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《激光共聚焦顯微鏡操作手冊.doc》由會員上傳分享,免費在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在教育資源-天天文庫。
1、LSM510andLSM510META激光掃描共聚焦顯微鏡簡明操作手冊Release3.5January2005啟動系統(tǒng)共聚焦系統(tǒng)的開關(guān)·將REMOTECONTROL上的System/PC開關(guān)和Components開關(guān)置于ON的位置(圖1)。打開汞燈電源開關(guān)圖1REMOTECONTROL開關(guān)啟動共聚焦軟件LSM510·雙擊計算機桌面上的LSM510圖標(biāo)啟動共聚焦軟件。出現(xiàn)以下窗口(圖3)。圖3LSM510啟動菜單·點擊ScanNewImages按鈕?!c擊StartExpertMode按鈕。出現(xiàn)以下窗口(圖4)。主菜單主菜單工具欄二級工具欄圖4主菜單為采集的圖像建立數(shù)據(jù)庫·點擊主菜單工具欄
2、上的File按鈕。在下一行出現(xiàn)File的二級工具欄(圖5)。圖5File的二級工具欄·點擊New按鈕。出現(xiàn)CreateNewDatabase窗口?!みx擇驅(qū)動器D:?!みx擇文件夾,輸入數(shù)據(jù)庫名,并點擊Creat按鈕。如果需要,建立新文件夾。圖6CreateNewDatabase窗口圖7CreateNewDatabase窗口啟動激光·點擊主菜單工具欄上的Acquire按鈕打開Acquire下的二級工具欄(圖8)。圖8Acquire二級工具欄·點擊Laser按鈕打開LaserControl窗口(圖9)。·通過點擊激光單元的名字選擇需要的激光?!c擊Standby按鈕。·當(dāng)狀態(tài)顯示為Ready,點擊O
3、n按鈕?!と绻麤]有Standby按鈕,則直接點擊On按鈕。圖9LaserControl窗口設(shè)置顯微鏡在直接觀察和激光掃描之間切換通過VIS,TV和LSM按鈕在直接觀察和激光掃描之間切換光路設(shè)置:·點擊VIS按鈕將光路設(shè)置為通過目鏡直接觀察,此時激光切斷?!c擊LSM按鈕將光路設(shè)置為激光掃描,在顯示器屏幕顯示圖像。設(shè)置顯微鏡·點擊VIS按鈕切換到直接觀察?!c擊Micro按鈕打開MicroscopeControl窗口(圖10).選擇物鏡·點擊Objective按鈕(圖10)。·點擊需要使用的物鏡,所選擇的物鏡會自動轉(zhuǎn)入光路。以熒光觀察方式聚焦樣品·把樣品放置在載物臺上,蓋波片要朝向物鏡?!c擊R
4、eflectedLight按鈕,打開汞燈光閘?!c擊Reflector按鈕,根據(jù)樣品所標(biāo)記的熒光染料選擇濾光片?!悠肪劢埂!みx擇需要觀察的視野。圖10MicroscopeControl窗口,如:Axiovert200M圖11MicroscopeControl窗口配置光路和激光·點擊LSM按鈕切換到激光掃描。圖12ConfigurationControl窗口·點擊Config按鈕打開ConfigurationControl窗口(圖12)。在通道模式下配置singletrack光路·點擊ChannelMode按鈕(圖12)?!c擊SingleTrack按鈕(圖12)?!c擊Config按鈕
5、,打開TrackConfigurations窗口(圖14)?!ぴ谙吕斜碇羞x擇與樣品所標(biāo)記的熒光染料相匹配的光路配置,并點擊Apply按鈕。圖14TrackConfigurations窗口掃描圖像·點擊Scan按鈕,打開ScanControl窗口(圖16)。設(shè)置初始掃描參數(shù)并掃描·點擊Mode按鈕·點擊Frame按鈕設(shè)置圖像類型·點擊512按鈕設(shè)置掃描分辨率·點擊Reset按鈕重置變倍和視野中心·點擊Max按鈕設(shè)置掃描速度·點擊12Bit按鈕及?按鈕·選擇Number為1·點擊Channels按鈕·點擊1按鈕圖16ScanControl窗口·點擊Find按鈕優(yōu)化掃描·點擊圖像右側(cè)的Palet
6、te按鈕,選擇RangeIndicator?!c擊Cont按鈕進行連續(xù)掃描?!ふ{(diào)節(jié)DetectorGain,使圖像中僅留少量紅色像素?!ふ{(diào)節(jié)AmplifierOffset,使圖像背景為藍色?!c擊Stop按鈕停止掃描?!c擊圖像右側(cè)的Palette按鈕,選擇NoPalette。·點擊Mode按鈕·點擊1024或2048按鈕設(shè)置較高的掃描分辨率·選擇Number為2或4·點擊Single按鈕,完成較高質(zhì)量的圖像掃描保存圖像·點擊圖像窗口右側(cè)的Save或SaveAs按鈕,打開SaveImageandParameterAs窗口·輸入文件名·點擊OK按鈕關(guān)閉系統(tǒng)·點擊Laser按鈕,選擇所使用的激光,
7、點擊Off按鈕。·點擊File按鈕,再點擊Exit按鈕(圖5)?!りP(guān)閉計算機?!さ群?分鐘左右,至Ar離子激光器的風(fēng)扇停止運轉(zhuǎn)。·將REMOTCONTROL上的Components開關(guān)和System/PC開關(guān)置于OFF(圖1)。·關(guān)閉汞燈電源