實驗設(shè)備及培養(yǎng)條件

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1、（1）掌握組培室的功能布局與設(shè)計要求（2）掌握組培常用的實驗儀器設(shè)備及使用（3）掌握調(diào)控組培的主要環(huán)境條件目的要求：第二章實驗設(shè)備及培養(yǎng)條件第一節(jié)實驗室第二節(jié)設(shè)備和器材第三節(jié)培養(yǎng)條件第二章實驗設(shè)備及培養(yǎng)條件﹡﹡﹡配置室洗滌室接種室培養(yǎng)室觀察室組培實驗室馴化室第一節(jié)組培實驗室培養(yǎng)室培養(yǎng)室培養(yǎng)室門廳走廊準備室觀察室接種室洗滌室配置室案例1：實驗室平面設(shè)計配置室滅菌室觀察室馴化室走　　　廊洗滌室培養(yǎng)室接種室培養(yǎng)室案例2：實驗室構(gòu)成功能：用于玻璃器具的清洗、干燥和貯存；接種材料沖洗。配備：上下水；水槽；　　　塑料筐；干燥箱；　　　晾干架等。1、洗滌室面積：根據(jù)規(guī)模，可與　　　　　配置室合并，一般20

2、m2。2.配置室功能：用于培養(yǎng)基的配制、試管苗出瓶、清洗。配備：藥品柜，天平，工作臺，蒸餾水器，磁力攪拌器，冰箱，電爐或電飯鍋，酸度計，培養(yǎng)箱設(shè)計要求：明亮、通風、潔凈。藥品柜冰箱天　平磁力攪拌器恒溫水浴鍋酸度計電蒸餾水器水處理中心恒溫培養(yǎng)箱電飯鍋電爐人工氣候室功能：完成培養(yǎng)基、接種工具等的高壓滅菌過程。配備：高壓滅菌器或微波爐，烘干箱。3.滅菌室4、接種室功能：用于植物材料的無菌分離、接種　　　和轉(zhuǎn)移培養(yǎng)物。結(jié)構(gòu)：緩沖間+接種室配備：超凈臺，工作臺，擱架，醫(yī)用平車，細菌過濾器、解剖鏡、紫外燈等。面積：一般10－20m2設(shè)計要求:地面平坦無縫、頂棚及墻壁密閉光滑，干爽安靜，清潔明亮，配置橫拉

3、門，門窗嚴密。超凈工作臺電子滅菌器臭氧滅菌機5.培養(yǎng)室配備：培養(yǎng)架邊臺解剖鏡照明設(shè)備定時器空調(diào)器干濕溫度計工作臺除濕機換氣扇面積：根據(jù)規(guī)模定功能：培養(yǎng)植物材料。5.培養(yǎng)室6.觀察室功能：觀察并研究培養(yǎng)材料的生長分化情況及其形態(tài)發(fā)生規(guī)律；檢查培養(yǎng)材料是否脫毒和發(fā)生變異。主要配備：生物顯微鏡，切片機，酶聯(lián)免疫檢測儀，PCR擴增儀等。要求：室內(nèi)清潔、明亮、安靜，設(shè)備先進。7.馴化棚室要求：能夠控溫調(diào)濕、控光通風。面積：據(jù)規(guī)模來定。注：室內(nèi)馴化與設(shè)施下馴化均可。功能：提供組培苗煉苗的環(huán)境。①②7.馴化棚室③第二節(jié)　設(shè)備和器材一、玻璃器皿﹡二、器械用具﹡三、儀器設(shè)備﹡（一）對玻璃器皿要求：1.耐腐蝕；

4、耐高溫、高壓；2.透明度好；3.便于接種。三、玻璃器皿三角瓶：50、100、250、500ml或用250ml罐頭瓶代替。培養(yǎng)皿：6、9、12cm試管：18×180mm或20×200mm量筒：10、50、100、500、1000ml燒杯：50、100、200、500、1000ml容量瓶：100、200、500、1000ml試劑瓶（棕色）：50、100、250、500、1000ml移液管：0.2、0.5、1.0、2、5、10ml微量移液器玻璃棒、酒精燈（二）玻璃器皿的規(guī)格：1、鑷子類：接種、轉(zhuǎn)移材料或分離莖尖用，以100ml三角瓶為培養(yǎng)瓶，可用20cm長。二、器械用具二、器械用具2、剪刀類：醫(yī)用

5、剪刀，剪切割外植體或繼代培養(yǎng)時分離材料。3、解剖刀：切割芽、莖段、愈傷組織等，繼代時分離材料，也可用于微小外植體的接種等。4、解剖針：轉(zhuǎn)移細胞或愈傷組織，微莖尖分離及接種等。二、器械用具5.其它：周轉(zhuǎn)筐搪瓷盤移液管架、玻璃棒、酒精燈、試管架等。一、儀器設(shè)備1、恒溫培養(yǎng)箱2、烘箱3、空調(diào)4、高壓滅菌鍋5、冰箱6、天平7、酸度計8、顯微鏡9、水浴鍋10、蒸餾水器11、磁力攪拌器12、人工氣候室13、搖床轉(zhuǎn)床14、干燥箱15.細菌過濾器第三節(jié)　培養(yǎng)條件1.一般控制在25±2oC。2.植株種類及外植體的不同，其最適溫度也是不同的。如百合20℃；月季25－27℃；番茄28℃。△一、溫度二、光照1.光強

6、★影響外植體細胞的增殖、組織和器官的分化。★有的材料愈傷組織的誘導(dǎo)需光或需暗；★光照強，幼苗生長健壯；光照弱，幼苗生長弱小，容易徒長?！锊煌ㄩL的光對細胞的分裂和器官的分化有影響。2.光質(zhì)②白光促進小花天竺葵愈傷組織的生長，藍光則無作用。如：①紅光促進楊樹愈傷組織的生長，藍光阻礙其生長。3.光照時間根據(jù)植物生物學(xué)特性決定；光照長短對試管內(nèi)花的形成有重要影響；在胡蘿卜組織培養(yǎng)中隨著日照長度的增加，而促進生長。三、濕度1.瓶內(nèi)的濕度：主要受到培養(yǎng)基含水量和封口膜透性的影響。如培養(yǎng)基過硬，則不利于外植體接觸和插入培養(yǎng)基，導(dǎo)致生長遲緩；封口膜過于透氣，也會使瓶內(nèi)濕度下降。2.環(huán)境濕度：過低會使培養(yǎng)基

7、喪失大量水分，滲透勢升高，影響材料對營養(yǎng)物質(zhì)的吸收，也會阻礙外植體的生長。一般為70－80%。三、濕度1.瓶內(nèi)的濕度1.培養(yǎng)基適宜PH值5-6.5，一般為5.8，調(diào)整用0.1M的NaOH和HCl溶液。四、pH值2.ｐH影響培養(yǎng)基的硬度。ｐH＞6.5培養(yǎng)基會變硬；ｐH＜5.0培養(yǎng)基不易凝固。3.滅菌之前，培養(yǎng)基的ｐH要比標準提高0.2－0.3個單位。五、氣體(必要條件)1.培養(yǎng)瓶內(nèi)氧氣的充足與否與封口材料有關(guān)。