《GBT186 42-2002-豬旋毛蟲病診斷技術》.pdf

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1、GBiT186422002前言旋毛蟲病(trichinello.sisinswine)是種危害很大的人獸共患寄生蟲病它不僅給畜牧業(yè)和肉品工業(yè)造成嚴取的經(jīng)濟損失,而且對人類健康也構成嚴重威脅本病病原為旋毛蟲是英thl學者JamesPanesPaget1835年首次于倫敦一尸體「}’發(fā)現(xiàn),同年()wen定名為:irlchinellaspirali,簡稱旋毛蟲后來證實,由此蟲引起的旋毛蟲病是一種世界分布的人獸共患寄性蟲病,可感染人和150多種哺乳動物,目前全世界都有本病的發(fā)生。本病的診斷方法L要有兩類。

2、一是病原學診斷,包括直接采集肌肉進行目檢、壓片鏡檢和集樣消化;另一類是血清學診斷,包括皮內(nèi)反應、補體結合反應、對流免疫電泳、膠乳凝集試驗、間接熒光抗體、皂L絮凝試驗、間接血凝試驗、環(huán)蝴沉淀試驗、酶聯(lián)免疫吸附試驗(EI,ISA)等為i'保iiE((}1,華人lti共#I1L*1動物防疫法》的實施,結合世界動物衛(wèi)生組織[WorldOrganizationfor八;tintal1。山h(英),OfficeIntentionaldesEpizootic(法),()IF]編寫的該病檢疫方法,特制定本標準本標

3、準規(guī)定旋毛蟲壓片鏡檢、集樣消化兩種方法。主要用于感染旋毛蟲豬的定性。上述方法具有操作簡便,快速根據(jù)不h1情況可作為產(chǎn)地、屠宰加I_和流行病學調(diào)查以及進出[f1豬和豬肉的檢疫本標準的附錄八、附錄H都是標準的附錄本標準由『},華人民共和國農(nóng)業(yè)部提出本標準由全國動物檢疫標準化技術委員會歸日〕本標準起草單位:中國人民解放軍農(nóng)牧大學。本標準L要起草人:徐克成、閻丘河、鄭明光、周志江中華人民共和國國家標準GBIT1$642-2002豬旋毛蟲病診斷技術Diagnostictechniquesfortrichin

4、ellaspiralisinswine1范圍本標準規(guī)定r旋乙蟲壓片鏡檢、集樣消化等診斷技術本標準適用少產(chǎn)地檢疫、屠宰加工、流行病學調(diào)查和進出口豬及豬肉的檢疫2壓片鏡檢法2門實驗材料2.1.1甘油透明液、鹽酸溶液、美藍溶液〔見附錄A(標準的附錄)〕21.2儀器:U微鏡2.2操作方法2.2.1新鮮肉檢驗2.2.1.1采樣自胭體兩側的橫捅膜肌腳部各采樣一塊,記為一份肉樣,其質(zhì)量不少于50g^100g,與胭體編成相同號碼如果足部分tlfal體.剛從肋間肌、腰肌、咬肌、舌肌等處采樣2.2.1.211檢撕去H

5、en肌的肌膜.將114肌肉纏在檢驗者左手食指第一指節(jié)仁,使肌纖維垂直于要指伸展方向,再將左手握成半握拳式,借助f拇指的第一節(jié)和中指的第二節(jié)將肉塊固定在食指上面,隨即使左手7心轉(zhuǎn)向檢驗者,右手拇指撥動肌纖維,在充足的光線下,仔細視檢肉樣的表面有無針尖大半透明乳白色或灰白色隆起的小點。檢完一面后再將隔肌翻轉(zhuǎn),用同樣方法檢驗幅肌的另,面。凡發(fā)現(xiàn)上述小點可懷疑為蟲體2.2.1.3壓片可按下述方法制備壓片:a)放置夾壓玻片:將旋毛蟲夾壓玻片放在檢驗臺的邊沿,靠近檢驗者;b)剪取小肉樣:用剪刀順肌纖維方向,按

6、隨機采樣的要求,自肉上剪取燕麥粒大小的肉樣24粒,使肉粒均勻地在玻片_}_排成一排(或用載玻片,每片12粒);。)壓片:將另一夾壓片重迭在放有肉粒的夾壓片上并旋動螺絲,使肉粒壓成薄片2.2.14鏡檢將制好的壓片放在低倍顯微鏡下,從壓片一端的邊沿開始觀察,直到另一端為止。2.2.1.5判定標準鏡檢判定標準如下)沒有形成包囊期的旋毛蟲:在肌纖維之間呈直桿狀或逐漸蜷曲狀態(tài),或蟲體被擠f壓出的肌漿.},_b)包囊形成期的旋毛蟲:在淡薔薇色背景士_,可看到發(fā)光透明的圓形或橢圓形物,崔中央是蜷曲的蟲體。成熟的

7、包雀位于相鄰肌細胞所形成的梭形肌腔內(nèi)。中華人民共和國國家質(zhì)t監(jiān)督檢驗檢疫總局2002-02一19批準2002一05一01實施GB/'r18642--2002c)鈣化的旋毛蟲:在包囊內(nèi)可見數(shù)量不等、濃淡不均的黑色鈣化物,或可見到模糊不清的蟲體,此時啟開壓玻片,向肉片稍加10寫的鹽酸溶液,待Imin-2min后,再行觀察。d)機化的旋毛蟲:此時壓玻片啟開平放桌上,滴加數(shù)滴甘油透明劑于肉片上,待肉片變得透明時,再覆蓋夾if玻片,置低倍鏡下觀察,蟲體被肉芽組織包圍、變大,形成紡錘形、橢圓形或圓形的肉芽腫。

8、被包圍的蟲體結構完整或破碎,乃至完全消失。2.2.2凍肉的檢驗2.2.2.1凍肉的檢驗同2.2.102.2.2.2凍肉的染色方法如下:)壓片:同2.2.1.3b)染色在肉片]_滴加1.2滴美藍或鹽酸水溶液。浸漬1min,蓋上夾壓玻片c)鏡檢:美藍染色法:肌纖維呈淡青色,脂肪組織不著染或周圍具淡薔薇色。旋毛蟲包囊呈淡紫色、薔薇色或藍色。蟲體完全不著染。鹽酸透明法:肌纖維呈淡灰色且透明,包囊膨大具有明顯輪廓,蟲體清楚3集樣消化法3.1實驗材料3.1.1消化液:配制方法見附錄13(標準的

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