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《褪黑素對(duì)大鼠重癥急性胰腺炎腎臟損傷的保護(hù)作用與機(jī)制研究》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
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5、JJ¨Y178466腺炎腎臟損傷的保護(hù)作用及機(jī)制研究摘要目的：觀察重癥急性胰腺炎大鼠血清超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)，腎臟組織Livin蛋白和Caspase．9表達(dá)的變化，以探討褪黑素對(duì)重癥急性胰腺炎(SAP)相關(guān)腎臟損傷的保護(hù)作用及相關(guān)機(jī)制。方法：雌性SD大鼠90只，隨機(jī)分為正常對(duì)照組(NC組)(12H、24H、48H組分別各lO只)，模型組(SAP紺1)(12H、24H、48H組分別各lO只)，褪黑素組(MT組)(12H、24H、48H組分別各10只)。大鼠術(shù)前12H禁食，自由飲水。3％的戊巴比妥鈉
6、按40mg／婦的劑量經(jīng)腹腔注射麻醉。常規(guī)消毒，鋪巾，在無菌操作下做上腹正中切口3cm左右，打開腹腔，找到胃十二指腸交界處，再向下尋找到胰膽管十二指腸開口處。用絲線結(jié)扎(活結(jié))近肝門處胰膽管，用4．5號(hào)頭皮針于十二指腸乳頭附近經(jīng)十二指腸腸壁穿刺，逆行插入胰膽管，并在十二指腸乳頭處用手指捏住胰管末端。按lml／kg將5％?；悄懰徕c逆行勻速推注至胰管中(O．2ml／min)，使整個(gè)胰膽管均勻隆起。退出針頭，即用手壓迫進(jìn)針處約3～5min，然后去除結(jié)扎線，關(guān)腹，并同時(shí)開始計(jì)時(shí)觀察。正常對(duì)照組開腹后翻動(dòng)腸壁即關(guān)腹。褪黑素組在術(shù)后10分鐘用褪黑素溶液于大鼠背部皮下注射3ml。褪黑素
7、按照文獻(xiàn)數(shù)據(jù)選取大劑量(50mg／l(g)。MT先被無水乙醇溶解，再用生理鹽水稀釋，使乙醇的終濃度為l％。模型組大鼠采用同樣方法給予等量的1％乙醇溶液。用全自動(dòng)生化分析儀測(cè)定大鼠血清淀粉酶，肌酐(Cr)，尿素氮(BUN)；用硫代巴比妥法測(cè)定MDA含量，黃嘌呤氧化酶法測(cè)定SOD活力；免疫組化法檢測(cè)腎組織Livin和Caspase．9的表達(dá)；原位末端標(biāo)記法(TI帆L)檢測(cè)腎臟細(xì)胞凋亡率。結(jié)果：1．胰腺的病理改變：正常對(duì)照組大鼠胰腺組織大體所見未見明顯病變。SAP造模組大鼠胰膽管逆行注入5％?；悄懰徕c后，胰管周圍胰腺組織顏色立即變紅，并逐漸擴(kuò)展、加深。SAP造模12H后再次剖
8、腹發(fā)現(xiàn)胰腺顏色紫暗，充血水腫明顯，可見局部壞死及出血，腹水明顯，呈淡紅色。褪黑素組大鼠12H后剖腹見胰腺顏色變暗，充血水腫，但較模型組程度輕，未見明顯壞死、出血，有少量腹水。SAP造模24H后，剖腹可見腹腔內(nèi)大量淡紅色腹水，胰腺與周圍臟器粘連嚴(yán)重，表面可見多處出血點(diǎn)及壞死灶。褪黑素24H干預(yù)組剖腹觀察，大鼠腹腔內(nèi)可見腹水，胰腺與周圍組織輕度粘連，胰腺水腫，色澤紫暗，胰腺及網(wǎng)膜組織多處皂化斑。SAP造模48H后，剖腹可見腹腔內(nèi)大量血性腹水，胰腺與周圍臟器粘連嚴(yán)重，表面可見多處出血點(diǎn)、壞死灶及皂化斑。褪黑素48H干預(yù)組剖腹觀察，大鼠腹腔內(nèi)可見腹水，腸管淤脹，胰腺與周圍組織輕
9、度粘連，胰腺水腫，色澤紫暗，胰腺及網(wǎng)膜組織多處皂化斑。光鏡下觀察：正常組胰腺組織結(jié)構(gòu)完整，間質(zhì)無炎細(xì)胞浸潤(rùn)。SAP模型12H組可見胰腺葉間隔、小葉間隙、腺泡間隔增寬及少量炎細(xì)胞浸潤(rùn)；褪黑素12H干預(yù)組胰腺小葉間隙增寬、少量炎細(xì)胞浸潤(rùn)，較胰腺炎組程度輕。SAP模型24H組時(shí)胰腺損傷較顯著，胰腺腺泡腫脹、出血、小葉內(nèi)和小葉外周局灶或片狀壞死，間質(zhì)可見較大量炎細(xì)胞浸潤(rùn)、部分腺葉正常結(jié)構(gòu)消失。褪黑素24H干預(yù)組胰腺間質(zhì)疏松水腫，小葉小片狀壞死，間質(zhì)有炎細(xì)胞浸潤(rùn)，小葉結(jié)構(gòu)相對(duì)清晰。SAP模型48H組時(shí)胰腺損傷已經(jīng)十分顯著，表現(xiàn)為胰腺腺泡極度腫脹、出血、小葉內(nèi)和小葉外周局灶或片狀壞
10、死，間質(zhì)可見大量炎細(xì)胞浸潤(rùn)、部分腺葉正常結(jié)構(gòu)消失。褪黑素48H干預(yù)組胰腺間質(zhì)疏松水腫，可見紅細(xì)胞滲出、小葉小片狀壞死，間質(zhì)有炎細(xì)胞浸潤(rùn)，小葉結(jié)構(gòu)相對(duì)清晰。2．腎臟組織病理改變：正常對(duì)照組大鼠腎臟組織大體所見未見明顯病變。SAP模型組12H時(shí)腎臟外觀輕度水腫，呈暗紫色；24H時(shí)腎臟充血水腫加重，并可見少量出血點(diǎn)。48H時(shí)腎臟充血水腫嚴(yán)重，并可見大量出血點(diǎn)。褪黑素干預(yù)組各時(shí)間點(diǎn)腎臟病理改變均較SAP組減輕。光鏡觀察結(jié)果：正常對(duì)照組未見異常。各時(shí)點(diǎn)腎皮質(zhì)、髓質(zhì)結(jié)構(gòu)清晰，腎小管、腎小球結(jié)構(gòu)正常。SAP組12H時(shí)腎小球輕度腫脹，腎小管腫脹較為明顯，腎間質(zhì)見炎細(xì)胞浸潤(rùn)；24H時(shí)腎小
11、球、腎小管腫脹加重，腎小管上皮細(xì)胞可見驢死，腎間質(zhì)炎細(xì)胞增多。48H時(shí)腎小球、腎小管腫脹嚴(yán)重，腎小球可見淤血，腎小管上皮細(xì)胞可見壞死，腎間質(zhì)大量炎細(xì)胞，可見管型。褪黑素干預(yù)組各時(shí)間點(diǎn)光鏡下所見病理改變均較SAP組減輕。3．生化指標(biāo)：SAP造模組各時(shí)間點(diǎn)的血清AMY、Cr、BUN及MDA含量較正常組各相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)顯著升高(P<0．01)；SAP造模組各時(shí)間點(diǎn)的SOD活性較正常組各相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)顯著降低(P<0．01)。與SAP造模組比較，褪黑素干預(yù)組各時(shí)間點(diǎn)的血清AMY、Cr、BUN及MDA含量顯著降低(P
