《GBT186 40-2002-家畜日本血吸蟲病診斷技術(shù)》.pdf

《《GBT186 40-2002-家畜日本血吸蟲病診斷技術(shù)》.pdf》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫(kù)。

1、ce/T18640--2002前臺(tái)日本血吸蟲病(schistosomoiasisJaponicum)是牛、馬、豬、羊、犬、貓等幾十種哺乳動(dòng)物和人的一種共患寄生蟲病，流行于亞洲部分國(guó)家，在我國(guó)發(fā)生于淮河以南有釘螺生長(zhǎng)的地區(qū)，是人的主要寄生蟲病之一，家畜中主要發(fā)生于牛，其次是豬、羊。本病的病原是kI本分體吸蟲(schistosomaJaponicum)，亦稱日本血吸蟲，簡(jiǎn)稱血吸蟲。診斷本病的方法有檢查糞便中蟲卵、糞便毛坳孵化、環(huán)卵沉淀試驗(yàn)、間接血凝試驗(yàn)、乳膠凝集試驗(yàn)、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)、斑點(diǎn)酶標(biāo)記等。改進(jìn)的糞便毛蝴孵化法和間接血凝試驗(yàn)可作為該病首選檢疫技術(shù)。前者是病原檢查諸法中檢出率較高的方法，后者

2、屬血清學(xué)診斷，操作簡(jiǎn)便、省時(shí)、敏感性高、結(jié)果判定容易。兩法均可用于家畜血吸蟲病檢疫、診斷和流行病學(xué)調(diào)查。后者還可用于血吸蟲病基本消滅和消滅地區(qū)的監(jiān)測(cè)。本標(biāo)準(zhǔn)由中華人民共和國(guó)農(nóng)業(yè)部提出。本標(biāo)準(zhǔn)山全國(guó)動(dòng)物檢疫標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)歸faa本標(biāo)準(zhǔn)起草單位:中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院上海家畜寄生蟲病研究所。本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人:沈杰、錢承貴。中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)家畜日本血吸蟲病診斷技術(shù)Gs/T18640-2002DiagnostictechniquesfordomesticanimalsschistosomoiasisJaponicum1范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了糞便毛黝孵化法和間接血凝試驗(yàn)技術(shù)。本標(biāo)準(zhǔn)適用于家畜日本血吸蟲病的診斷

3、、檢疫、流行病學(xué)調(diào)查，間接血凝試驗(yàn)還可用于基本消滅和消滅地區(qū)血吸蟲病的監(jiān)測(cè)。2糞便毛蝴孵化法2.1材料準(zhǔn)備21.1水pH值6.8-7.2，無(wú)水蟲和化學(xué)物質(zhì)污染(包括氯氣)的澄清水，否則需先分別作如下處理。2.1.1.1有氯氣的自來(lái)水應(yīng)在盛具中存放8h以上2.1.1.2河水、池水、井水、雨水等混有水蟲的水加溫至60C，冷后再用?；蛟诿?萬(wàn)ml水中加含30%有效氯漂白粉。.35g，攪勻，存放20h，待氯氣逸盡;也可在放漂白粉后加人硫代硫酸鈉。.2g-0.4g脫氯,0.5h后用2.1.1.3對(duì)渾濁的水，于每5萬(wàn)ml，水中加明礬3g=5g，充分?jǐn)嚢璐吻搴笥谩?.1.2器材、試劑:竹筷、40-80孔

4、的銅篩濾杯、260孔的尼龍篩兜、500mI量杯、糞桶、放大鏡、顯微鏡、吸管、載玻片、蓋玻片、爐、水溫計(jì)、盆、水缸、水桶、剪刀、鬧鐘、天平、200ml,-250ml,角燒瓶、500mi.一1。。。ml長(zhǎng)頸平底燒瓶、脫脂棉、食鹽2.1.3送糞卜:包括村名、組名、飼養(yǎng)員或畜主姓名、畜別、畜名或畜號(hào)、性別、年齡、有無(wú)孕、采糞日期。2.1.4孵育室(箱)。室溫低于20C時(shí)需有保持20C-z5C的環(huán)境條件，如溫箱或有取暖設(shè)備的房間。2.2操作方法2.2.1采糞和送檢:采糞季節(jié)宜于春、秋兩季，其次是夏季，不宜于冬季。采糞時(shí)間最好于清晨從家畜直腸中采取，或新排出的糞便。采糞量:牛、馬糞200g，豬糞100g，

5、羊和狗糞(農(nóng)家)40g。每份糞樣需附上填好的送糞卡，于采糞當(dāng)天送到檢驗(yàn)室2.2.2洗糞和孵化:將每頭家畜的糞便分三份，每份糞量牛、馬50g,豬20g，羊、犬10g。然后根據(jù)實(shí)際情況選用下列一種方法進(jìn)一步操作2.22.1尼龍篩淘洗孵化(25C)后，放在銅篩中淘洗，棄去濾杯，濾液倒人尼龍篩兜中用水淘洗干凈，最后將洗糞渣倒人三角燒瓶或平底長(zhǎng)頸燒瓶中加滿25亡左右清水。為便于觀察毛蜘，在瓶頸下二分之一處加一塊2cm-3cm厚的脫脂棉，再加滿水。2.2.2.2塑料杯頂管孵化:置糞于銅篩濾杯中，在盛滿水的特別塑料杯內(nèi)充分淘洗后，棄去濾杯，沉淀30min，倒去三分之二，加25C水，蓋r_中間有孔的塑料杯蓋，

6、再加滿水，再將盛滿水的試管n塞一塊2cm-3cm厚的脫脂棉，倒插人塑料杯的孔中。2.2-2.3直孵:將糞置于量杯中加少量水?dāng)噭?，再加滿水，沉淀30min左4i，倒去三分之一至二分之一，余一F的糞水倒人平底長(zhǎng)頸燒瓶中，加水至瓶頸下三分之一處，加人2cm^3cm脫脂棉球，再加滿孵中華人民共和國(guó)國(guó)家質(zhì)，監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局2002一02-19批準(zhǔn)2002-05-01實(shí)施Gs/'r18640-2002化用水2.2.3孵育:將裝好的三角燒瓶(平底長(zhǎng)頸燒瓶或塑料杯)放于20C--26C箱(室)中，在有一定光線的條件卜進(jìn)行孵育。2.2.4判定:從孵育開始到Ih,3h,5h后各觀察一次，每個(gè)樣品每次觀察應(yīng)在2mi

7、n以r.。發(fā)現(xiàn)血吸蟲毛蜘即判為陽(yáng)性。血吸蟲毛蝴眼觀為針尖大小，灰白色、梭形，折光強(qiáng)，和水中其它小蟲不同處是近水面作水平或斜向直線運(yùn)動(dòng)。當(dāng)用肉眼觀察難與水中的其它小蟲相區(qū)別時(shí)，可用滴管將蟲吸出置顯微鏡下觀察，顯微鏡下可見毛坳前部寬，中間有個(gè)頂突，兩側(cè)對(duì)稱，后漸窄，周身有纖毛。在一個(gè)樣品中有1一5個(gè)毛蝴為+,6-10個(gè)毛坳為++，11.20個(gè)毛拗為十++,21個(gè)毛坳以上為++++。3間接血凝試驗(yàn)3.1