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《優(yōu)化酶提取貫葉連翹藥材活性成分工藝》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、優(yōu)化酶提取貫葉連翹藥材活性成分工藝郝鵬飛1，衛(wèi)冰2，劉富崗3，楊云1*（河南中醫(yī)學(xué)院藥學(xué)院，鄭州450008）摘要目的探討貫葉連翹中金絲桃素的酶提取法的最優(yōu)酶及其最佳工藝。方法以高效液相色譜法測定金絲桃素含量為指標(biāo)，在纖維素酶、果膠酶、木聚糖酶、β-葡聚糖酶、復(fù)合酶SPE-007A中篩選出最優(yōu)兩種酶，繼考察這兩種酶復(fù)合后的浸提倍數(shù)、加酶量、pH值、溫度、酶解時(shí)間等因素對(duì)提取工藝的影響，并用正交試驗(yàn)優(yōu)選提取條件，從而得到最佳工藝。結(jié)果最優(yōu)酶為纖維素酶與果膠酶復(fù)合酶，pH4.8、酶用量（纖維素酶/果膠酶）2.0%/2.0%、溫度50℃、酶解時(shí)間6h、酶解液浸提倍數(shù)15倍。結(jié)論該工藝高效、穩(wěn)
2、定，可用于今后對(duì)貫葉連翹的研究。關(guān)鍵詞貫葉連翹；金絲桃素；酶提??；復(fù)合酶OptimizeEnzymeExtractionCraftsActiveComponentsofHypericumperforatumL.Abstract：ObjectiveChoosethebestenzymeandcraftconditionsofHypericinfromHypericumperforatumL..MethodsThecontentofHypericinbyHPLCwasusedbeanindex.ChoosetwoofthebestenzymesinCellulase,Pectinase,X
3、ylanase,Glucanase,β-GlucanaseandEnzyme(SPE-007A).Theninvestigatetheeffectontheircomplexbysolid-liquidratio,enzymedosage,pH,temperatureandtheextractiontime.Selecttheoptimalcraftconditionsbytheorthogonalexperiments.ResultsThetwobestenzymesareCellulaseandPectinase,theoptimumextractionprocessisasfol
4、lows:PH4.8,enzymedosageCellulase-Pectinase:2.0%-2.0%,temperature50℃,extractiontime6h.ConclusionThismethodisefficientandstable.ItcouldbeusedintothefutureresearchofHypericumperforatumL.KEYWORDS：HypericumperforatumL.;Hypericin;enzymeextraction;compoundenzyme貫葉連翹（HypericumPerforatumL.）是藤黃科金絲桃屬多年生草本植
5、物[1]。含有多種化學(xué)成分，主要有苯并二蒽酮類，間苯三酚類，黃酮類，單寧類等[2]。近年來，由于在治療抑郁癥方面療效確切[3],同時(shí)具有抗AIDS等方面作用,所以其開發(fā)應(yīng)用在國際上受到廣泛關(guān)注。其中，金絲桃素被認(rèn)為是貫葉連翹提取物中最具有生物活性的物質(zhì)，具有抗病毒、抗抑郁等作用。國內(nèi)外已完成了金絲桃素抗愛滋病的Ⅱ期臨床試驗(yàn)，治療惡性神經(jīng)膠質(zhì)瘤的臨床研究也在進(jìn)行之中[4]。國際市場上規(guī)定貫葉連翹提取物中金絲桃素的含量不能低于0.3％[5]，但由于貫葉連翹中金絲桃素的含量非常低，以目前常用的高濃度乙醇提取工藝很難取得較高的經(jīng)濟(jì)效益、科研價(jià)值[6]。鑒于此，本研究擬通過現(xiàn)代生物技術(shù)與傳統(tǒng)提取
6、技術(shù)相結(jié)合的方法，考察幾種不同酶對(duì)貫葉連翹藥材中金絲桃素的提取效果，篩選出對(duì)藥材酶解效果較好的酶或酶的復(fù)合物，并對(duì)篩選出的酶進(jìn)行其工藝的優(yōu)化，以此工藝制備金絲桃素，以期獲得良好的效果。1儀器與試藥LC-20AT高效液相色譜儀（日本島津）；LC-20AT紫外-可見檢測器（日本島津）；BS210S型電子天平（北京賽多利斯公司）；METTLERAE240電子分析天平（瑞士）；微型植物試樣粉碎機(jī)（河北省黃驊市新興電器廠）等。6本研究所用貫葉連翹藥材購自陜西渭南，經(jīng)河南中醫(yī)學(xué)院藥學(xué)院董誠明教授鑒定為藤黃科金絲桃屬植物貫葉連翹的地上部分。金絲桃素對(duì)照品（購于？？？批號(hào)？？）；纖維素酶、果膠酶、木聚
7、糖酶、β-葡聚糖酶、復(fù)合酶SPE-007A（夏盛實(shí)業(yè)集團(tuán)有限公司）；甲醇為色譜純（天津四友精細(xì)化學(xué)品有限公司）；雙蒸水；其余所用試劑均為分析純。2方法與結(jié)果2.1金絲桃素的含量測定2.1.1對(duì)照品溶液的制備取金絲桃素對(duì)照品1.04mg，精密稱定，以甲醇溶解定容至5mL，得0.208g·L-1的金絲桃素對(duì)照品甲醇母液。精密吸取對(duì)照品母液0.5mL，加甲醇定容至10mL，得0.0104g·L-1的金絲桃素對(duì)照品溶液2.1.2樣品溶液的制備取貫葉連翹
