菌絲體多糖提取率的影響在液料比40∶1,提取功率300].鄭州:河南科學(xué)技術(shù)出版社,2004:24.[2]王琦,韓曉龍.蛹蟲(chóng)草對(duì)老年大鼠自由基代謝影響的研究[J].遼寧師范學(xué)報(bào),2002,4(4):104.[3]熊中良,鄧春生.真菌多糖免疫活性的研究進(jìn)展[J].江西農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào),2006,18(2):118

6、.[4]高麗君,王漢忠,崔建華,等.白首烏可溶性多糖提取工藝研究[J].食品科學(xué),2004,.freel].杭州:浙江大學(xué)出版社,2003:103.[8]滕利榮.生物學(xué)基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)教程[M].長(zhǎng)春:吉林科學(xué)技術(shù)出版社,1999:541.

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