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《甘薯輻射誘變效應及突變體篩選的分析》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關內容在行業(yè)資料-天天文庫。
1、中國農業(yè)大學博士學位論文縮寫詞表縮寫詞英文全稱中譯名2．4。D2，4．dichlorophenoxVaceticacid二氯苯氧乙酸ABAAbscisicacid脫落酸RAPDRandomamplifiedpolymorphicDNA隨機擴增多態(tài)性DNACTABoetvltriethvlammoniumbromide十六烷基三甲基溴化胺EDTAEthvlenediaminetetraaceticacid已二胺四乙酸PCRPolvmerasechainreaction聚合酶鏈式反應EBEtIlidiumbromide溴乙錠SCARSequence
2、charalcterizedamplmedregion序列特征化的擴增區(qū)域TETris-EDTAbu仃erTris．EDTA緩沖液甘薯輻射誘變效應及突變體篩選的研究博士研究生：王玉萍導師：劉慶昌教授摘要l甘薯品種玉豐、高系14號和Kafldaba在生育期內用60coy射線慢照射：(1)對照射后的材料進行莖尖組織培養(yǎng)，通過體細胞胚胎發(fā)生途徑再生出大量植株。將這些再生植株移栽到大田，對輻照后代的形態(tài)特征和經濟特性進行了調查和分析。(結果表明，輻照后代M。v．和M．v2在頂葉形、葉形、頂葉色、葉脈色、脈基色_薯形及薯肉色、產量、干物率、食味、Brix
3、等性狀上發(fā)生了廣泛的變異，并且這些變異是穩(wěn)定遺傳的。獲得了一批薯形、薯肉色、高產量、高干率和高Bfix的同質突變體。(2)對高系14號的薯形及薯肉色突變體進行同工酶和RAPD分析，結果表明，突變體與對照之間存在明顯差異。木2用0～100(毋T射線照射栗子香的胚性懸浮細胞，根據(jù)胚性細胞團的存活率及植株再生情況，確定了栗子香胚性懸浮細胞適宜的T射線輻照劑量為80Gy。獲得了大量再生植株，并從輻照后代中篩選出葉形、薯皮色變異的同質突變體。3本研究以甘薯品種栗子香胚性懸浮細胞為材料，用PEG6000作為離體篩選耐旱性突變體選擇劑，將栗子香胚性懸浮細胞培
4、養(yǎng)在含有o～35％(w～)PEG的液體培養(yǎng)基中(含2．omg幾2，4國)，并結合方差分析法處理數(shù)據(jù)。(結果表明，甘薯耐早性離體篩選的適宜選擇壓為30％PEG。將輻照后1周的栗子香胚性懸浮細胞培養(yǎng)在含30％PEG的液體培養(yǎng)基中(含2．Omg幾2，4一D)，得到抗旱性愈傷組織，形成一批再生植株。獲得的再生植株移栽到田問作耐旱性試驗，長勢優(yōu)于對照的突變系占364％，蔓長變短的系占27o％。用突變體的耐旱系數(shù)、苗期抗旱處理及突變體的保水力等指標來鑒定，結果表明，有33．3％的材料耐旱性顯著優(yōu)于對照。j4用NaCl作為離體篩選耐鹽性突變體選擇劑，栗子香胚
5、性懸浮細胞培養(yǎng)在含o～3％(w／v)Nacl的液體培養(yǎng)基中(含2．omg／L2，4．D)，用統(tǒng)計分析處理數(shù)據(jù)．／結果表明，2％Nacl為甘薯耐鹽性離體篩選的適宜選擇壓。栗子香胚性懸浮細弛輻照后1周(含2omg，L2，4．D)，培養(yǎng)在含2％Nac】的液體培養(yǎng)基中，得到部分抗性愈傷組織，形成一批完整再生植株。將得到的再生植株移栽到鹽堿地中國農業(yè)大學博士學位論文中作耐鹽性試驗，結果表明，耐鹽性植株的存活率高于對照，結薯率也高于對照。15用o～100Gy”C5+和0～200Gy4He2+分別照射栗子香胚性細胞團，對甘薯細胞水平離子束輻射誘變進行了系統(tǒng)的
6、研究。(根據(jù)輻射對細胞團生長的影響和植株再生，確定栗子香胚性細胞團適宜的”C5+和、4He”輻射劑量分別為30～50Gv和50～70Gy。輻照后的培養(yǎng)物經過培養(yǎng)獲得大量再生植株。將獲得的再生植株移栽到大田，對輻照后代的地上部和地下部特征進行調查和分析，結果表明，離子束輻照后代在葉形、薯皮色及單株結薯性等性狀上發(fā)生了變異。心6對高系14號薯肉色(薯形)突變體進行分子檢測。通過I∽PD分析，從60個隨機引物中篩選出2個引物，即B8和B16，擴增出的突變體與對照的產物有明顯差別。(將RAPD擴增產生的多態(tài)性片斷進行克隆、測序，根據(jù)測序結果合成了兩對特
7、異性的SCAR引物，新合成的SCAR引物不包括原有的RAI'D序列，每對SCAR引物都只擴增出一條帶，片斷大小分別為686bp和439bp。與RAPD相比，scAR擴增出的條帶清晰可辨，結果更加可靠。文關鍵詞：甘薯；慢照射；快照射；離子束照射；突變體篩選；分子標記——型塑壁墅塑塹墮燮StudiesontheEf．fectofRadiationandtheSeIectionofthemutantsinSweetpotatoPh．D．candidate：WangYupingSupervisorprofLiuQingchangABSTRACT1Swe
8、etpDtat0cultivarsThmayutal(a，KokeiNo．14andKandaba、Ⅳereplantedinagammafield．
