垂盆草對重癥急性胰腺炎大鼠肝損傷保護(hù)作用的實(shí)驗(yàn)研究

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1、溫州醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文垂盆草對重癥急性胰腺炎大鼠肝損傷保護(hù)作用的實(shí)驗(yàn)研究姓名：張濤申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：外科學(xué)指導(dǎo)教師：周蒙滔2012-05-24溫州醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文垂盆草對重癥急性胰腺炎大鼠肝損傷保護(hù)作用的實(shí)驗(yàn)研究目的：急性胰腺炎(acutepancreatitis，AP)是臨床上常見的急癥，是多種病因?qū)е乱让冈谝认賰?nèi)被激活后引起胰腺組織自身消化、水腫、出血甚至壞死的炎癥反應(yīng)。其病變程度輕重不一，大多數(shù)以胰腺水腫為主，病情常呈自限性，預(yù)后良好。少數(shù)重者，胰腺出血壞死，常繼發(fā)感染、腹膜炎、休克及多器官功能衰竭等多種并發(fā)癥，稱為重癥急性胰腺炎(severeacutepancreatiti

2、s，SAP)，因其發(fā)病急、發(fā)展快、病情兇險(xiǎn)、病死率高，仍是目前臨床上一大難題。SAP所引起的肝損傷是SAP嚴(yán)重的并發(fā)癥之一，不但可以加重胰腺炎病情，而且直接影響SAP預(yù)后，甚至最終發(fā)展為肝功能衰竭，導(dǎo)致患者死亡。本文旨在通過檢測SAP大鼠肝臟組織中NF—KB蛋白表達(dá)，IL一6、IL10和TNF—Q水平及肝臟組織病理學(xué)觀察，研究垂盆草(SedumsarmentosumBunge，SsB)對SAP大鼠肝損傷的保護(hù)作用及作用機(jī)制，從而為垂盆草應(yīng)用于SAP及其并發(fā)癥的治療提供一定的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法：42只健康雄性Sprague—Dawley大鼠，體重200—2509，隨機(jī)分為假手術(shù)組(shamo

3、perationgroup，SO組)、重癥急性胰腺炎組(severeacutepancreatitis，SAP組)和垂盆草治療組(SedumsarmentosumBungetreatment，SsB組)，每組分為12、24h兩個(gè)時(shí)間點(diǎn)組，每個(gè)時(shí)間點(diǎn)組內(nèi)7只。本實(shí)驗(yàn)采用經(jīng)十二指腸乳頭逆行膽胰管注射5％?；悄懰徕c(O．Iml／1009)的方法制備大鼠SAP模型。造模后SsB組皮下注射垂盆草(100mg／lOOg)，SO組與SAP組則予等量生理鹽水皮下注射，12h時(shí)間點(diǎn)組術(shù)后給予一次藥物，24h時(shí)間點(diǎn)組于術(shù)后12h再次皮下注射藥物一次。各組分別于造模后12、24h處死大鼠，取肝臟組織分裝，分別予

4、4％多聚甲醛溶液固定、一80。C冰箱凍存，采用以下檢測：①石蠟切片常規(guī)HE染色，進(jìn)行肝臟組織鏡下觀察；②免疫組化檢測肝臟組織中核轉(zhuǎn)錄因子一KB(NF—KB)的表達(dá)；③酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)方溫州醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文法檢測肝臟組織勻漿液中白細(xì)胞介素一6(IL一6)、白細(xì)胞介素一10(工L一10)和腫瘤壞死因子一Q(TNF-Q)表達(dá)，并觀察垂盆草對上述各項(xiàng)指標(biāo)的影響。結(jié)果：1．組織病理觀察：①大體觀察：S0組肝臟外觀形態(tài)無明顯改變。SAP組腹腔內(nèi)見大量混濁血性腹水，胃腸道明顯擴(kuò)張，大網(wǎng)膜、腸系膜可見皂化斑，胰腺腫脹、可見有出血壞死灶；肝臟表面彌漫性出血并可見壞死灶，體積增大，包膜緊張。S

5、sB組見少量腹水，胰腺腫脹，出血壞死情況較SAP組明顯改善；肝臟體積增大，色澤灰暗，較SAP組為輕。②鏡下觀察：S0組正常肝臟表現(xiàn)；SAP組可見肝細(xì)胞氣球樣變，肝細(xì)胞界限不清，少量局造性壞死，肝竇擴(kuò)張充血，匯管區(qū)內(nèi)炎性細(xì)胞浸潤；SsB組肝臟改變則較SAP組有明顯改善。2．肝臟組織NF—KB蛋白表達(dá)的變化：S0組肝組織中幾乎無陽性表達(dá)。SAP組表達(dá)明顯升高，與S0組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0．05)。與SAP組相比，SsB組NF—KB表達(dá)在12h、24h時(shí)低于同時(shí)段的SAP組，兩者比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P

6、L-6、IL一10及TNF-Q水平均顯著高于S0組(P<0．05)，SsB組IL一6和TNF—Q水平顯著低于SAP組(P<0．05)，而IL-IO水平顯著高于SAP組(P

7、炎：垂盆草；ELISA：免疫組化：肝損傷溫州醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文AnExperimentalStudyofProtectiveEffectofSedumSarmentosumBungonLiverInjuryinRatwithbedumarmentosUBunge0n1VerRatW1tObjective：beVereACUteranCreat1tlS^■一-●-●AbstractTostudytheprotectivee