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1、轉(zhuǎn)化生長因子β2在口腔鱗癌中的表達(dá)和意義【摘要】目的對口腔鱗癌轉(zhuǎn)化生長因子β2(TGF-β2)的蛋白表達(dá)進(jìn)行研究,探討轉(zhuǎn)化生長因子β2(TGF-β2)和口腔鱗癌侵襲及轉(zhuǎn)移的關(guān)系。方法采用SABC免疫組織化學(xué)法對口腔鱗癌共40例標(biāo)本的癌灶組織中TGF-β2的蛋白表達(dá)水平進(jìn)行研究。結(jié)果與正常組織相比,口腔鱗癌中TGF-β2的蛋白表達(dá)呈過量表達(dá),TGF-β2表達(dá)與口腔鱗癌臨床病理分級、臨床分期及頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移顯著相關(guān)。結(jié)論TGF-β2可能與口腔鱗癌的侵襲和轉(zhuǎn)移有密切關(guān)系。 【關(guān)鍵詞】轉(zhuǎn)化生長因子β;口腔鱗癌;轉(zhuǎn)移 Expressionoftra
2、nsforminggroouscellcarcinoma 【Abstract】ObjectiveTodetecttheroleoftransforminggroetastasisofhumanoralsquamouscellcarcinoma.MethodsUsingSABCimmunohistochemicalmethodtodeterminetheexpressionofTGF-β2in40casesoforalsquamuscellcarcinoma.ResultsTheexpressionofTGF-βproteinouscell
3、carcinoma,paringtothenormaloralmucosa;TGF-β2expressionphnodemetastasis.ConclusionTGF-β2mayrelatedetastasisoforalsquamouscellcarcinoma. 【Keyinggroouscellcarcinoma;metastasis 口腔鱗癌是口腔頜面最常見的惡性腫瘤之一,目前對其生物學(xué)行為和其進(jìn)展、轉(zhuǎn)移的原因仍了解較少。研究發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)化生長因子β(Transforminggro。采用SABC法,免疫組化染色程序按試劑盒說明書進(jìn)行
4、。操作步驟如下:切片脫蠟至水,新鮮配制的3%雙氧水浸泡10min,以消除內(nèi)源性過氧化物酶;抗原修復(fù),正常兔血清孵育30min,滴加鼠抗人TGF-β2多克隆抗體,4℃過夜;滴加生物素化山羊抗小鼠IgG,37℃孵育20min;滴加試劑SABC,37℃孵育30min;DAB顯微鏡下控制顯色;上述各步之后均用0.01mol/LPBS振蕩漂洗3次,每次5min;蘇木素復(fù)染,脫水透明,封片,顯微鏡下觀察。陰性對照以PBS代替一抗,其余步驟相同。陽性對照采用自身對照,用PBS代替一抗和二抗作陰性對照?! ?.3免疫組化結(jié)果判定在不知任何背景資料的情形下,
5、采用雙盲法進(jìn)行判定,以腫瘤細(xì)胞膜和(或)胞漿出現(xiàn)淡至深棕黃色顆粒為陽性。顯微鏡下觀察,染色結(jié)果按陽性細(xì)胞百分比,陽性細(xì)胞數(shù)<5%為陰性(-),陽性細(xì)胞數(shù)在5%~20%之間為(+),陽性細(xì)胞數(shù)在25%~75%之間為中等陽性(++),陽性細(xì)胞數(shù)>75%為強(qiáng)陽性(+++)。 1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用Kendalltau等級相關(guān)分析。 2結(jié)果 2.1TGF-β2免疫組化特征TGF-β2陽性物質(zhì)分布于細(xì)胞內(nèi),細(xì)胞膜不著色,陽性顆粒在細(xì)胞漿中粗細(xì)不等,在正常口腔黏膜和口腔鱗癌組織中均有表達(dá),但染色程度存在差異。正常口腔黏膜組織可見少量著色,癌組織中陽
6、性物質(zhì)主要分布在癌巢邊緣的腫瘤細(xì)胞上,與正常口腔黏膜染色強(qiáng)度相比,TGF-β2在癌組織中呈過量表達(dá)。 2.2TGF-β2與口腔鱗癌臨床病理特征的關(guān)系40例口腔鱗癌中,陰性6例,弱陽性6例,中等陽性12例,強(qiáng)陽性16例。根據(jù)Kendalltau等級相關(guān)檢驗(yàn),可見TGF-β2表達(dá)與口腔鱗癌臨床病理分級、臨床分期及頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移顯著相關(guān)(見表1)?! ”?TGF-β2表達(dá)與口腔鱗癌臨床病理特征的關(guān)系(略) 3討論 TGF-β2是細(xì)胞生長、分化的負(fù)性調(diào)控因子,對細(xì)胞的增殖、分化起雙重調(diào)節(jié)作用。研究發(fā)現(xiàn),TGF-β2的生長調(diào)節(jié)作用與細(xì)胞類型有關(guān):
7、對纖維母細(xì)胞,TGF-β2能促進(jìn)其生長,這一作用通過血小板源生長因子(PDGF)來介導(dǎo)〔4〕;對上皮來源的細(xì)胞,TGF-β2有生長抑制作用,TGF-β2使培養(yǎng)細(xì)胞阻滯于G1期;同時伴有RB基因低磷酸化。若在RB蛋白磷酸化而失活后加入TGF-β2即失去細(xì)胞生長抑制作用〔5〕,因此提示TGF-β2可能通過RB蛋白發(fā)揮生長抑制作用。另外TGF-β2有明顯的免疫抑制作用,能抑制T細(xì)胞和B細(xì)胞生長,抑制B細(xì)胞合成免疫球蛋白及NK細(xì)胞的細(xì)胞毒作用,若將TGF-β2基因轉(zhuǎn)至具有免疫原性的纖維肉瘤細(xì)胞,可使其對裸鼠致病率大大提高〔6〕。 近年來TGF-β
8、2在腫瘤形成和預(yù)后中的作用已逐漸引起人們的重視。MaxJY,AlmHJ,ZclnerDJ,etal.Geicchangesintransforminggroanprostatec