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《烏司他丁對(duì)膿毒癥大鼠肺微血管通透性及肺組織pedf表達(dá)的影響》由會(huì)員上傳分享,免費(fèi)在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫(kù)。
1、烏司他丁對(duì)膿毒癥大鼠肺微血管通透性及肺組織PEDF表達(dá)的影響作者:蔡施霞,鄧烈華,佟琳,孫小聰【摘要】目的觀察烏司他丁注射液對(duì)膿毒癥大鼠肺微血管通透性及肺組織色素上皮衍生因子(PEDF)表達(dá)的影響,探討烏司他丁對(duì)膿毒癥大鼠肺保護(hù)的作用機(jī)制。方法30只健康的雄性SD大鼠隨機(jī)分為3組:假手術(shù)組(A組)、陽(yáng)性對(duì)照組(B組)、烏司他丁治療組(C組),每組10例。除假手術(shù)組外,其他組均施行盲腸結(jié)扎穿孔術(shù)(CLP)復(fù)制大鼠膿毒癥模型,治療組同時(shí)給予烏司他丁腹腔注射(100ku/kg),術(shù)后4h隨機(jī)處死大鼠5只取組織標(biāo)本,剩余5只大鼠經(jīng)頸外靜脈注射伊文思藍(lán)觀察肺微血管通透性。
2、分別采用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)法和酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)法檢測(cè)肺組織中PEDF的表達(dá)。結(jié)果B組肺微血管通透性明顯高于A、C組,C組肺微血管通透性高于A組;B組肺組織PEDF表達(dá)水平明顯低于A、C組,C組肺組織PEDF表達(dá)水平低于A組(P<0.05)。結(jié)論烏司他丁能明顯抑制膿毒癥大鼠肺微血管通透性增高,這種肺保護(hù)作用的機(jī)制可能與增加PEDF表達(dá)有關(guān)?!娟P(guān)鍵詞】烏司他丁注射液;膿毒癥;肺微血管通透性;PEDF 【Abstract】ObjectiveToobservethepermeabilityofpulmonarymicrovascular
3、andexpressionofPigmentepithelium-derivedfactorinsepticratstreatedechanismofUlinastatinininpulmonaryfunctionprotect.MethodsAtotalof30healthymaleSDratslydividedintothreegroups,andeachgrouphas10rats,GroupArecEivedshamoperationandtheothersunderalsaline(groupA,B)orUlinastatin(100ku/kg).Af
4、terfourhours,LungtissueexpressofPEDFinallratserasechainreaction(RT-PCR)andEnzyme-linkedimmunosorbentassay(ELISA)methodsrespectivelyandthepermeabilityofpulmonaryvasculareabilityofpulmonarymicrovascularingroupBechanismofactionmaybeinvolvedintheincreaseofPEDFexpression. 【Keyonarymicrov
5、ascular;PEDF 膿毒癥(sepsis)是合并感染的全身性炎癥反應(yīng)綜合征(systemicinflammationresponsesyndrome,SIRS),進(jìn)一步發(fā)展可導(dǎo)致多器官功能障礙綜合征(MODS),其中呼吸功能障礙發(fā)生率較高,出現(xiàn)時(shí)間早,其主要的病理生理改變?yōu)榉蚊?xì)血管通透性增加。而色素上皮衍生因子(PEDF)可使血管通透性降低,雖然臨床研究證實(shí)烏司他丁有明確的肺保護(hù)作用,但其作用機(jī)制仍有待研究,本研究采用盲腸結(jié)扎穿孔術(shù)(CLP)復(fù)制大鼠膿毒癥模型觀察烏司他丁對(duì)膿毒癥大鼠肺微血管通透性和PEDF影響,探討烏司他丁對(duì)膿毒癥大鼠肺微血管通透性影
6、響及其作用機(jī)制?! ?材料與方法 1.1動(dòng)物實(shí)驗(yàn)分組SPF級(jí)SD雄性大鼠30只,體質(zhì)量250~300g(由廣東醫(yī)學(xué)院動(dòng)物中心提供),按隨機(jī)數(shù)字表法分為三組:假手術(shù)組(A組),無(wú)菌狀態(tài)下開腹尋找到盲腸后再將其還納腹腔,然后逐層關(guān)腹,術(shù)后立即腹腔注射生理鹽水(NS)2ml;CLP組(B組),CLP后立即腹腔注射NS2ml;烏司他丁(UTI)治療組(C組),CLP后立即腹腔注射UTI20ku/kg,加NS至2ml。術(shù)后4h隨機(jī)選取5只頸外靜脈注射伊文思藍(lán)液,剩余5只大鼠活殺取肺組織標(biāo)本。為避免伊文思藍(lán)影響肺組織PEDF表達(dá)測(cè)定,隨機(jī)各取5只大鼠實(shí)驗(yàn)?! ?.2CLP
7、模型制備方法[2]動(dòng)物在乙醚吸入麻醉下無(wú)菌開腹手術(shù),在距盲腸末端1cm處用7號(hào)絲線結(jié)扎盲腸,用22G針頭在被結(jié)扎盲腸上對(duì)穿3次,注意避免糞便污染,并用生理鹽水2ml濕潤(rùn)腸管,按生理位置還納腸管。術(shù)畢逐層關(guān)腹,并于腹壁皮下注射林格氏液50ml/kg抗休克處理。術(shù)后自由進(jìn)食水?! ?.3觀察指標(biāo)及標(biāo)本處理觀察大鼠術(shù)后活動(dòng)、進(jìn)食、豎毛、腹瀉、眼球凹陷、呼吸以及活殺后腹腔腸管擴(kuò)張、充血、腹水、病灶包裹、肝腫大、肺表面充血等情況?;顨⑷?biāo)本時(shí)大鼠在乙醚吸入麻醉下,開腹留取右葉肺緣組織100mg,用磷酸鹽緩沖液(PBS)沖洗后立即置液氮凍存,置-80℃冰箱待逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈
8、反應(yīng)(RT-PCR)檢測(cè)