正交試驗(yàn)法優(yōu)選芪膠膏的水提取工藝研究

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1、正交試驗(yàn)法優(yōu)選芪膠膏的水提取工藝研究張燕1,曹陽(yáng)2,黃彬2,向薇1,胡敏1,雷果平2,韓平1(1四川省南充市中心醫(yī)院,2四川省南充市食品藥品檢驗(yàn)所,四川南充637000)摘要目的優(yōu)選芪膠膏中水提取的最佳工藝。方法以黃芪甲苷和水浸出物為考察指標(biāo),采用高效液相色譜-蒸發(fā)光散射檢測(cè)法,以正交設(shè)計(jì)法優(yōu)選芪膠膏水提工藝。結(jié)果優(yōu)選的提取工藝為8倍水,煎煮3次,每次1小時(shí)。結(jié)論采用該工藝提取芪膠膏中黃芪甲苷、收率較高且穩(wěn)定。關(guān)鍵詞正交設(shè)計(jì);黃芪甲苷;高效液相色譜-蒸發(fā)光散射檢測(cè)法;芪膠膏Abatract:Objec

2、tiveTooptimizethewaterextractiontechnologyofQijiaoGao.MethodsInordertoastragalosideandwaterextractsasindex,usingHPLC-ELSDmethodandtheorthogonaldesignoptimizationofextractiontechnologyofQijiaoGao.ResultsTheoptimalwaterextractionprocessofQijiaoGaowasaddin

3、g8tinesamountofwater,decoctingforthreetimes,1houreschtime.ConclusionAstragalosideinthewaterextractionofQijiaoGaoishighandstablebythisestractionprocess.Keywords:orthogonaldesign;astragaloside;HPLC-ELSD;QijiaoGao基金項(xiàng)目:四川省中醫(yī)藥管理局科技立項(xiàng)課題(2010-76)作者簡(jiǎn)介:張燕,學(xué)士,副主任

4、中藥師,從事醫(yī)院中藥學(xué)工作,Tel:0817-2258694,E-mail:zhangyanyongdi@163.com。通訊作者:曹陽(yáng),學(xué)士,副主任中藥師,從事中藥檢驗(yàn)工作,Tel:15298206683,E-mail:896377643@qq.com芪膠膏是我院何進(jìn)主任中醫(yī)師的一個(gè)經(jīng)驗(yàn)方,由黃芪、阿膠、當(dāng)歸等藥組成,具有補(bǔ)氣血,調(diào)陰陽(yáng)。用于氣短、乏力、神疲、面色淡白或萎黃、頭暈眼花、心悸、自汗、懶言、失眠、手足麻木、月經(jīng)延期、量少色淡或閉經(jīng)等癥,氣血兩虛、陰陽(yáng)失調(diào)慢性疲勞綜合征[1]。處方中含有皂

5、苷、氨基酸類(lèi)及黃酮類(lèi)有效成分。君藥黃芪含有三萜皂苷、黃酮類(lèi)、多糖類(lèi)、氨基酸和微量元素等多種成分,但其主要成分黃芪甲苷活性較強(qiáng),易溶于水、甲醇、乙醇、丙醇[2]。在考證了水煮提取工藝合理性的基礎(chǔ)上,本文以黃芪甲苷含量及水浸出物為指標(biāo),采用正交試驗(yàn)法設(shè)計(jì)篩選出芪膠膏的最佳工藝條件,報(bào)道如下。1、儀器與試藥1.1儀器電子天平:麥多利斯電子天平,CP225D型。高效液相色譜儀:Wates2695-2420。1.2試藥黃芪甲苷(中國(guó)藥品生物制品檢定所),甲醇、乙醇、正丁醇、氨試液均為分析純,乙腈為色譜純,重蒸餾

6、水。2、方法與結(jié)果2.1試驗(yàn)設(shè)計(jì)采用正交試驗(yàn)法,選取加水量,煎煮時(shí)間,煎煮次數(shù)為考察因素,并結(jié)合生產(chǎn)實(shí)際,每個(gè)因素選擇了3個(gè)水平,用L9(34)正交表安排實(shí)驗(yàn),以水浸出物、黃芪甲苷收率為評(píng)價(jià)指標(biāo),篩選最佳工藝條件(收膏率、黃芪甲苷權(quán)重系數(shù)分別為0.5,0.5)。因素水平見(jiàn)表1表1黃芪、黨參、枸杞等水提工藝正交試驗(yàn)因素水平水平A加水量/倍B提取時(shí)間/hC提取次數(shù)/次1611281.52310232.2試驗(yàn)方法2.2.1樣品液的制備按芪膠膏處方稱(chēng)取適量的藥材,按正交表設(shè)計(jì)安排的方案加水煎煮,得煎液,濃縮至

7、100mL,得樣品液。2.2.2水浸出物測(cè)定精密吸取樣品液20mL,照《中國(guó)藥典》2010年版一部附錄XA項(xiàng)下方法測(cè)定[3]。2.2.3黃芪甲苷含量測(cè)定2.2.3.1色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)色譜柱:WatersSymmetryShieldTMRP185μm4.6×250mmcolumn(PartNO:186000112)流動(dòng)相:乙腈:水(34:66);柱溫:40℃;流速:1.0;漂移管溫度:60℃:載氣壓力:30psi;進(jìn)樣量:10μL。在此條件下,色譜圖見(jiàn)下圖1。圖1:黃芪甲苷的含量測(cè)定HPLC-E

8、LSDA.樣品;B.黃芪陰性C.黃芪甲苷對(duì)照品;1.黃芪甲苷2.2.3.2溶液制備供試品溶液的制備:將煎煮液濃縮并定容為100mL,精密量取25mL,置分液漏斗中,用水飽和正丁醇提取4次,第一次40mL,第二、三、四次各30mL,合并正丁醇提取液,用氨試液洗滌2次,每次30mL,棄去氨液,回收正丁醇液蒸干,殘?jiān)?mL水溶解,通過(guò)D101型大孔吸附樹(shù)脂,用水50mL洗脫,棄去水液,再用40%乙醇30mL洗脫,棄去洗脫液,繼用70%乙醇80mL洗脫,收集洗

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