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《條件治病菌之(糞)腸球菌研究觀察.doc》由會(huì)員上傳分享,免費(fèi)在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫(kù)。
1、條件致病菌腸球菌摘要:腸球菌不像大多數(shù)的乳酸菌一樣,它不被認(rèn)為是“安全可靠”(GRAS)。對(duì)于腸球菌的安全評(píng)價(jià)仍存有爭(zhēng)議。雖然腸球菌被認(rèn)為是“積極“或在奶酪技術(shù)中有用,但它的隔離種群已經(jīng)作為對(duì)人類(lèi)的條件致病菌出現(xiàn)。因此,這些細(xì)菌對(duì)發(fā)酵乳制品是否有益處于似是而非的地位,以為它存在有潛在的危險(xiǎn)。本篇綜述是概述了腸球菌的積極的和消極的兩種特性,并舉例說(shuō)明這個(gè)菌的具有爭(zhēng)議的特性。根據(jù)食品安全評(píng)價(jià)準(zhǔn)則,我們提出對(duì)于每個(gè)潛在的技術(shù)應(yīng)變逐個(gè)進(jìn)行評(píng)估,并且建議腸球菌在發(fā)酵食品中使用前進(jìn)行個(gè)別研究。1.簡(jiǎn)介2.窗體頂端腸球菌最初列為D群鏈球菌,這種分類(lèi)可以
2、追溯到由蘭斯菲爾德建立的計(jì)劃。1984年,腸球菌給予了新的位置被列為腸球菌屬,在經(jīng)過(guò)DNA-DNA和DNA-RNA雜交的研究后證明它與鏈球菌屬有較遠(yuǎn)的關(guān)系(SchleiferandKilpper-Balz,1984)。到目前為止32種已被提議列入腸球菌屬(2005年10月26號(hào))。腸球菌種適宜在6.5%氯化鈉,40%膽汁鹽且pH值在9.6,并可以在60°C的環(huán)境下生存30分鐘。大多數(shù)品種也可以在10℃至45℃之間生長(zhǎng)(Moellering,1992;Flahautetal.,1996)。糞腸球菌和屎腸球菌都是人類(lèi)消化道微生物自然存在的菌種
3、,在胃腸道中因?yàn)閭€(gè)體差異其含量差異變化很大(在每克消化系統(tǒng)內(nèi)容物中含有102和108)。腸球菌通常從食品、植物、水和土壤中分離,可能由于它的來(lái)源是糞便使得他們的天性在惡劣環(huán)境中比較耐受(Giraffa,2002)。在牛奶和奶酪制品中通常會(huì)找到糞腸球菌、屎腸球菌和少量的堅(jiān)忍腸球菌,偶然也會(huì)發(fā)現(xiàn)小腸腸球菌和鉛黃腸球菌。不同于其他乳酸菌,腸球菌不能被認(rèn)為是“一般認(rèn)為安全”(GRAS),并且它在水中檢測(cè)是作為糞便污染物的指標(biāo)的(Godfreeetal.,1997)。一般認(rèn)為對(duì)于腸球菌的安全評(píng)價(jià)程序是一個(gè)模棱兩可的狀況。一方面,腸球菌在作為奶酪技術(shù)
4、中作為發(fā)酵培養(yǎng)物被認(rèn)為是由積極作用的(Giraffa,2003);另一方面,它們被認(rèn)為是新興的人類(lèi)病原體(Moellering,1992)。這篇綜述主要是根據(jù)現(xiàn)有知識(shí)總結(jié)了腸球菌的積極和消極的性狀,來(lái)強(qiáng)調(diào)這種菌屬的爭(zhēng)議性。食品安全準(zhǔn)則著重強(qiáng)調(diào)了對(duì)抗生素耐藥性和毒力的因素,這樣使我們建議在發(fā)酵食品中使用腸球菌前應(yīng)對(duì)這幾項(xiàng)進(jìn)行研究。2.分類(lèi)和鑒定由于腸球菌的表型多樣性,這使得腸球菌種的生理測(cè)試鑒定一直存在問(wèn)題(Devrieseetal.,1993;Parketal.,1999)。此外,物種鑒定的常規(guī)實(shí)驗(yàn)往往需要很長(zhǎng)的培養(yǎng)時(shí)間(Facklame
5、tal.,2002)。使用16S和23SrDNA基因的基因型鑒定方法更加的準(zhǔn)確,雖然它們還不能區(qū)分所有腸球菌的物種(例如鶉雞腸球菌和鉛黃腸球菌有99.8%的16SrDNA的同源性)。這種方法已經(jīng)成功的在應(yīng)用:1)rRNA基因間隔區(qū)的特異PCR擴(kuò)增技術(shù)(Naimietal.,1997),ddl和van基因(Satakeetal.,1997;Kariyamaetal.,2000),ace基因(Duhetal.,2001),sodA基因(Jacksonetal.,2004),2)轉(zhuǎn)錄調(diào)控基因Ef0027的擴(kuò)增(Liuetal.,2005),3)
6、ddl基因(Ozawaetal.,2000),cpn60基因(Gohetal.,2000)和atpA基因(Naseretal.,2005)的測(cè)序,和4)利用5‘端引物(GTG)的細(xì)菌基因組重復(fù)序列PCR技術(shù)(Svecetal.,2005)。有許多人試圖區(qū)分從人分離的菌株和從食物分離的菌株,大部分主要關(guān)注的DNA指紋圖譜。這些研究使用了多種分子分型方法,如擴(kuò)增rDNA限制性分析(ARDRA)(UlrichandMuller,1998),脈沖場(chǎng)凝膠電泳(PFGE)的DNA宏觀限制模式(Deschee-maekeretal.,1997;Gamb
7、arottoetal.,2001;Vancanneytetal.,2002),隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)性DNA(RAPD)-PCR檢測(cè)(Cocconcellietal.,1995;Descheemaekeretal.,1997;Andrighettoetal.,2001;Cosentinoetal.,2004;Martinetal.,2005)和擴(kuò)增片段長(zhǎng)度多態(tài)性(AFLP)技術(shù)(Antonishynetal.,2000;Willemsetal.,2000;Vancanneytetal.,2002)。脈沖場(chǎng)凝膠電泳(PFGE)已成功地用于表現(xiàn)臨床和食
8、品株之間的差異,以及從家禽和住院患者分離的菌株的差異(vandenBraaketal.,1998;LemckeandBulte,2000)。雖然電泳是區(qū)分腸球菌屬菌株的黃金標(biāo)準(zhǔn)方法,但是它比較