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1、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β2在口腔鱗癌中的表達(dá)和意義論文【摘要】目的對(duì)口腔鱗癌轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β2(TGF-β2)的蛋白表達(dá)進(jìn)行研究，探討轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β2(TGF-β2)和口腔鱗癌侵襲及轉(zhuǎn)移的關(guān)系。方法采用SABC免疫組織化學(xué)法對(duì)口腔鱗癌共40例標(biāo)本的癌灶組織中TGF-β2的蛋白表達(dá)水平進(jìn)行研究。結(jié)果與正常組織相比，口腔鱗癌中TGF-β2的蛋白表達(dá)呈過量表達(dá)，TGF-β2表達(dá)與口腔鱗癌臨床病理分級(jí)、臨床分期及頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移顯著相關(guān)。結(jié)論TGF-β2可能與口腔鱗癌的侵襲和轉(zhuǎn)移有密切關(guān)系?！娟P(guān)鍵詞】轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β；口腔鱗癌；轉(zhuǎn)移Expressionoftransforminggroouscellcar
2、cinoma【Abstract】ObjectiveTodetecttheroleoftransforminggroetastasisofhumanoralsquamouscellcarcinoma.MethodsUsingSABCimmunohistochemicalmethodtodeterminetheexpressionofTGF-β2in40casesoforalsquamuscellcarcinoma.ResultsTheexpressionofTGF-βproteinouscellcarcinoma,paringtothenormaloralmucosa;TGF-β2
3、expressionphnodemetastasis.ConclusionTGF-β2mayrelatedetastasisoforalsquamouscellcarcinoma.【Keyinggroouscellcarcinoma;metastasis口腔鱗癌是口腔頜面最常見的惡性腫瘤之一，目前對(duì)其生物學(xué)行為和其進(jìn)展、轉(zhuǎn)移的原因仍了解較少。研究發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β(Transforminggro。采用SABC法，免疫組化染色程序按試劑盒說明書進(jìn)行。操作步驟如下：切片脫蠟至水，新鮮配制的3%雙氧水浸泡10min，以消除內(nèi)源性過氧化物酶；抗原修復(fù)，正常兔血清孵育30min，滴加鼠抗人
4、TGF-β2多克隆抗體，4℃過夜；滴加生物素化山羊抗小鼠IgG,37℃孵育20min;滴加試劑SABC，37℃孵育30min；DAB顯微鏡下控制顯色；上述各步之后均用0.01mol/LPBS振蕩漂洗3次，每次5min；蘇木素復(fù)染，脫水透明，封片，顯微鏡下觀察。陰性對(duì)照以PBS代替一抗，其余步驟相同。陽(yáng)性對(duì)照采用自身對(duì)照，用PBS代替一抗和二抗作陰性對(duì)照。1.3免疫組化結(jié)果判定在不知任何背景資料的情形下，采用雙盲法進(jìn)行判定，以腫瘤細(xì)胞膜和(或)胞漿出現(xiàn)淡至深棕黃色顆粒為陽(yáng)性。顯微鏡下觀察，染色結(jié)果按陽(yáng)性細(xì)胞百分比，陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)＜5%為陰性(-)，陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)在5%～20%之間為(+)，
5、陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)在25%～75%之間為中等陽(yáng)性(++)，陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)＞75%為強(qiáng)陽(yáng)性(+++)。1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用Kendalltau等級(jí)相關(guān)分析。2結(jié)果2.1TGF-β2免疫組化特征TGF-β2陽(yáng)性物質(zhì)分布于細(xì)胞內(nèi)，細(xì)胞膜不著色，陽(yáng)性顆粒在細(xì)胞漿中粗細(xì)不等，在正?？谇火つず涂谇击[癌組織中均有表達(dá)，但染色程度存在差異。正?？谇火つそM織可見少量著色，癌組織中陽(yáng)性物質(zhì)主要分布在癌巢邊緣的腫瘤細(xì)胞上，與正?？谇火つと旧珡?qiáng)度相比，TGF-β2在癌組織中呈過量表達(dá)。2.2TGF-β2與口腔鱗癌臨床病理特征的關(guān)系40例口腔鱗癌中，陰性6例，弱陽(yáng)性6例，中等陽(yáng)性12例，強(qiáng)陽(yáng)性16例。根據(jù)Kendal
6、ltau等級(jí)相關(guān)檢驗(yàn)，可見TGF-β2表達(dá)與口腔鱗癌臨床病理分級(jí)、臨床分期及頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移顯著相關(guān)(見表1)。表1TGF-β2表達(dá)與口腔鱗癌臨床病理特征的關(guān)系（略）3討論TGF-β2是細(xì)胞生長(zhǎng)、分化的負(fù)性調(diào)控因子，對(duì)細(xì)胞的增殖、分化起雙重調(diào)節(jié)作用。研究發(fā)現(xiàn)，TGF-β2的生長(zhǎng)調(diào)節(jié)作用與細(xì)胞類型有關(guān)：對(duì)纖維母細(xì)胞，TGF-β2能促進(jìn)其生長(zhǎng)，這一作用通過血小板源生長(zhǎng)因子(PDGF)來介導(dǎo)［4］；對(duì)上皮來源的細(xì)胞，TGF-β2有生長(zhǎng)抑制作用，TGF-β2使培養(yǎng)細(xì)胞阻滯于G1期；同時(shí)伴有RB基因低磷酸化。若在RB蛋白磷酸化而失活后加入TGF-β2即失去細(xì)胞生長(zhǎng)抑制作用［5］，因此提示TGF
7、-β2可能通過RB蛋白發(fā)揮生長(zhǎng)抑制作用。另外TGF-β2有明顯的免疫抑制作用，能抑制T細(xì)胞和B細(xì)胞生長(zhǎng)，抑制B細(xì)胞合成免疫球蛋白及NK細(xì)胞的細(xì)胞毒作用，若將TGF-β2基因轉(zhuǎn)至具有免疫原性的纖維肉瘤細(xì)胞，可使其對(duì)裸鼠致病率大大提高［6］。近年來TGF-β2在腫瘤形成和預(yù)后中的作用已逐漸引起人們的重視。MaxJY,AlmHJ,ZclnerDJ,etal.Geicchangesintransforminggroanprostatecancercells.CancerRes,1996,
