紫外分光光度法測(cè)定紫云英蜜中總酚的含量

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1、紫外分光光度法測(cè)定紫云英蜜中總酚的含量作者：張賽群梁妍楊杰彭佼朱潔【摘要】目的：建立紫云英蜜中總酚含量測(cè)定方法。方法：采用Folin酚法，樣品經(jīng)福林試劑顯色反應(yīng)后，紫外可見分光光度計(jì)測(cè)定其總酚含量。結(jié)果：總酚在2.03～8.04μg·mL-1內(nèi)線性良好，r=0.9997，且平均回收率為102.42%，RSD=2.64%(n=5)。結(jié)論：該方法準(zhǔn)確，簡(jiǎn)便，重現(xiàn)性好，專屬性強(qiáng)，可有效地控制紫云英蜜的質(zhì)量。【關(guān)鍵詞】肖公蜜總酚Folin酚法紫外分光光度法　AbstractObjective：ToestablishaUVmethodfordeterminationofthecontentof

2、totalhydroxybenzeneforZiyunyingmi.Method：FolinDenisiningthecontentoftotalhydroxybenzenebyUV.Result：ThetotalhydroxybenzeneshoL-1，r=0.9997，theaveragerecoveryethodisaccurateandsimplei；totalhydroxybenzene；FolinDenis；UV　　紫云英蜜又名紅花草蜜或草子蜜，具有大自然清新宜人的草香味，甜而不膩，鮮潔清甜，色澤為淺琥珀色。富含多糖、多酚、氨基酸、維生素、微量元素等多種營(yíng)養(yǎng)成分，長(zhǎng)期飲用可

3、補(bǔ)氣血，健脾胃，增強(qiáng)抗病能力，強(qiáng)身健體。且其中的多酚酸具有抗病原微生物、抗炎癥、抗變態(tài)反應(yīng)、抗心血管疾病和抗氧化等作用［1，2］。為了控制產(chǎn)品質(zhì)量，我們采用Folin酚法對(duì)貴州不同產(chǎn)地的紫云英蜜中總多酚含量進(jìn)行了研究。　　1儀器與試藥　　1.1儀器紫外可見分光光度計(jì)（島津2401）;超聲波清洗儀（昆山市超聲儀器有限公司KQ2508型）;恒溫水浴鍋（余姚市亞星儀器儀表有限公司）。　　1.2試藥原兒茶酸對(duì)照品（批號(hào)：110809200503）；鎢酸鈉，磷鉬酸，85%磷酸，Na2CO3，以上試劑均為分析純；水為蒸餾水；　　1.3福林試劑的配制［3］：稱取鎢酸鈉40g，磷鉬酸8g和85%磷

4、酸20mL，溶于300ml蒸餾水，煮沸加熱回流2h，冷卻，稀釋至400mL，置于棕色瓶中保存?！　?.4Na2CO3溶液的配制稱取15gNa2CO3，溶于200mL蒸餾水中，即為75g·L-1Na2CO3溶液?！　?方法與結(jié)果　　2.1對(duì)照品溶液的制備原兒茶酸對(duì)照品的配制：稱取原兒茶酸對(duì)照品15.80mg于50mL容量瓶中，蒸餾水溶解并定容，搖勻，備用，濃度為316μg·mL-1?！　?.2供試品溶液的制備取同一批樣品，精密稱定，置于50mL容量瓶中，超聲使溶，過濾，取20mL續(xù)濾液定容成50mL，搖勻，備用?！　?.3測(cè)定方法精密吸取適量樣品溶液1mL于10mL帶塞離心管中，加入2.5m

5、L福林試劑，放置5min，再精密加入Na2CO3溶液2mL，50℃水浴保持5min，再取出室溫放置2h，于760nm左右測(cè)定吸光度值。　　2.4標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備從原兒茶酸標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液中分別吸取1，1.5，2，2.5，3，3.5mL于25mL容量瓶中，蒸餾水稀釋定容，搖勻，濃度分別為12.64μg·mL-1，18.96μg·mL-1，25.28μg·mL-1，31.60μg·mL-1，37.92μg·mL-1，44.24μg·mL-1，分別從中精密吸取1mL，按2.3測(cè)定方法反應(yīng)，測(cè)定吸光度值。以終濃度為橫坐標(biāo)，吸光度值為縱坐標(biāo)，得回歸方程為Y=0.0932X-0.0315，r=0.9997。結(jié)

6、果表明總酚在12.64μg·mL-1～44.24μg·mL-1范圍內(nèi)線性良好?！　?.5精密度試驗(yàn)取同一份對(duì)照品按上述反應(yīng)后連續(xù)測(cè)定5次，吸光度值RSD=0.386%。結(jié)果表明儀器精密度良好。　　2.6樣品吸光度值穩(wěn)定性試驗(yàn)按2.2供試品溶液制備方法制備樣品液，并按2.3測(cè)定方法反應(yīng)后，每隔5min測(cè)定一次，觀察吸光度值變化，結(jié)果1h內(nèi)的吸光度值RSD=1.42%，結(jié)果見圖1。結(jié)果表明樣品顯色后在1h內(nèi)較穩(wěn)定?！　?.7重現(xiàn)性試驗(yàn)取同一批樣品，平行5份，精密稱定，按供試品溶液法制備，并按2.3測(cè)定法反應(yīng)。結(jié)果表明，樣品的平均含量為2.154mg·g-1，RSD=3.43%。結(jié)果表明方法重現(xiàn)

7、性良好?！　?.8加樣回收率試驗(yàn)取同一批樣品，精密稱定，精密加入337μg·mL-1原兒茶酸對(duì)照品2mL，按供試品溶液法操作，并按2.3測(cè)定樣品中總酚的含量，結(jié)果表明，其回收率為102.42%，RSD=2.64%，數(shù)據(jù)見表1。表1總酚加樣回收率試驗(yàn)結(jié)果（、略）　　2.9樣品含量測(cè)定分別精密稱取貴州不同產(chǎn)地的樣品，每批平行取5份，按2.3測(cè)定方法操作，測(cè)定每批樣品中總酚平均含量。結(jié)果見表2。表2不同批次樣品總酚含量（略）