合浦珠母貝遺傳選育及兩種免疫基因分析

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2、Y1947010上海海洋大學(xué)學(xué)位論文原創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明：我恪守學(xué)術(shù)道德，崇尚嚴(yán)謹(jǐn)學(xué)風(fēng)。所呈交的學(xué)位論文，是本人在導(dǎo)師的指導(dǎo)下，獨(dú)立進(jìn)行研究工作所取得的成果。除文中已經(jīng)明確注明和引用的內(nèi)容外，本論文不包含任何其他個(gè)人或集體●已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的作品及成果的內(nèi)容。論文為本人親自撰寫，我對(duì)所寫的內(nèi)容負(fù)責(zé)，并完全意識(shí)到本聲明的法律結(jié)果由本人承擔(dān)?！?’學(xué)位論文仨者簽名：鰣伽閂期：乞如，年多月，，2FII上海海洋大學(xué)學(xué)

3、位論文版權(quán)使用授權(quán)書學(xué)位論文作者完全了解學(xué)校有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，●同意學(xué)校保留并向國(guó)家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子版，允許論文被查閱或借閱。本人授權(quán)上海海洋大學(xué)可以將本學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行檢索，可以采用影印，縮印或掃描等復(fù)制手段保存和匯編本學(xué)位論文。保密口，在年解密后適用本版權(quán)二}5。靴論姍者學(xué)名：鍬傭壇本學(xué)位論文屬于●ft期：扣年Z月店日J(rèn)冀幣L1簽訓(xùn)名#、p力.，'?上海海洋大學(xué)碩士學(xué)位論文答辯委員會(huì)成員名單姓名工作單位職稱備注●穗怠厶上涵≯毛》蕃文≥存礦￡．主席撇≥土別

4、L／髟∥承報(bào)委員麥【夏￡鱗物彀堋移蝮委員-委員委員委員●委員考瞄L(zhǎng)枷奶于確鋼影鯽巖多、秘書答辯地點(diǎn)南海水產(chǎn)研究所答辯日期2011．6．12●???合浦珠母貝遺傳選育及免疫基因研究摘要●合浦珠母貝(Pinctadafucata)又稱馬氏珠母貝，是世界上培育海水珍珠的豐耍種類之一，在我國(guó)主要分布于廣東、廣西、海南及臺(tái)灣省沿海，我國(guó)合浦珠母貝所產(chǎn)珍珠即為國(guó)際上享譽(yù)盛名的“南珠”。海水珍珠養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)是我國(guó)華南沿海地區(qū)的特色經(jīng)濟(jì)支柱產(chǎn)jlk之一。近年來，南于海區(qū)污染、養(yǎng)殖病害頻發(fā)和種質(zhì)資源衰退，致使養(yǎng)殖合浦珠母貝出現(xiàn)了死產(chǎn)率高

5、、生長(zhǎng)緩慢等現(xiàn)象，造成了巨大的經(jīng)濟(jì)損欠，成為制約海水珍珠養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)可持續(xù)發(fā)展的技術(shù)瓶頸之一。因此，急需開展合浦珠母貝遺傳選育和分子免疫調(diào)控機(jī)制研究，培育具有優(yōu)良性狀的新品種，發(fā)展新的免疫防治策略，促進(jìn)合浦珠母貝養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)的健康發(fā)展。本研究在前期選育的基礎(chǔ)上，以F3代不同殼色品系合浦珠母貝為親本，構(gòu)建了F4代不同殼色選育家系，利用傘同胞家系評(píng)價(jià)了生長(zhǎng)性狀的遺傳力水平；篩選克隆了合浦珠母貝過氧化氫酶(Catalase，PoCAT)和抗菌肽theromacin●(antimicrobialpeptides，PoAP)基岡，研

6、究了其組織表達(dá)和調(diào)控模式，檢測(cè)了重組抗菌肽的抗菌活性，證實(shí)了其對(duì)革蘭氏陰性菌具有強(qiáng)烈的抑菌作用，而對(duì)革蘭氏陽(yáng)性菌無(wú)抑菌作用。具體結(jié)果如下：1、合浦珠母貝殼色家系的建立及生長(zhǎng)性狀的比較采用雌雄單個(gè)配對(duì)，成功建立合浦珠母貝殼色全同胞家系20個(gè)。對(duì)其6個(gè)月齡的生長(zhǎng)性狀進(jìn)行了比較，結(jié)果表明，BSF4．3、RSF4．1、RSF4．2和RSF4．5具有明顯的生長(zhǎng)優(yōu)勢(shì)，可作為進(jìn)一步定向培育生長(zhǎng)快速、個(gè)體大的合浦珠母貝的材料。殼寬系數(shù)的比較發(fā)現(xiàn)，BSF4．3殼寬系數(shù)最大，RSF4．5、WSF4．2、WSF4．3則次之。RSF4—1

7、與RSF4．2相對(duì)較低。對(duì)不同殼色選系生長(zhǎng)比較發(fā)現(xiàn)紅色選系和黑色選系存在明顯的生長(zhǎng)優(yōu)勢(shì)，顯著性大于其他殼色選系。其次為金色選系，而●白色選系的生長(zhǎng)最慢。2、合浦珠母貝幼體生長(zhǎng)性狀的遺傳力及其相關(guān)性分析以海南陵水新村港養(yǎng)殖的金殼(Gp)、黑殼(Bp)、白殼(Wp)和紅殼(Rp)合浦珠母貝不同殼色選育群體為親貝，采用雌雄單個(gè)配對(duì)和人工授精的方法，獲得金殼家系4個(gè)，黑殼家系5個(gè)，白殼和紅殼家系各3個(gè)。分別在受精后5天、15天、???25天和40天，從各個(gè)家系中隨機(jī)取樣50個(gè)幼體，測(cè)量其殼長(zhǎng)及殼高，利用方差分析比較殼色系的

8、牛長(zhǎng)差異。同時(shí)利用非求導(dǎo)約束最大似然法(DF．REML)，對(duì)合浦珠母貝在5、15、25、40日齡下的殼長(zhǎng)和殼高性狀進(jìn)行遺傳參數(shù)的估計(jì)。結(jié)果表明，實(shí)驗(yàn)期間，4種殼色系的平均殼長(zhǎng)和殼高均存在顯著性差異(∥0．05)，40個(gè)同齡下，●白色選系均具有最大殼長(zhǎng)及殼高，金色選系均存在最小殼長(zhǎng)和殼高。5"--40日齡幼體殼高狹義遺傳力估計(jì)值為0．17"-0．23，殼長(zhǎng)狹義遺傳力估計(jì)值為0．12"-0．22。合浦珠母貝幼體不同生長(zhǎng)時(shí)期殼高和殼長(zhǎng)的遺傳相關(guān)和表型相關(guān)均為正相關(guān)，相關(guān)系數(shù)的范圍分別為0．825"--0．989，0．83

9、2一,0．965，表明以殼i苗或殼長(zhǎng)為參數(shù)進(jìn)行選育時(shí)，均可達(dá)到改良生長(zhǎng)性狀的效果。3、合浦珠母貝過氧化氫酶基因特征和表達(dá)分析過氧化氫酶(Catalase)是機(jī)體內(nèi)一類重要的抗氧化酶，能保護(hù)細(xì)胞免受活性氧的破壞，在牛物體抗氧化能力以及免疫防御方面起到重要作用。本文研究了合浦珠母貝過氧化氫酶基因結(jié)構(gòu)特征和在應(yīng)激狀態(tài)下的表達(dá)調(diào)控機(jī)制，合浦珠母貝過氧化氫酶基因PoC