全自動生化分析儀交叉污染解析

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1、全自動生化分析儀交叉污染解析車汝萍方芳（遼寧省大連市第七人民醫(yī)院檢驗科遼寧大連116023）【中圖分類號】R443+.8【文獻標識碼】A【文章編號】1672-5085（2013）12-0142-01隨著科學技術(shù)的不斷發(fā)展，各種全自動生化分析儀相繼出現(xiàn)并廣泛應(yīng)用于臨床實驗室。由于共用吸樣針、試劑針、攪拌棒以及比色杯，當生化儀長期使用致其清洗能力下降、比色杯老化后引起吸附力增加、生化儀內(nèi)污垢的積聚、測試順序安排不當，且常規(guī)清洗不能有效消除交叉污染時，就會增加試劑間化學污染的可能性，引起測定結(jié)果不準確。通過對交叉污染原因的解析，為有效排除交叉污染奠定了

2、基礎(chǔ)。1試劑間化學污染的類型1.1試劑成分的直接污染上一測定試劑中含有下一測定所需要測定的物質(zhì)，直接干擾下一檢測的測定結(jié)果。如：AM丫試劑中含有較高濃度的Ca2+;ALP（IFCC法）、CK（NAC法）、CK-MB（NAC法）、CO2（PEPC法）、AMY（EPS法）、TG等試劑中含有Mg2+;GLU（氧化酶法）、TP、ACP試劑中含有較高濃度的K+;以上試劑的交叉污染就會分別對Ca2+、Mg2+、K+（紫外酶法）的測定結(jié)果造成干擾。1.2試劑成分參與反映上一個試劑中含有的某種試劑成分與下一反應(yīng)所要測定的底物有作用，因而干擾下一反應(yīng)的測定結(jié)果。如

3、：鎂測定試劑的絡(luò)合劑亦能與鐵結(jié)合，影響鐵有鐵絡(luò)合劑的結(jié)合。1.3反應(yīng)進程相同上一試劑所引導(dǎo)的反應(yīng)對下一個項目的反應(yīng)進程帶來間接的干擾，下一項目所測定的是前后兩個項目反應(yīng)的綜合作用結(jié)果。如：當上一個反應(yīng)產(chǎn)物為H2O2時則對以Trinders反應(yīng)產(chǎn)生顏色的測定結(jié)果引起干擾。如UA對CHOL結(jié)果的影響；CHOL對CREA（酶法）測定結(jié)果的影響；GLU（氧化酶法）對CREA測定結(jié)果的影響。1.4影響反應(yīng)條件影響下一項目的反應(yīng)條件如pH等，從而改變反應(yīng)速率。如：直接膽紅素（釩酸鹽氧化法）試劑中含奮表面活性劑的灑石酸鹽緩沖液會影響ALT活性，對測定結(jié)果有負干

4、擾。2試劑間化學污染的判別由于試劑中化學成分非常復(fù)雜，因此需要通過試驗才能發(fā)現(xiàn)試劑交叉污染可能帶來的干擾。一般可以用以下試驗來加以判別：2.1將某一試劑作為樣本進行全套項S測定，觀察各項生化結(jié)果的情況,進而確定發(fā)生試劑交叉污染吋造成直接干擾的項目。2.2—份樣本分成兩份，一份加生理鹽水或其他適當?shù)南♂屢?，另一份加等量的某試劑，同吋測定，觀察結(jié)果的變化，進而確定發(fā)生試劑交叉污染吋造成直接干擾的項0。2.3試劑交叉污染試驗方法（1）交叉污染初試：假設(shè)有3個項目A，B,C,以一混合血清作為標本，按以下順序測試：A,A,A，A,A，B,A,C，A,B,B

5、,B,B,B,C,B,C,C,C,C，C。將至U的結(jié)果分別為：Al,A2,A3,A4,A5,BA-B,AB-A,CA-C,AC-A,BI,B2,B3,B4,B5,CB-C,BC-B,C1,C2,C3,C4,C5（AB-A：表示B項0對A項目污染吋A項0的測定值，其余表示類同）。以A2?A5、B2?B5、C2?C5的4次測定平均值分別作為A、B、C項目無污染時的測定值。若（AB-A/A×100%）<95%或>105%則強烈支持B試劑對A有交叉污染。（2）疑似污染確認：若上述初試驗結(jié)果B對A有污染，則可進行以下試驗進行確認，測

6、定順序為：B人A,A,結(jié)果為：B，Al，A2,A3。若（Al/A3×100%）<95%或>105%，則強烈支持B對A有交叉污染。Al→A3的結(jié)果可觀察受B污染的程度是否逐漸減輕。3消除試劑間化學污染的方法3.1要求檢驗人員對儀器工作流程、試劑組成、測定原理要了如指掌，對試劑交叉污染的各種可能性加以考慮，合理設(shè)計程序。更換試劑吋應(yīng)仔細研究說明書，發(fā)現(xiàn)和避免可能存在的試劑交叉污染。3.2當發(fā)現(xiàn)冇交叉污染時，應(yīng)對儀器進行保養(yǎng)，如更換比色杯、管道，用無水乙醇擦洗試劑針和攪拌棒，檢查清洗裝置及效果等。3.3合理安排檢測項B

7、的順序，在有交叉污染的檢測項B中間插入一個或兩個非污染項目。最徹底的做法則是將被干擾項0置于干擾項0之前，以消除干擾發(fā)生的可能。由于各個感廠商試劑盒原理不同，內(nèi)含成分不同，故無固定的測定順序格式，需要自己摸索。一般檢測順序有以下原則：（1）不受上一試劑的干擾；（2）不影響下一試劑測定；（3）不影響測試速度；（4）充分運用剩余試劑位開展新項0;（5）利用好儀器的功能。3.4當合理設(shè)置測試順序無法消除交叉污染吋，可使用生化儀的試劑針、比色杯清晰程序，對試劑針、比色杯進行2次或多次清洗。用堿性清洗液及酸性清洗液沖洗試劑針可以有效地避免攜帶污染。3.5選

8、用具有抗交叉污染的試劑盒實際工作中，用全自動生化分析儀進行連續(xù)的多個項目的測定，每個反應(yīng)的詳細過程難以探知，特別是比色杯的交叉污染無明顯