綠茶提取物及表沒食子兒茶素沒食子酸酯對免疫細(xì)胞的作用研究

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1、從本學(xué)科出發(fā)，應(yīng)著重選對國民經(jīng)濟具有一定實用價值和理論意義的課題。課題具有先進性，便于研究生提出新見解，特別是博士生必須有創(chuàng)新性的成果綠茶提取物及表沒食子兒茶素沒食子酸酯對免疫細(xì)胞的作用研究作者：張鳳，楊桂文，張福淼，趙靜，崔英杰，安利國【摘要】　　目的研究綠茶提取物和表沒食子兒茶素沒食子酸酯對脾臟細(xì)胞增殖和巨噬細(xì)胞NO分泌的影響。方法采用MTT法檢測脾臟細(xì)胞增殖變化，用Griess試劑法檢測NO產(chǎn)量的變化。結(jié)果綠茶提取物和EGCG都能夠促進脾臟細(xì)胞增殖，并能夠協(xié)同conA刺激脾臟細(xì)胞的增殖；還能夠抑制LPS激活的巨噬細(xì)胞的NO產(chǎn)量。結(jié)論綠

2、茶提取物和EGCG具有免疫調(diào)節(jié)和減輕炎癥反應(yīng)的有益作用?！娟P(guān)鍵詞】綠茶表沒食子兒茶素沒食子酸酯免疫細(xì)胞Abstract：ObjectiveTostudytheeffectofgreenteaextractandEpigallocatechingallateonspleencellproliferationandmacrophageNOassaywasusedtodetectspleencellproliferationchangeandGriessreagentmethodwasusedtodetectmacrophageNOsecreti

3、on.ResultsGreenteaextractandEGCGcouldpromotespleencellproliferationandbeabletocooperatewithconAtostimulatespleencellcouldalsoinhibitLPS-activatedmacrophagesteaextract課題份量和難易程度要恰當(dāng)，博士生能在二年內(nèi)作出結(jié)果，碩士生能在一年內(nèi)作出結(jié)果，特別是對實驗條件等要有恰當(dāng)?shù)墓烙?。從本學(xué)科出發(fā)，應(yīng)著重選對國民經(jīng)濟具有一定實用價值和理論意義的課題。課題具有先進性，便于研究生提出新見解

4、，特別是博士生必須有創(chuàng)新性的成果andEGCGhaveimmunoregulativeeffectandcanalleviateinflammatoryreaction.Keywords：Greentea;EGCG;Immunecells　　現(xiàn)代研究表明綠茶具有抗氧化、抗癌和防癌、降血糖、抑菌和抗病毒等生物學(xué)活性［1～5］。在人們?nèi)找孀⒅乇＝○B(yǎng)生的今天，綠茶的系列生物學(xué)活性無疑也成為研究的熱點。本實驗選用山東日照綠茶為材料，用70％乙醇法抽提得到綠茶提取物，研究其對免疫細(xì)胞的作用?！?器材　　昆明種小鼠。EGCG；綠茶提取物；RPMI164

5、0干粉；小牛血清；噻唑藍；青霉素、鏈霉素；ConA；LPS；DMR顯微鏡；MCO-17AC二氧化碳培養(yǎng)箱。　　紅細(xì)胞裂解液：NHCl.2g，KHCO1g，。將以上試劑溶解于800ml三蒸水，充分?jǐn)嚢枞芙饣靹蚝?，?N的鹽酸調(diào)pH值至～，加水補足到1000ml。過濾除菌，4℃保存?zhèn)溆?。　　Griess試劑：A液：對氨基苯磺酰胺，10％醋酸150ml；B液：α－萘胺g，三蒸水20ml，10％醋酸150ml，冰箱中保存，使用前A液B液等體積混合。課題份量和難易程度要恰當(dāng)，博士生能在二年內(nèi)作出結(jié)果，碩士生能在一年內(nèi)作出結(jié)果，特別是對實驗條件等要有恰

6、當(dāng)?shù)墓烙?。從本學(xué)科出發(fā)，應(yīng)著重選對國民經(jīng)濟具有一定實用價值和理論意義的課題。課題具有先進性，便于研究生提出新見解，特別是博士生必須有創(chuàng)新性的成果方法.1MTT法測定小鼠脾臟細(xì)胞的增殖取實驗小鼠，脫頸處死。無菌條件下取出脾臟，剪碎，200目尼龍網(wǎng)過濾。收集的細(xì)胞以無血清RPMI1640培養(yǎng)液洗滌兩遍，收集后加紅細(xì)胞裂解液，中止裂解后收集細(xì)胞，以無血清RPMI1640培養(yǎng)液洗滌兩遍，重懸細(xì)胞于RPMI1640培養(yǎng)液中。調(diào)整脾臟細(xì)胞濃度為，置于96孔板中，綠茶提取物或EGCG作用4h及綠茶提取物或EGCG與ConA共作用4h。實驗終止前h每孔加M

7、TT(mg/ml)0μl，離心，棄上清液中止反應(yīng)，每孔加150μl二甲基亞砜，輕輕搖動30min溶解紫色結(jié)晶，490nm波長酶標(biāo)儀比色?！　I=ConA刺激后A值/未加刺激A值.2Griess’S法測定巨噬細(xì)胞產(chǎn)量NO的定量可通過測定NO2-和NO3-的總和來實現(xiàn)，根據(jù)這一原理，應(yīng)用Griess’S試劑來定量檢測NO水平。巨噬細(xì)胞培養(yǎng)上清與Griess’S試劑室溫下反應(yīng)10min，于490nm處檢測吸光值。結(jié)果.1MTT法測定小鼠脾臟細(xì)胞的增殖.課題份量和難易程度要恰當(dāng)，博士生能在二年內(nèi)作出結(jié)果，碩士生能在一年內(nèi)作出結(jié)果，特別是對實驗條件

8、等要有恰當(dāng)?shù)墓烙嫛谋緦W(xué)科出發(fā)，應(yīng)著重選對國民經(jīng)濟具有一定實用價值和理論意義的課題。課題具有先進性，便于研究生提出新見解，特別是博士生必須有創(chuàng)新性的成果綠茶提取物對小鼠脾臟細(xì)胞增