fcargno 2glyaspomeome的合成及其與牛血清白蛋白的相互作用分析

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1、優(yōu)秀畢業(yè)論文碩士學(xué)位論文摘要摘要二茂鐵衍生物具有優(yōu)良的電化學(xué)和生物活性,精氨酸.甘氨酸.天冬氨酸(Arg.Gly-Asp,RGD)三肽,作為一種重要的細(xì)胞識(shí)別位點(diǎn)與信號(hào)啟動(dòng)分子,在許多生命活動(dòng)中發(fā)揮著重要的調(diào)節(jié)功能。將具有抗癌作用的二茂鐵與RGD多肽耦聯(lián),合成一種新的二茂鐵.肽分子Fc.Arg(N02).Gly-Asp(OMe).OMe(簡(jiǎn)稱:Fc.RGD),并研究了它在近生理?xiàng)l件下與生物大分子的相互作用。以二茂鐵,Gly,Asp和Arg為原料,采用液相合成法,以HBTU及HOBt為縮合劑合成了Fc.RGD。優(yōu)化了合成工藝,’目標(biāo)產(chǎn)物的產(chǎn)率為38.7%。并通過UV

2、-Vis、IR、1HNMR、ESI.MS對(duì)其進(jìn)行表征。采用循環(huán)伏安法研究Fc.RGD與牛血清白蛋白(BSA)的相互作用。發(fā)現(xiàn)修飾在金電極上的BSA與Fc.RGD作用后,出現(xiàn)一對(duì)氧化還原峰,可以歸屬為二茂鐵基團(tuán)的電子傳遞過程,這說明Fc—RGD分子與BSA存在相互作用。采用紫外.可見吸收光譜法研究Fc.RGD與BSA相互作用。比較Fc.RGD和BSA作用后體系的吸收光譜和它們各自的吸收光譜,吸收強(qiáng)度增強(qiáng),表明Fc.RGD與BSA之間形成復(fù)合物。采用熒光光譜法研究Fc.RGD與BSA的相互作用。通過熒光猝滅數(shù)據(jù)證明其相互作用為靜態(tài)猝滅過程,反應(yīng)結(jié)合位點(diǎn)數(shù)為0.856,

3、結(jié)合常數(shù)為1.75x103L·mol~;并依據(jù)能量轉(zhuǎn)移理論確定了其與BSA相互作用的最近距離為2.14nm。同時(shí),通過同步熒光實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)發(fā)現(xiàn),由于Fc.RGD與BSA之間的相互作用,BSA中色氨酸殘基所處環(huán)境的極性增加,構(gòu)象發(fā)生了變化。關(guān)鍵詞二茂鐵.多肽,合成,牛血清白蛋白,相互作用精品參考文獻(xiàn)資料優(yōu)秀畢業(yè)論文碩士學(xué)位論文ABSTRACTABSTRACTFerrocene·containingcompoundsholdunexpectedbiologicactivity.Asthecellsrecognizingsite。RGDplaysanimportantrol

4、einbiologicalprocesses.Acompoundofferrocene-peptidewasdesignedforpotentialanti.cancerdrugs.AndtheinteractionbetweenthecompoundandBSAwasalsoinvestigatedbycyclicvoltammetry,UV二Ⅵsibleabsorptionspectrumandfluorescencespectrum.Firstly,theferroceneconjugatesFc·-ArgfN02)--Gly··Asp(OMe)·-OMe(

5、Fc—RGD)wassynthesizedfromferrocene,glysine,arginine,asparticacidbysolutionsynthesis,using船TUandHOBtascouplingagents.ThestructureofthecompoundwascharacterizedbyIR.spectrum.UV_visspectrum.1HNM限andESI.MS.111eoptimizationofsyntheticroutewassuggestedandtheyieldofthetitlecompoundiS38.7%.Sen

6、condly,theinteractionbetweenFc.RGDandBSAwasinvestigatedbycyclicvoltammetry.TheresultshowsthattherewereinteractionbetweenFc.RGDandBSAwhichcausedtheredoxpotentialcomparedwithBSA.Thirdly,theUV-visspectrumwasusedtostudytheinteractionbetweenFc.RGDandBSA.AfterreactedwithFc.RGD.theUVr-visspe

7、ctrumofBSA.theabsorbanceintensityincreased.FluorescencespectrumwasusedtoexploretheinteractionbetweentheFc-RGDandBSAtoo.TheresultsindicatedthattheinteractionisastaticquenchingmechanismwithaconformationalchangeofBSA.Thenumberofbindingsitenandequilibriumconstantare0.856and1.75x10’L·mol~,

8、respe

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