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《黃瓜f基因的srap分子標(biāo)記》由會員上傳分享,免費在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、西南農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論立摘璺黃瓜,基因的SRAP分子標(biāo)記碩士研究生:郭素英指導(dǎo)教師:張興國研究員(西南農(nóng)業(yè)大學(xué)園藝園林學(xué)院,重慶市蔬菜學(xué)重點實驗室,重慶400716)摘要黃瓜(CHcumissativusL.)啄產(chǎn)子印度jt部、喜馬控雅dj脈的庫曼鋦金一帶,后被引種到世界各地,于公元二世紀(jì)從中亞傳入我國16J。黃瓜是一種喜溫暖,不耐寒冷的一年生蔓性草本植物,以幼嫩的果實供食.其營養(yǎng)豐富15I。隨著設(shè)施園藝的發(fā)展,對全雌性黃瓜品種的需求日益增加。性別分化是植物個體發(fā)育的重要階段,其分化機理的闡明不僅在發(fā)育生物學(xué)中具有重要的理論意義,而且具有極為重要的實用價值【lOl。雌花發(fā)生的
2、早晚及其分布狀態(tài),即性型表現(xiàn),與黃瓜成熟早晚,產(chǎn)量和品質(zhì)等有密切的關(guān)系。由于種類和品種的不同,以及易受環(huán)境條件的影響,黃瓜在性別表現(xiàn)方面有顯著的差異,因此.在目前季節(jié)栽培已經(jīng)高度分化的情況下,控制性別表現(xiàn),便具有重要的意義。遺傳標(biāo)記.尤其是近年來快速發(fā)展起來的蛋白質(zhì)和分子標(biāo)記技術(shù),在植物的機理研究中起著越來越重要的作用001.黃瓜全雌性品系在簡化雜交制種,降低制種成本,提高產(chǎn)量等方面均具有重要的作用。,基因部分顯性??刂拼菩园l(fā)育,與全雌性連鎖的分子標(biāo)記輔助育種將加速全雉品系的獲得.對黃瓜基因進行研究,可為進一步的分子育種打下基礎(chǔ),但由于種內(nèi)資源的有限,利用基因工程將是今后黃瓜
3、品種改良重組遠(yuǎn)緣有用基因的有效手段。一、黃瓜性別分化的遺傳分析由基因型為FFMMAA的純雌株母本與基因型為明協(xié)加的純雄株父本雜交得到Fl代,F(xiàn)1代經(jīng)自交得到F2代,F(xiàn)2代種植225抹。對植株主莖上前25個節(jié)位進行雌雄花數(shù)統(tǒng)計,根據(jù)每株雌雄花數(shù)比例,雌雄花數(shù)比例小F10%的定為強雄株,雌花數(shù)是雄花數(shù)lO倍以上的定為強雌株,25節(jié)位上都是雌花為純雌株,都是雄花的為純雄株,其余的定為雌雄同株。得到強西南農(nóng)業(yè)太學(xué)碩士學(xué)位論文摘要雌性植株28個,純雌植株28個,強雄性植株56個,純雄植株4個,雌雄同株109株,將強雌株和純雌株合并為雌性株;強雄株和純雄株臺井為雄性株。雌性株,雌雄同株,
4、雄性株的比例接近于1:2:1。二、黃瓜基因組DNA的提取采用改良的CTAB法,提取基因組DNA,用TE溶解后,經(jīng)1%瓊脂糖凝膠電泳檢測:黃瓜基因組DNA帶型整齊、清晰,大小在23kb左右。經(jīng)紫外分光光度計測定,其濃度滿足實驗的需要。三、基因組DNA池的構(gòu)建將雌性植株與雄性植株提取DNA后,測定其濃度。采用集團分離分析法(bulkedsegregantanlysis,簡稱BSA)在F2分離群體中挑選純雌株和純雄株,按濃度將14株純雌株等量混合,構(gòu)建雌性DNA池;將4株純雄株與3株強雄株等量混合構(gòu)建雄性DNA池-四、SRAP分子標(biāo)記的數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析用62對$RAP擴增引物分別對黃
5、瓜雌性基因組池和雄性基因組池進行PCR擴增,經(jīng)l%瓊脂糖凝膠電泳檢測,其擴增結(jié)果是~條較寬較濃或多條較濃的帶,符臺4%變性聚丙烯酰胺凝膠電泳的要求。經(jīng)過4%變性聚丙烯酰胺凝膠電泳的分離,凝膠的固定、染色、顯色后.共得到3125條帶,平均每對引物擴增出20~30條帶。其中具有差異帶(雌性植株有而雄性沒有的)的引物共有14對。從上述14對引物中選擇其中一對引物對F2代單株進行PCR擴增,聚丙烯酰胺凝膠分離擴增片段,在發(fā)現(xiàn)有在植株Cs0404.7中發(fā)現(xiàn)一條差異帶。關(guān)鍵詞:黃瓜(Cucum/ssativusL.)性別分化相關(guān)序列擴增多態(tài)性F基因Ⅱ囂南農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文Abstrac
6、tTheSRAPMolecureMarkerofFGeneInCucumberSupervisor:ProfessorZhangXingguoCandiate:GunSuying(KeyLabinVegetableResearchofChongqing,CollegeofHorticultureandLandscape,SouthwestAgriculturalUniversity,Chongqing,China,400716)AbstractCucumber(CucumissativusL.)originatedfromthenorthernpartofIndia,Sout
7、hoftheHymalays,ItwascultivatedallovertheworldandspreadtoChinafrommiddleAsia161.Cucumberisakindofannualclimberplantthatlikestogrowinwarmcondition.Thecucumberoffersthefoodwiththeyoungandtenderfruit;itisnutritious15
8、.Withthedevelopmentofprotectedhorticultur