脂聯(lián)素mrna在不同程度子癇前期患者中的表達(dá)分析

脂聯(lián)素mrna在不同程度子癇前期患者中的表達(dá)分析

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1、脂聯(lián)素mRNA在不同程度子癇前期患者中的表達(dá)分析[摘要]目的探究脂聯(lián)素mRNA在不同程度子癇前期患者中的表達(dá)水平,探討其在子癇前期中的作用及相關(guān)性。方法研究對(duì)象選取2014年6月?2015年9月我院收治的62例子癇前期患者,其中輕度子癇30例,重度子癇32例,分別設(shè)為輕度組和重度組,選取同期的50例正常妊娠婦女作為對(duì)照組,檢測(cè)各組受檢者胎盤(pán)及外周血中的脂聯(lián)素mRNA水平進(jìn)行對(duì)比分析。結(jié)果重度組患者胎盤(pán)和外周血的脂聯(lián)素mRNA水平分別為(0.39±0.12)和(0.11±0.01),輕度組患者胎盤(pán)和外周血的脂聯(lián)素mRNA水平分別為(0.67±0.15)和(0.46土0.09),對(duì)照組胎盤(pán)和外周

2、血的脂聯(lián)素mRNA水平分別為(0.81±0?23)和(0.50土0.04),重度組患者胎盤(pán)和外周血的脂聯(lián)素mRNA水平顯著高于輕度組和對(duì)照組(P0.05)o結(jié)論脂聯(lián)素的低表達(dá)可能與子癇前期的發(fā)病有所相關(guān),且隨著程度的增加水平顯著降低,這種情況在胎盤(pán)和外周血中均冇體現(xiàn),可能是子癇前期病理生理過(guò)程的重要影響因素。[關(guān)鍵詞]子癇前期;脂聯(lián)素;mRNA;表達(dá)子癇前期是常見(jiàn)的妊娠期疾病之一,是影響孕婦及胎兒健康及生命安全的隱形殺手。目前臨床尚未完全闡明子癇的發(fā)病機(jī)制,有學(xué)者認(rèn)為血管內(nèi)皮細(xì)胞功能紊亂是導(dǎo)致此類(lèi)疾病發(fā)生的主耍原因,血管內(nèi)皮細(xì)胞的炎性反應(yīng)、胰島素抵抗作用和脂肪細(xì)胞脂解都參與了子癇前期的發(fā)牛和

3、發(fā)展。脂聯(lián)素是脂肪細(xì)胞分泌的一種激素蛋白,其水平變化和血管內(nèi)皮細(xì)胞功能有著明顯的相關(guān)性。本研究采用實(shí)時(shí)熒光定量檢驗(yàn)法(RT-PCR)對(duì)不同程度子癇前期患者胎盤(pán)和外周血中的脂聯(lián)素mRNA水平進(jìn)行了測(cè)定,以探究英在子癇前期中的作用及意義,現(xiàn)報(bào)道如下。1資料與方法1.1一般資料研究對(duì)象選取2014年6月?2015年9月我院收治的62例子癇前期患者,診斷符合《婦產(chǎn)科學(xué)》中的相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn),排除原發(fā)性高血壓、甲狀腺功能亢進(jìn)及糖尿病患者,排除輸血史、免疫治療史患者。其中輕度子癇30例,重度子癇32例,分別設(shè)為輕度組和重度組,選取同期的50例止常妊娠婦女作為對(duì)照組。輕度組年齡22?37歲,平均(27.4±2

4、?9)歲,孕周38-42周,平均(39.2±0.6)周;重度組年齡21-37歲,平均(27.6±2.7)歲,孕周38-42周,平均(39?4±0?5)周;對(duì)照組年齡22-39歲,平均(2&1±2.5)歲,孕周38?41周,平均(39.4土0.6)周。三組患者在年齡、孕周等一般資料對(duì)比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。1?2方法1.2.1標(biāo)本采集待胎兒娩出后在無(wú)菌狀態(tài)下取臍根部胎盤(pán)母體面組織1.OOcmxl.Ocmxl.Ocm大小,避開(kāi)出血點(diǎn)及鈣化點(diǎn),用生理鹽水沖洗干凈后干燥,置于液氮中保存待用。且在分娩后第2天清晨取空腹肘靜脈血5mL,于-80°C下保存待用。1.2.2檢驗(yàn)方法取胎盤(pán)組織剪成

5、小塊研碎,加入Trizol試劑ImL研磨勻漿,按照標(biāo)準(zhǔn)RNA提取步驟進(jìn)行操作。取血漿標(biāo)本lmL,進(jìn)行上述步驟操作提取RNA。采用逆轉(zhuǎn)錄試劑盒(PrimcScriptII1stStrandcDNASynthesisKitTaKaRa)分別進(jìn)行cDNA提取,取2uL逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物進(jìn)行擴(kuò)增,嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)步驟進(jìn)行。反應(yīng)體系以3-actin作內(nèi)參照,脂聯(lián)素引物序列為上游5'-AACATGCCCATFCGCqWFAC-3'、下游5'—TCTCCTFCCCCATACACCTG-3',片段大小281bpo反應(yīng)條件:94%條件下5min,94°C條件下30s,72°C條件下lmin,72°C條件下lOmin,共

6、進(jìn)行35個(gè)循環(huán)。PCR反應(yīng)產(chǎn)物取5mL在瓊脂糖凝膠電泳,90V10min,70V20mino在圖像分析系統(tǒng)下觀察并記錄。1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用SPSS19.0進(jìn)行數(shù)據(jù)處理,多組間計(jì)量資料對(duì)比用方差檢驗(yàn),P<0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。2結(jié)果重度組患者胎盤(pán)和外周血的脂聯(lián)素niRNA水平分別為(0?39±0?12)和(0?11±0?01),輕度組患者胎盤(pán)和外周血的脂聯(lián)素mRNA水平分別為(0.67±0,15)和(0.46±0.09),對(duì)照組胎盤(pán)和外周血的脂聯(lián)素mRNA水平分別為(0.81±0.23)和(0.50±0.04),重度組患者胎盤(pán)和外周血的脂聯(lián)素mRNA水平顯著高于輕度組和對(duì)照組。見(jiàn)表1

7、。3討論脂聯(lián)素是由脂肪細(xì)胞分泌的一種激素蛋白,最早由Scherer等發(fā)現(xiàn)并命名。近年來(lái)的研究顯示,脂聯(lián)素具有調(diào)控胰島素、抗動(dòng)脈粥樣硬化和抗炎的作用,是冃前唯一的一個(gè)負(fù)性調(diào)節(jié)脂肪細(xì)胞因子。脂聯(lián)素能夠加速脂肪和葡萄糖的分解,減輕胰島素抵抗癥狀,促進(jìn)肌肉對(duì)脂肪酸的吸收,降低游離脂肪酸的含量。脂聯(lián)素對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞的保護(hù)作用主要是通過(guò)對(duì)炎性介質(zhì)的抑制來(lái)實(shí)現(xiàn)的,有研究表明脂聯(lián)素能夠抑制血管中A型淸道夫受體的表達(dá),并增加血

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