總膽固醇 甘油三酯試劑對(duì)總膽汁酸測(cè)定結(jié)果的影響

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1、總膽固醇甘油三酯試劑對(duì)總膽汁酸測(cè)定結(jié)果的影響【摘要】　　目的：探討用全自動(dòng)生化分析儀進(jìn)行項(xiàng)目測(cè)定時(shí)，總膽固醇、甘油三酯試劑對(duì)總膽汁酸測(cè)定產(chǎn)生的交叉污染。方法：將TC、TG試劑加入混合血清進(jìn)行TBA測(cè)定，并與加入生理鹽水的對(duì)照管相比較；選取TBA測(cè)定范圍在0.6μmol/L～30.1μmol/L之間的生化檢驗(yàn)標(biāo)本60例，先單獨(dú)測(cè)定TBA，然后再先測(cè)TC和TG后測(cè)TBA。結(jié)果：TC、TG試劑當(dāng)作標(biāo)本測(cè)定的TBA值與對(duì)照組比較有顯著性差異（P＜0.001）；先測(cè)TC和TG后測(cè)TBA，其TBA值與單獨(dú)測(cè)得TBA值比較有顯著性差異（P＜0.001）。結(jié)論：自動(dòng)生化分

2、析中，用先測(cè)TC和TG后測(cè)TBA的分析順序時(shí)，TC和TG試劑對(duì)TBA的測(cè)定結(jié)果有影響，可導(dǎo)致TBA的測(cè)定結(jié)果偏高。【關(guān)鍵詞】總膽固醇　甘油三酯　總膽汁酸　　在日常工作中,用全自動(dòng)生化分析儀進(jìn)行項(xiàng)目測(cè)定時(shí)發(fā)現(xiàn),TC、TG試劑與總膽汁酸試劑相鄰時(shí),可造成總膽汁酸測(cè)定結(jié)果偏高,考慮可能為試劑之間的交叉污染。為此,我們用貝克曼KX-20全自動(dòng)生化分析儀進(jìn)行了相關(guān)實(shí)驗(yàn),并探討了避免交叉污染的方法。1材料1.1儀器與試劑KX-20全自動(dòng)生化分析儀?？偰懝檀肌⒏视腿ズ涂偰懼嵩噭┚鶠樯虾Ｉ昴?德賽診斷技術(shù)有限公司產(chǎn)品。1.2標(biāo)本隨機(jī)選擇TBA測(cè)定范圍在0.6μmol/

3、L～30.1μmol/L之間的臨床生化檢驗(yàn)標(biāo)本60例。2實(shí)驗(yàn)方法與結(jié)果2.1項(xiàng)目間交叉污染實(shí)驗(yàn)將60例標(biāo)本用自動(dòng)生化分析儀單獨(dú)進(jìn)行TBA測(cè)定,結(jié)果為(10.7±0.23)μmol/L,然后先測(cè)定TC后測(cè)定TBA，TBA結(jié)果為(18.6±0.21)μmol/L,先測(cè)定TG后測(cè)定TBA，TBA結(jié)果為(24.5±0.24)μmol/L,分別與單獨(dú)測(cè)得值作配對(duì)t檢驗(yàn),P均<0.001。2.2交叉干擾的排查2.2.1干擾原因的排查：將常用生化檢測(cè)項(xiàng)目ALT、AST、ALP、r-GT、uA、TC、TG、GLU、HDL、LDL等試劑作為標(biāo)本進(jìn)行TBA測(cè)定,發(fā)現(xiàn)TC

4、、TG試劑測(cè)定結(jié)果很高。考慮到基質(zhì)效應(yīng)的影響,進(jìn)一步將TC、TG試劑和生理鹽水加入混合血清進(jìn)行對(duì)照實(shí)驗(yàn)并觀察其干擾情況。具體方法如下:對(duì)照管加入生理鹽水0.1mL和混合血漿0.4mL,實(shí)驗(yàn)管分別加入試劑0.1mL和混合血漿0.4mL,同時(shí)用KX-20全自動(dòng)生化分析儀進(jìn)行TBA測(cè)定,并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,結(jié)果見(jiàn)表1。表1加入總膽固醇和甘油三酯試劑后TBA(μmol/L)測(cè)定結(jié)果2.2.2改變儀器檢測(cè)順序：TC、TG與TBA試劑相鄰時(shí)，在TC與TBA、TG與TBA之間任意穿插其它項(xiàng)目ALT、AST(TC-ALT-AST-TBA、TG-ALT-AST-TBA)測(cè)定T

5、BA，結(jié)果為(10.83±0.22)μmol/L和(10.95±0.24)μmol/L,分別與單獨(dú)測(cè)定TBA所得結(jié)果作配對(duì)t檢驗(yàn)，P均＞0.1。3討論多通道生化分析儀的試劑加樣針需接觸各種試劑成分,在兩個(gè)測(cè)試項(xiàng)目之間以蒸餾水清洗,如果清洗不干凈,一個(gè)項(xiàng)目對(duì)緊隨其后的一個(gè)甚至幾個(gè)項(xiàng)目的測(cè)定會(huì)帶來(lái)一定程度的試劑污染，并隨著儀器使用時(shí)間的累加、標(biāo)本量的增加、儀器狀況的下降，試劑交叉污染的程度會(huì)有所增加［１］。常見(jiàn)的干擾原因是前一項(xiàng)目的試劑中含有下一測(cè)試項(xiàng)目所要測(cè)定的底物，或是含有的某種試劑成分與下一反應(yīng)所要測(cè)定的底物有作用，因而直接干擾下一反應(yīng)的測(cè)定結(jié)果。本試驗(yàn)

6、結(jié)果表明:ALT、AST及具有同樣顯色系統(tǒng)的氧化酶法葡萄糖、尿酸試劑及類(lèi)似的HDL、LDL等試劑均未發(fā)現(xiàn)干擾存在。TC、TG試劑對(duì)TBA測(cè)定結(jié)果有明顯的正干擾,會(huì)使TBA測(cè)定結(jié)果假性增高,與對(duì)照組比較有非常顯著性差異,這種結(jié)果是由于TC、TG測(cè)定試劑中均加有膽酸鹽,膽酸鹽具有膽汁酸的反應(yīng)特性,自動(dòng)分析時(shí)引起攜帶污染［2］,導(dǎo)致TBA測(cè)定結(jié)果假性增高。當(dāng)改變儀器檢測(cè)順序，在TC、TG與TBA之間任意穿插其它項(xiàng)目進(jìn)行檢測(cè)時(shí)，所得結(jié)果與對(duì)照組比較無(wú)顯著性差異。解決以上自動(dòng)生化分析儀試劑針攜帶污染所致的干擾方法有:①安排項(xiàng)目順序時(shí)要求兩個(gè)項(xiàng)目間至少要有一個(gè)非干擾項(xiàng)

7、目，或?qū)⒈桓蓴_項(xiàng)目放在干擾項(xiàng)目之前；②設(shè)定試劑針、樣品針和反應(yīng)杯的補(bǔ)充清洗程序,從而大大減低試劑之間的交叉污染?！緟⒖?/p>