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《增殖細(xì)胞核抗原及凋亡相關(guān)基因蛋白在肺鱗癌中的表達(dá)及意義》由會(huì)員上傳分享,免費(fèi)在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、增殖細(xì)胞核抗原及凋亡相關(guān)基因蛋白在肺鱗癌中的表達(dá)及意義作者:張瑾,李海,康培良,汪繼勇,陳芳,張陽 【關(guān)鍵詞】肺;鱗癌;增殖;凋亡;增殖細(xì)胞核抗原;Bcl ?。壅菽康模悍治鲈鲋臣?xì)胞核抗原(PA)、Bclxl、Bak蛋白在肺鱗癌中的表達(dá),探討其與肺鱗癌發(fā)生、發(fā)展的關(guān)系。方法:應(yīng)用免疫組化法對(duì)40例肺鱗癌組織中PA、Bclxl、Bak蛋白的表達(dá)進(jìn)行觀察和分析。結(jié)果:PA在肺鱗癌中的陽性表達(dá)率顯著高于正常支氣管黏膜(P<0.05)。Bclxl在肺鱗癌中的陽性表達(dá)率顯著高于正常支氣管黏膜(P<0.
2、05)。Bak在肺鱗癌中的陽性表達(dá)率顯著低于正常支氣管黏膜(P<0.05)。隨著腫瘤分化程度的降低,肺鱗癌中PA的陽性表達(dá)呈上升趨勢,而Bclxl及Bak的陽性表達(dá)呈下降趨勢。結(jié)論:PA、Bclxl、Bak都參與了肺鱗癌的形成和發(fā)展,因此,有效地控制細(xì)胞的增殖與凋亡,對(duì)肺鱗癌治療有重要的研究價(jià)值,可為肺鱗癌的治療提供新的思路。聯(lián)合檢測PA、Bclxl、Bak在評(píng)估肺鱗癌的發(fā)展及判斷轉(zhuǎn)移趨勢方面均具有重要意義?! 。坳P(guān)鍵詞]肺;鱗癌;增殖;凋亡;增殖細(xì)胞核抗原;Bclxl;Bak 惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)
3、展及轉(zhuǎn)移與細(xì)胞增殖和分化失常有關(guān)。細(xì)胞凋亡是由于細(xì)胞內(nèi)外環(huán)境變化或死亡信號(hào)激發(fā)以及在基因調(diào)控下所引起細(xì)胞主動(dòng)死亡的過程,其發(fā)生是細(xì)胞受促進(jìn)性和抑制性雙向因素共同調(diào)節(jié)的結(jié)果。Bcl2基因家族是細(xì)胞凋亡的重要調(diào)節(jié)者,因其功能特點(diǎn)又分為抗凋亡蛋白家族如Bclxl和促凋亡蛋白家族如Bak。本研究應(yīng)用免疫組化方法檢測肺鱗癌組織中增殖細(xì)胞核抗原(Proliferatingcellnuclerantigen,PA)和凋亡相關(guān)基因蛋白Bclxl、Bak的表達(dá),旨在探討PA、Bclxl和Bak基因產(chǎn)物在肺鱗癌發(fā)病機(jī)制中的作
4、用?! ?材料和方法 1.1材料選擇本院2000年至2005年胸外科手術(shù)切除的肺癌石蠟標(biāo)本40例。均經(jīng)HE染色,病理組織學(xué)確診。其中男27例,女13例,年齡37歲~60歲。對(duì)照組為正常支氣管黏膜20例?! ?.2方法肺癌標(biāo)本均經(jīng)10%的甲醛固定,常規(guī)石蠟包埋,切片厚4μm~5μm,載玻片經(jīng)多聚賴氨酸處理,防止脫片,微波抗原修復(fù)。兔抗人Bclxl多克隆抗體(工作濃度1∶50),兔抗人Bak多克隆抗體(工作濃度1∶50),鼠抗人PA單克隆抗體(工作濃度1∶50)。免疫組化試劑盒、DAB顯色劑試劑盒均購自福州
5、邁新公司。PBS沖洗、DAB顯色、蘇木素復(fù)染、常規(guī)脫水透明、樹膠封片,以PBS代替一抗作陰性對(duì)照?! ?.3結(jié)果陽性細(xì)胞為呈棕黃色或棕褐色顆粒的反應(yīng)產(chǎn)物,光鏡下任取4個(gè)高倍視野進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù),至少計(jì)數(shù)200個(gè)細(xì)胞,以陽性細(xì)胞占細(xì)胞總數(shù)的百分比表示陽性表達(dá)程度。0~5%為陰性(-);6%~10%為弱陽性(+);>10%為陽性(++)?! ?.4統(tǒng)計(jì)方法兩組間率的比較采用χ2檢驗(yàn),相關(guān)性分析采用Spearman秩相關(guān)檢驗(yàn),以P<0.05為差異有顯著性?! ?結(jié)果 PA在肺鱗癌及正常支氣管黏膜上皮中
6、的表達(dá):以細(xì)胞核中出現(xiàn)棕黃色或棕褐色顆粒為陽性表達(dá);Bclxl在肺鱗癌及正常支氣管黏膜上皮中的表達(dá):以細(xì)胞漿或核膜上中出現(xiàn)棕黃色或棕褐色顆粒為陽性表達(dá);Bak在肺鱗癌及正常支氣管黏膜上皮中的表達(dá):以細(xì)胞漿或核膜上中出現(xiàn)棕黃色或棕褐色顆粒為陽性表達(dá);Bclxl、Bak、PA在肺鱗癌中的表達(dá)情況比較及相關(guān)分析,見表1、表2。 表1Bclxl、Bak、PA在肺鱗癌和正常肺組織中表達(dá)(略) 表1提示:肺鱗癌中Bclxl蛋白表達(dá)較正常支氣管黏膜明顯升高,差異有顯著性(P<0.05)。肺鱗癌中Bak蛋白表達(dá)
7、較正常支氣管黏膜明顯降低,差異有顯著性(P<0.05)。肺鱗癌中PA蛋白表達(dá)較正常支氣管黏膜明顯升高,差異有顯著性(P<0.05)?! ”?Bclxl、Bak、PA與肺鱗癌病理分級(jí)的關(guān)系(略) 上表提示:隨著腫瘤分化程度的降低,肺鱗癌中PA蛋白的陽性表達(dá)升高,差異有顯著性(P<0.05),而Bclxl蛋白的陽性表達(dá)降低,差異有顯著性(P<0.05),Bak蛋白的陽性表達(dá)降低,差異有顯著性(P<0.05)?! ?討論 物質(zhì)合成和細(xì)胞增殖的活躍是腫瘤發(fā)生發(fā)展的重要基礎(chǔ),而腫瘤
8、組織發(fā)生發(fā)展的重要原因之一是細(xì)胞異常增殖和凋亡失衡。我院該項(xiàng)研究的重點(diǎn)放在對(duì)PA、Bclxl和Bak表達(dá)的觀察與分析上,旨在進(jìn)一步探討其發(fā)病機(jī)制,為更好的治療方案提供新的思路。腫瘤的發(fā)生、發(fā)展與細(xì)胞增殖周期調(diào)控密切相關(guān)。PA是DNA復(fù)制所必需的調(diào)節(jié)蛋白,是一種了解細(xì)胞周期在特定時(shí)間細(xì)胞核內(nèi)表達(dá)一定特異抗原的相關(guān)蛋白,其在各種惡性腫瘤中均有過度表達(dá)的報(bào)道[1]。PA的合成和表達(dá)代表著細(xì)胞的增殖狀態(tài),是細(xì)胞處于增殖周期的一個(gè)客觀生