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《骨髓源性內(nèi)皮祖細(xì)胞移植在肝纖維化大鼠肝內(nèi)的示蹤-研究》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫(kù)。
1、withliverfibrosisinvitro．ThePKH26-1abeledcellsmaymigratetothelivervascularanddifferentiateintomatureendothelialcells．KEYWORDS：endothelialprogenitorcells，celltransplantation，PKH26，tracing，liverfibrosis目錄中文摘要?????????????????????．．1英文摘要?????????????????????．．III引言???????
2、????????????????1第一章肝纖維化大鼠骨髓源性EPCs的培養(yǎng)及鑒定??????????3l材料與方法???????????????????．31．1材料???????????????????．．31．2方法???????????????????．．42結(jié)果?????????????????????．62．1肝纖維化大鼠模型的建立?????????????．．62．2EPCs的細(xì)胞形態(tài)????????????????．72．3EPCs的細(xì)胞表型和純度??????????????．72．4EPCs的功能??????????
3、???????．．83討{念?????????????????????10第二章EPCs移植在肝纖維化大鼠肝內(nèi)的示蹤研究??????????13l材料與方法???????????????????131．1材料???????????????????．131．2方法???????????????????．152結(jié)果?????????????．．，．．=．??????162．1PKtl26標(biāo)記EPCs的熒光染色及標(biāo)記率??????????162．2PKH26標(biāo)記EPCs的細(xì)胞動(dòng)力學(xué)????????????172．3PKH26標(biāo)記的EPCs
4、在肝臟巾的定位及細(xì)胞表型表達(dá)??????183討論?????????????????????20結(jié)論??????????????????????．．24參考文獻(xiàn)?????????????????????．．25綜述??????????????????????．27參考文獻(xiàn)?????????????????????．．35致訪}??????????????????????．39攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文目錄??????????????．41V引i了引言肘纖維化是各種慢性Bl‘桶演，叟成H1。硬化的必經(jīng)階段，由于≥￡在功能性肘細(xì)胞相對(duì)減
5、少的同時(shí)，存在細(xì)胞外基質(zhì)(extracellularmatrix，ECM)的過(guò)度沉積，從而導(dǎo)致肝變狀隙的縮窄、肝小血管的閉塞，故設(shè)法補(bǔ)充并促進(jìn)其肝內(nèi)血管新生已成為近年來(lái)研究的熱點(diǎn)。細(xì)胞移植因其具自．來(lái)源，“泛、創(chuàng)傷性小、可以暈復(fù)進(jìn)行等優(yōu)點(diǎn)而越來(lái)越受到關(guān)注。其中骨髓來(lái)源的干細(xì)胞岡為其容易采集、能自我更新、并向多種類型細(xì)胞分化、且不涉及倫理道德問(wèn)題等優(yōu)勢(shì)被認(rèn)為足當(dāng)Ij，『最具有治療潛力的供體細(xì)胞。然而目前大多數(shù)學(xué)者均藎丁健康骨髓或外周血中去扶得內(nèi)皮祖細(xì)胞(endothelialprogenitorcells，EPCs)，從疾病個(gè)體能否獲
6、得iF常EPCs的研究甚少，從靦限制了自體細(xì)胞移植的臨床應(yīng)用。從肝纖維化大鼠骨髓中提取flj經(jīng)過(guò)體內(nèi)病理環(huán)境的“篩選”作川后的EPCs，其更能適應(yīng)所處的H『臟病理性內(nèi)環(huán)境，增強(qiáng)細(xì)胞的適應(yīng)性，提高作用效能。然而，存研究EPCs移植是否有益于肝纖維化的逆轉(zhuǎn)之前，我們必須證實(shí)EPCs移植入體內(nèi)后，能否種植于肝臟，能行聚集于血管，能否向ECs分化。那么，如何去了解EPCs在肝纖維化肝臟內(nèi)的遷移和分化情況呢?設(shè)想應(yīng)用紅色熒光標(biāo)記物PKH26去示蹤EPCs，以了解其在肝臟的遷移、種植、分布和轉(zhuǎn)化情況。很多研究jS環(huán)，PKH26標(biāo)記后4i影響細(xì)胞
7、的增殖和活力，隨細(xì)胞分裂，標(biāo)記物幾乎等份分配給兩個(gè)子細(xì)胞，是目前理想的細(xì)胞移植的常用上具。應(yīng)用四氯化碳(carbontetrachloride，CCl4)建立大鼠肝纖維化模型是目前最經(jīng)典、成熟的造模方法，屬于導(dǎo)致肝纖維化的多種病兇中的其中一種病兇，即毒物誘導(dǎo)型肝纖維化。而CCL4注射是否對(duì)骨髓細(xì)胞有影響，各種不剛的病凼導(dǎo)致的肝纖維化是否能從其骨髓中分選培養(yǎng)出正常的EPCs，我們還沒(méi)有做此方面的研究。我們將在以后的研究中對(duì)此問(wèn)題給以關(guān)注，比如建立多種大鼠肝纖維化模型，如膽汁淤積型、免疫血清型肝纖維化模型(后一種目前認(rèn)為與臨床上乙肝后肝
8、纖維化機(jī)制類似)等，探討從多種病因?qū)е碌母卫w維化人鼠骨髑中能否獲得正常EPCs。小研究得糾II．1家自然科學(xué)娘金‘30900598)的資助骨髓源性內(nèi)皮稠細(xì)胞移植在肝寶f維化大鼠耵內(nèi)的爪蹤研究總之，我們擬應(yīng)用四氯化碳CCI。皮卜．注射建
