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《異體骨結(jié)合骨髓間質(zhì)干細(xì)胞移植治療骨缺損》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、異體骨結(jié)合骨髓間質(zhì)干細(xì)胞移植治療骨缺損ok3骨缺損模型,隨機(jī)選擇同一只動(dòng)物的一側(cè)為實(shí)驗(yàn)側(cè),自體配對(duì)的另一側(cè)為對(duì)照側(cè)。將表面脫鈣的同種異體骨和來源于受體的體外培養(yǎng)增殖的骨髓間質(zhì)干細(xì)胞混合植入實(shí)驗(yàn)側(cè)骨缺損,對(duì)照側(cè)僅植入同樣制作的異體骨。12周后,進(jìn)行X線檢查、生物力學(xué)檢查和組織學(xué)檢查,將結(jié)果進(jìn)行對(duì)比。【結(jié)果】動(dòng)物在術(shù)后12周,實(shí)驗(yàn)側(cè)X線片光密度測(cè)量結(jié)果,破壞載荷時(shí)扭矩和扭角測(cè)量結(jié)果均優(yōu)于對(duì)照側(cè);組織學(xué)評(píng)分中,實(shí)驗(yàn)側(cè)骨痂量評(píng)分優(yōu)于對(duì)照側(cè),骨連接成熟程度和骨髓發(fā)育程度兩者沒有明顯差異?！窘Y(jié)論】骨髓間質(zhì)干細(xì)胞可以促進(jìn)異體骨在移植后的成骨作用,在增多成骨量的同時(shí)不
2、影響骨組織發(fā)育?！娟P(guān)鍵詞】異體骨;骨髓間質(zhì)干細(xì)胞;移植;骨缺損Abstract:【Objective】Tostudythefeasibilityandresultoftransplantingboneallograftarrocellintreatmentofbonedefectinanimalexperiment.【Methods】FifteenNebonedefectmodelofbothradiuses.Randomly,oneradialsideodel,andtheothersideentalsideineralizedboneallogra
3、ftandbonemarrocellculturedinvitro.Thecontrolsidealsechanics,andhistology.Theresultsomentandangleinfailureloadtestandthescoreofcallusinhistologicalgradingprovedintheexperimentalside,paredaturedegreeofboneunionandgroarroarrocellcanenhancetheosteogenesisofboneallograftaftertranspla
4、ntation,ationentofbonetissue.Keyarrocell;allograft[JSUNYat-senUniv(MedSci),2007,28(5):515-519]骨移植是治療骨缺損最主要的方法,同種異體骨以其生物學(xué)特性和形態(tài)結(jié)構(gòu)與自體骨相近,可以長(zhǎng)期保存等優(yōu)點(diǎn)而已廣泛應(yīng)用于臨床,但大段異體骨移植后,由于骨融解吸收的速度快于新骨形成,影響了大段異體骨結(jié)構(gòu)性骨移植的遠(yuǎn)期療效。已有實(shí)驗(yàn)證實(shí)骨髓間質(zhì)干細(xì)胞(bonemarrocell,MSC)在一定誘導(dǎo)因素作用下能向成骨細(xì)胞分化,促進(jìn)成骨[1,2],但將異體骨和骨髓間質(zhì)干細(xì)胞混合移植后
5、的效果如何,目前未見報(bào)道。本研究應(yīng)用異體骨混合骨髓間質(zhì)干細(xì)胞植入動(dòng)物體內(nèi)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)性探索,希望通過骨髓間質(zhì)干細(xì)胞的成骨作用,達(dá)到改善治療效果的目的,為臨床提供參考。1材料和方法1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物健康新西蘭白兔15只,雌雄不限,體質(zhì)量2.8~3.5kg,平均為3.1kg,兔齡5~10(S=7)月。1.2實(shí)驗(yàn)試劑和材料低糖型DMEM干粉培養(yǎng)基(Dulbecco’sModifiedEagleMedium):13.75g/包(美國Gibco公司)。胎牛血清(FBS;美國Hyclone公司)。0.25%胰蛋白酶(美國Sigma公司)。淋巴細(xì)胞分離液(天津TBD生物技術(shù)
6、中心),密度為1.077。PBS平衡鹽溶液(美國Hyclone公司)。青霉素-硫酸鏈霉素雙抗溶液:青霉素1萬U+鏈霉素10mg/mL(美國Gibco公司)。異體骨:從健康5月齡新西蘭白兔橈骨截取。1.3異體骨的制備從5月齡的健康新西蘭白兔雙側(cè)取出橈骨,截去兩段干骺端后得到直徑均勻的長(zhǎng)約5cm的骨段,將每段骨截成3段各長(zhǎng)約1.5cm的骨段,在充分清除骨髓和軟組織后,先用三氯甲烷∶乙醇=1∶1的溶液浸泡24h進(jìn)行脫脂;用0.6mol/L的鹽酸浸泡15min進(jìn)行表面脫鈣;用PBS溶液沖洗后,再用PBS溶液,37℃浸泡24h中和鹽酸;測(cè)定浸泡后的溶液pH值約為
7、7.0~7.2后,用超純水250mL+青霉素10萬U+慶大霉素8萬U+鏈霉素100?滋g浸泡24h,然后在超凈臺(tái)內(nèi)晾干。將上述處理的異體骨分別裝入2mL的凍存管內(nèi)密封,在-80℃下深度冰凍2周;然后用2.0Mrads劑量的γ射線照射12h滅菌。再放入-80℃下深度冰凍保存?zhèn)溆?。使用時(shí),將異體骨放入約37℃的PBS中浸泡解凍后使用。1.4細(xì)胞培養(yǎng)對(duì)于骨髓間質(zhì)干細(xì)胞的制備、原代培養(yǎng)和保存方法,具體見
